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Ensaio de cultura de myofibra única para a avaliação da funcionalidade de células-tronco musculares adultas Ex Vivo
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生物学
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JoVE 杂志 生物学
Single Myofiber Culture Assay for the Assessment of Adult Muscle Stem Cell Functionality Ex Vivo

Ensaio de cultura de myofibra única para a avaliação da funcionalidade de células-tronco musculares adultas Ex Vivo

DOI:
10.3791/62257-v

•

09:19 min

•

February 15, 2021

•

, , , , ,
1Leibniz Institute on Aging, Fritz-Lipmann-Institute

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Preparing Pipettes for Trituration of the Collagenase-Digested Muscles
  • 01:54EDL Muscle Isolation and Collagenase Digestion
  • 03:19Myofiber Dissociation and Culture
  • 04:20siRNA Transfection, Fixation, and IF Staining
  • 06:31Results: Culture and Transfection of Murine EDL Muscle-Derived Single Myofibres
  • 08:34Conclusion

Summary

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Neste protocolo é descrito um método de cultivo in vitro e análise funcional para células-tronco musculares, que preserva a maioria de suas interações com seu nicho endógeno.

Tags

Muscle Stem CellsSingle Myofiber CultureEx VivoNicheSiRNA TransfectionPasteur PipettesHorse SerumEthanolTibialis AnteriorEDL MuscleDigestionIsolation MediumMyofibers

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