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Analysieren von Supercomplexen der mitochondrialen Elektronentransportkette mit Native Elektrophorese, In-Gel-Assays und Elektrolyse
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JoVE 杂志 生物化学
Analyzing Supercomplexes of the Mitochondrial Electron Transport Chain with Native Electrophoresis, In-gel Assays, and Electroelution
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Analysieren von Supercomplexen der mitochondrialen Elektronentransportkette mit Native Elektrophorese, In-Gel-Assays und Elektrolyse

DOI:
10.3791/55738-v

•

08:37 min

•

June 01, 2017

•

,
1Department of Pediatrics-Division Cardiology,University of Rochester

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:58In-gel Assays for Cx-I and Cx-V
  • 03:19Electroelution
  • 05:59Results: Isolation, Visualization, amd Analysis of Mitochondrial Supercomplexes
  • 07:00Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt die Trennung von funktionellen mitochondrialen Elektronentransportkettenkomplexen (Cx) IV und deren Superkomplexe unter Verwendung der nativen Elektrophorese, um Informationen über deren Zusammenbau und Struktur zu zeigen. Das native Gel kann Immunoblotting, In-Gel-Assays und Reinigung durch Elektroelution unterworfen werden, um einzelne Komplexe weiter zu charakterisieren.

Tags

Mitochondrial Electron Transport ChainSupercomplexesNative ElectrophoresisIn-gel AssaysElectroelutionComplex-1 AssayComplex-5 AssayDetergentsNADHOligomycinNitro Blue TetrazoliumLead NitrateATPBioenergeticsPhysiological IntegrityMembrane Protein Complexes

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