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깊은 단세포 RNA 염기서열 분석에 대한 하나의 성인 마우스 뇌 반구에서 영역 별 Microglia의 격리
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Isolation of Region-specific Microglia from One Adult Mouse Brain Hemisphere for Deep Single-cell RNA Sequencing
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깊은 단세포 RNA 염기서열 분석에 대한 하나의 성인 마우스 뇌 반구에서 영역 별 Microglia의 격리

DOI:
10.3791/60347-v

•

09:49 min

•

December 03, 2019

•

,
1Department of Neurobiology,Stanford University School of Medicine

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:43Brain Region Dissection
  • 01:43Mechanical Tissue Dissociation
  • 02:40Myelin Removal
  • 04:25Staining for Fluorescence-activated Cell Sorting
  • 05:18Index FACS Sorting
  • 05:46Single-cell RNA-sequencing Library Preparation
  • 07:17Results: Isolation of Region-Specific Microglia for Deep Single-Cell RNA Sequencing
  • 09:16Conclusion

Summary

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우리는 성인 마우스 뇌 반구의 다른 해부 된 영역에서 microglia의 격리를위한 프로토콜을 제공하고, 전체 길이 전사체의 깊은 단일 세포 RNA 시퀀싱을위한 반자동 라이브러리 준비를 제공합니다. 이 방법은 건강과 질병에서 microglia의 기능적 이질성을 해명하는 데 도움이됩니다.

Tags

MicrogliaSingle-cell RNA SequencingBrain RegionsCell IsolationCell SeparationDounce HomogenizerMagnetic SeparationRNA ExtractionLibrary PreparationDeep Sequencing

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