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发育生物学
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Immunfluoreszenz, Clearing und Multiphotonenmikroskopie des gesamten Eierstocks zur quantitativen 3D-Analyse der sich entwickelnden Ovarialreserve in der Maus
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发育生物学
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JoVE 杂志 发育生物学
Whole Ovary Immunofluorescence, Clearing, and Multiphoton Microscopy for Quantitative 3D Analysis of the Developing Ovarian Reserve in Mouse
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Immunfluoreszenz, Clearing und Multiphotonenmikroskopie des gesamten Eierstocks zur quantitativen 3D-Analyse der sich entwickelnden Ovarialreserve in der Maus

DOI:
10.3791/62972-v

•

12:36 min

•

September 03, 2021

•

, , ,
1The Jackson Laboratory

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:00Perfusion, Dissection, and Fixation of Pubertal Ovaries
  • 02:34Whole-Mount Ovary Immunostaining
  • 03:59Clearing of Immunostained Whole-Mount Ovaries
  • 04:54Sample Setup and Imaging with a Multiphoton Microscope
  • 06:54Oocyte Quantification
  • 09:28Results: Quantitative and Qualitative Analysis of the Ovaries Using Immunostaining, Multiphoton Microscopy, and 3D Visualization
  • 11:51Conclusion

Summary

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Hier präsentieren wir ein optimiertes Protokoll für die Abbildung ganzer Eierstöcke für quantitative und qualitative Analysen mittels Whole-Mount-Immunfärbung, Multiphotonenmikroskopie sowie 3D-Visualisierung und -Analyse. Dieses Protokoll ermöglicht eine zuverlässige, wiederholbare Verarbeitung mit hohem Durchsatz, die für die Toxikologie, die klinische Diagnostik und genomische Assays der Eierstockfunktion geeignet ist.

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Keywords: Whole OvaryImmunofluorescenceClearingMultiphoton Microscopy3D AnalysisOvarian ReserveMouseGerm CellsOvarian DevelopmentPerfusionParaformaldehydeImmunostaining

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