需要订阅 JoVE 才能查看此. 登录或开始免费试用。
Chapters
- 00:04Title
- 00:28Caffeine Extraction in Cell Suspension of C. arabica L.
- 00:55Conditions for the Assessment of Caffeine by Thin Layer Chromatography (TLC) Denistometry
- 01:29Ribonucleic Acid (RNA) Isolation
- 02:55Incubation of RNA Transcript with Deoxyribonuclease (DNase)
- 03:59Complementary Deoxyribonucleic Acid (cDNA) Synthesis
- 05:03Real-Time Quantitative PCR (qPCR) to Amplify the Gene CCS1
- 05:43Total Protein of Cell Suspensions of C. arabica L.
- 06:26Enzymatic Assay for Caffeine Synthase
- 07:39Results: Enzymatic Activity of Caffeine Synthase Gene Evaluated via qPCR
- 08:30Conclusion
Dit protocol beschrijft een efficiënte methode voor de extractie en kwantificering van cafeïne in cel suspensies van C. arabica L. en een experimentele proces voor de evaluatie van de enzymatische activiteit van cafeïne synthase met het niveau van de expressie van het gen dat dit enzym codeert.
