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Aislamiento y cultivo de sándwich de colágeno 3D de hepatocitos primarios de ratón para estudiar el papel del citoesqueleto en la formación canalicular de bilis en Vitro
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生物学
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JoVE 杂志 生物学
Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro
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Aislamiento y cultivo de sándwich de colágeno 3D de hepatocitos primarios de ratón para estudiar el papel del citoesqueleto en la formación canalicular de bilis en Vitro

DOI:
10.3791/60507-v

•

10:12 min

•

December 20, 2019

•

, , ,
1Laboratory of Integrative Biology,Institute of Molecular Genetics of the Czech Academy of Sciences

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Collagen Sandwich Preparation
  • 01:40Liver Harvest
  • 04:04Primary Hepatocyte Isolation
  • 05:073D Collagen Sandwich Primary Hepatocyte Culture
  • 06:11Immunolabeling
  • 07:47Results: Representative Assessment of Cytoskeleton Function in In Vitro Bile Canalicular Formation
  • 09:34Conclusion

Summary

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Aquí se presenta un protocolo para el aislamiento de hepatocitos de ratón de hígados de ratón adultos utilizando una técnica de perfusión de colagenasa modificada. También se describe el cultivo a largo plazo de hepatocitos en un ajuste de sándwich de colágeno 3D, así como la inmunoetiquetado de los componentes citoesqueléticos para estudiar la formación canalicular biliar y su respuesta al tratamiento.

Tags

Keywords: 3D Collagen Sandwich CulturePrimary Mouse HepatocytesBile Canalicular FormationCytoskeletonLiver IsolationHepatocyte IsolationIn Vitro StudiesPerfusionHeparinDMEMCollagen IPBSCell Culture

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