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Analisando supercomplexos da cadeia de transporte de elétrons mitocondrial com eletroforese nativa, ensaios em gel e eletroeluição
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JoVE 杂志 生物化学
Analyzing Supercomplexes of the Mitochondrial Electron Transport Chain with Native Electrophoresis, In-gel Assays, and Electroelution

Analisando supercomplexos da cadeia de transporte de elétrons mitocondrial com eletroforese nativa, ensaios em gel e eletroeluição

DOI:
10.3791/55738-v

•

08:37 min

•

June 01, 2017

•

,
1Department of Pediatrics-Division Cardiology,University of Rochester

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:58In-gel Assays for Cx-I and Cx-V
  • 03:19Electroelution
  • 05:59Results: Isolation, Visualization, amd Analysis of Mitochondrial Supercomplexes
  • 07:00Conclusion

Summary

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Este protocolo descreve a separação de complexos funcionais de cadeia de transporte de elétrons mitocondriais (Cx) IV e supercomplexos usando eletroforese nativa para revelar informações sobre sua montagem e estrutura. O gel nativo pode ser submetido a imunotransferência, ensaios em gel e purificação por eletroeluição para caracterizar ainda mais complexos individuais.

Tags

Mitochondrial Electron Transport ChainSupercomplexesNative ElectrophoresisIn-gel AssaysElectroelutionComplex-1 AssayComplex-5 AssayDetergentsNADHOligomycinNitro Blue TetrazoliumLead NitrateATPBioenergeticsPhysiological IntegrityMembrane Protein Complexes

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