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Isolamento e cultura sanduíche de colágeno 3D de hepatócitos de camundongos primários para estudar o papel do citoesqueleto na formação bile canalicular in vitro
JoVE 杂志
生物学
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JoVE 杂志 生物学
Isolation and 3D Collagen Sandwich Culture of Primary Mouse Hepatocytes to Study the Role of Cytoskeleton in Bile Canalicular Formation In Vitro

Isolamento e cultura sanduíche de colágeno 3D de hepatócitos de camundongos primários para estudar o papel do citoesqueleto na formação bile canalicular in vitro

DOI:
10.3791/60507-v

•

10:12 min

•

December 20, 2019

•

, , ,
1Laboratory of Integrative Biology,Institute of Molecular Genetics of the Czech Academy of Sciences

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:46Collagen Sandwich Preparation
  • 01:40Liver Harvest
  • 04:04Primary Hepatocyte Isolation
  • 05:073D Collagen Sandwich Primary Hepatocyte Culture
  • 06:11Immunolabeling
  • 07:47Results: Representative Assessment of Cytoskeleton Function in In Vitro Bile Canalicular Formation
  • 09:34Conclusion

Summary

自动翻译

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Apresentado aqui é um protocolo para o isolamento de hepatócitos de camundongos de fígados de camundongos adultos usando uma técnica de perfusão de colagem modificada. Também é descrita a cultura de longo prazo dos hepatócitos em um ambiente de sanduíche de colágeno 3D, bem como imunorotulagem dos componentes citoesqueléticos para estudar a formação canalicular biliar e sua resposta ao tratamento.

Tags

Keywords: 3D Collagen Sandwich CulturePrimary Mouse HepatocytesBile Canalicular FormationCytoskeletonLiver IsolationHepatocyte IsolationIn Vitro StudiesPerfusionHeparinDMEMCollagen IPBSCell Culture

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