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Une Purification et analyse d’activité In Vitro pour un (p) ppGpp synthétase de Clostridium difficile
Chapters
- 00:04Title
- 00:44Protein Purification by Nickel Affinity Chromatography
- 03:30Protein Activity Assay by Thin Layer Chromatography
- 07:30Results: Thin Layer Chromatography Reveals that C. difficile RSH is an Active ppGpp Synthetase
- 09:01Conclusion
Nous décrivons ici une méthode pour la purification des enzymes pyrophosphokinase histidine-étiquetées et utilisant la chromatographie sur couche mince des substrats radiomarqués et produits pour le dosage de l' activité enzymatique in vitro. Le dosage de l’activité enzymatique est largement applicable aux kinase, cyclase de nucléotides ou réaction de transfert de phosphore dont le mécanisme comprend l’hydrolyse de nucléotides triphosphate.
