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Cristallizzazione e determinazione strutturale di un enzima:complesso di substrati mediante cristallografia seriale in un chip microfluidico versatile
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生物化学
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JoVE 杂志 生物化学
Crystallization and Structural Determination of an Enzyme:Substrate Complex by Serial Crystallography in a Versatile Microfluidic Chip
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Cristallizzazione e determinazione strutturale di un enzima:complesso di substrati mediante cristallografia seriale in un chip microfluidico versatile

DOI:
10.3791/61972-v

•

10:45 min

•

March 20, 2021

•

, , , , , , , , , ,
1Université de Strasbourg, Architecture et Réactivité de l’ARN, UPR 9002, CNRS,Institut de Biologie Moléculaire et Cellulaire, 2Biochemistry and Molecular Biology, Institute for Biochemistry,Leipzig University, 3Paul Scherrer Institute, Swiss Light Source, 4European XFEL GmbH

Chapters

  • 00:00Introduction
  • 01:10ChipX Presentation
  • 02:25Loading Biomolecule Samples in ChipX
  • 03:12Loading Crystallization Solutions in ChipX
  • 04:10Growing Crystals in ChipX
  • 05:03Serial Crystallography Analysis in ChipX
  • 08:33Representative Results
  • 09:55Conclusion

Summary

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Viene descritto un dispositivo microfluidico versatile che consente la cristallizzazione di un enzima utilizzando il metodo di contro-diffusione, l'introduzione di un substrato nei cristalli mediante ammollo e la determinazione della struttura 3D del complesso enzima:substrato mediante un'analisi seriale dei cristalli all'interno del chip a temperatura ambiente.

Tags

CrystallizationStructural DeterminationEnzyme-substrate ComplexSerial CrystallographyMicrofluidic ChipCounter-diffusionIn Situ X-ray DiffractionBiomoleculeCrystal GrowthRoom Temperature Analysis

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