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Concepção, embalagem, entrega e de alto título CRISPR retro e lentivírus via estereotáxica Injection
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Designing, Packaging, and Delivery of High Titer CRISPR Retro and Lentiviruses via Stereotaxic Injection

Concepção, embalagem, entrega e de alto título CRISPR retro e lentivírus via estereotáxica Injection

DOI:
10.3791/53783-v

•

11:28 min

•

May 23, 2016

•

, , , ,
1Department of Physiology and Neurobiology,Geisel School of Medicine at Dartmouth College

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:45Prepare 293FT/293GP Cells for Transfection
  • 03:02Calcium Phosphate Transfection and Viral Particle Collection
  • 05:24Concentration and Purification of the Virus
  • 06:42Stereotaxic Injection
  • 09:40Results
  • 10:59Conclusion

Summary

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O sistema / Cas9 CRISPR oferece o potencial para fazer genoma segmentado edição acessível e disponível para a comunidade científica. Este protocolo destina-se a demonstrar como criar vírus que vai nocaute um gene de interesse utilizando o sistema / Cas9 CRISPR, e depois injetá-las estereotáxicamente no cérebro do rato adulto.

Tags

CRISPRRetrovirusLentivirusStereotaxic Injection神经科学Gene ManipulationGuide RNAPlasmid DesignCell CultureTransfectionHEK293T Cells

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