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Journal
/
遗传学
/
哺乳類システムのクローン作成 CRISPR ガイド RNA
JoVE 杂志
遗传学
This content is Free Access.
JoVE 杂志
遗传学
CRISPR Guide RNA Cloning for Mammalian Systems
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
哺乳類システムのクローン作成 CRISPR ガイド RNA
DOI:
10.3791/57998-v
•
06:48 min
•
October 02, 2018
•
Sathiji Nageshwaran*
1,2
,
Alejandro Chavez*
1,2,3
,
Nan Cher Yeo
2
,
Xiaoge Guo
2
,
Alissa Lance-Byrne
,
Angela Tung
,
James J. Collins
4,5,6,7
,
George M. Church
2
1
Wyss Institute for Biologically Inspired Engineering
,
Harvard University
,
2
Department of Genetics
,
Harvard Medical School
,
3
Department of Pathology
,
Massachusetts General Hospital
,
4
Institute for Medical Engineering & Science
,
Massachusetts Institute of Technology
,
5
Synthetic Biology Center
,
Massachusetts Institute of Technology
,
6
Department of Biological Engineering
,
Massachusetts Institute of Technology
,
7
Broad Institute
Chapters
00:04
Title
00:25
Preparation of the Primers and Expression Vectors
02:05
Ligating the Annealed gRNA Oligonucleotides
02:59
Transformation of
E. coli
04:03
PCR Analysis
05:35
Results: CRISPR Guided RNA Cloning
06:23
Conclusion
Summary
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ここでは、シンプルで効率的と sgRNA のクローニングのコスト効果の高い方法の通りです。
Tags
CRISPR
Guide RNA
Cloning
Mammalian System
Plasmid
Single-guide RNA
Oligonucleotide
Ligation
E. Coli
Competent Cells
Transformation
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