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Test di coltura di una singola miofibra per la valutazione della funzionalità delle cellule staminali muscolari adulte Ex Vivo
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JoVE 杂志 生物学
Single Myofiber Culture Assay for the Assessment of Adult Muscle Stem Cell Functionality Ex Vivo
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Test di coltura di una singola miofibra per la valutazione della funzionalità delle cellule staminali muscolari adulte Ex Vivo

DOI:
10.3791/62257-v

•

09:19 min

•

February 15, 2021

•

, , , , ,
1Leibniz Institute on Aging, Fritz-Lipmann-Institute

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:50Preparing Pipettes for Trituration of the Collagenase-Digested Muscles
  • 01:54EDL Muscle Isolation and Collagenase Digestion
  • 03:19Myofiber Dissociation and Culture
  • 04:20siRNA Transfection, Fixation, and IF Staining
  • 06:31Results: Culture and Transfection of Murine EDL Muscle-Derived Single Myofibres
  • 08:34Conclusion

Summary

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In questo protocollo viene descritto un metodo di coltivazione e analisi funzionale in vitro per le cellule staminali muscolari, che conserva la maggior parte delle loro interazioni con la loro nicchia endogena.

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Muscle Stem CellsSingle Myofiber CultureEx VivoNicheSiRNA TransfectionPasteur PipettesHorse SerumEthanolTibialis AnteriorEDL MuscleDigestionIsolation MediumMyofibers

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