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Induktion und Bewertung der Graft-Versus-Host-Krankheit in einem xenogenen Murine-Modell und Quantifizierung menschlicher T-Zellen in Mausgeweben mit digitaler PCR
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Induction and Scoring of Graft-Versus-Host Disease in a Xenogeneic Murine Model and Quantification of Human T Cells in Mouse Tissues using Digital PCR
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Induktion und Bewertung der Graft-Versus-Host-Krankheit in einem xenogenen Murine-Modell und Quantifizierung menschlicher T-Zellen in Mausgeweben mit digitaler PCR

DOI:
10.3791/59107-v

•

06:06 min

•

May 23, 2019

•

,
1Department of Microbiology, Molecular Genetics, and Immunology,University of Kansas Medical Center

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:40Non-Obese Diabetic (NOD) Scid Gamma (NSG) Mouse Irradiation and Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Injection
  • 02:22Retro-Orbital Injection
  • 03:24Clinical Graft Versus Host Disease (GVHD) Scoring
  • 03:58Genomic DNA Isolation and Human T Cell Quantification
  • 04:59Results: Representative GVHD Disease Progression and Digital PCR Human T Cell Detection
  • 05:37Conclusion

Summary

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Hier stellen wir ein Protokoll zur Induzieren und Bewertung von Krankheiten bei einem xenogenen Transplantat-versus-Host-Krankheitsmodell (XenoGVHD) vor. xenoGVHD bietet ein In-vivo-Modell zur Untersuchung der Immunsuppression menschlicher T-Zellen. Darüber hinaus beschreiben wir, wie man menschliche T-Zellen in Geweben mit digitaler PCR als Werkzeug zur Quantifizierung der Immunsuppression erkennt.

Tags

Xenograft-versus-host DiseaseXenoGVHDNSG MiceIrradiationPeripheral Blood Mononuclear CellsPBMCsDensity Gradient CentrifugationRetro-orbital InjectionHuman T CellsImmunosuppressive Therapies

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