Journal
/
化学
/
Optimering af den genetiske indarbejdelse af kemiske sonder ind i GPCRs til foto-crosslinking kortlægning og Bioorthogonal kemi i Live pattedyrceller
JoVE 杂志
化学
需要订阅 JoVE 才能查看此.  登录或开始免费试用。
JoVE 杂志 化学
Optimizing the Genetic Incorporation of Chemical Probes into GPCRs for Photo-crosslinking Mapping and Bioorthogonal Chemistry in Live Mammalian Cells

Optimering af den genetiske indarbejdelse af kemiske sonder ind i GPCRs til foto-crosslinking kortlægning og Bioorthogonal kemi i Live pattedyrceller

DOI:
10.3791/57069-v

•

14:02 min

•

April 09, 2018

•

, , ,
1Institute of Biochemistry, Faculty of Life Sciences,University of Leipzig

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:11Fluorescence-based Screening of Incorporation Efficiencies
  • 04:22Genetic Incorporation of ncAAs into GPCRs
  • 08:21Ultrafast Bioorthogonal Labeling of GPCRs on Live Mammalian Cells
  • 11:11Results: Incorporation of Chemical Probes into GPCRs in Mammalian Cells for Cross-linking and Imaging Studies
  • 12:52Conclusion

Summary

自动翻译

自动翻译

En letkøbt fluorescens assay er præsenteret for at evaluere effektiviteten af amino-acyl-tRNA-syntetase/tRNA par indarbejde ikke-kanoniske amino-syre (ncAAs) i proteiner udtrykt i pattedyrsceller. Anvendelsen af ncAAs til at studere G-protein koblede receptorer (GPCRs) er beskrevet, herunder foto-crosslinking kortlægning af bindende websteder og bioorthogonal GPCR mærkning på levende celler.

Tags

GPCRPhoto-crosslinkingBioorthogonal ChemistryNon-canonical Amino AcidsAmber Codon SuppressionFluorescence AssayMammalian CellsProtein-protein InteractionsLigand BindingLive Cell Imaging

Article

Embed

添加到播放列表

Usage Statistics

Related Videos

Isolering og kemisk karakterisering af lipid A fra gramnegative bakterier

En enkel og hurtig protokol til måling af neutrale lipider i algeceller Brug Fluorescens

Forberedelse vedhæftende celler for X-ray fluorescens Imaging af Chemical Fiksering

Kemisk Vapor Deposition af en organisk Magnet, Vanadium tetracyanoethylen

Sekventering af Plant Wall Heteroxylans Brug Enzymatisk, Chemical (Methylering) og fysiske (massespektrometri Nuclear Magnetic Resonance) Teknikker

Immobilisering af Multi-biokatalysatorer i alginatkugler for cofaktor Regeneration og Forbedret Genbrugelighed

Syntese af Protein biokonjugater<em> via</em> Cystein-maleimid Kemi

Fremstillingen og egenskaberne af Thermo-reversibelt Tværbundet Rubber Via Diels-Alder Kemi

Indsigt i samspillet mellem aminosyrer og peptider med uorganiske materialer Brug Single-Molecule force spektroskopi

Udarbejdelse og evaluering af<sup> 99m</sup> Tc-mærket tridentat Chelater for Pre-targeting Brug Bioorthogonal Kemi

Read Article