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Progettazione, Packaging, e consegna di alto titolo CRISPR Retro e lentivirus via Stereotassica iniezione
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Designing, Packaging, and Delivery of High Titer CRISPR Retro and Lentiviruses via Stereotaxic Injection
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Progettazione, Packaging, e consegna di alto titolo CRISPR Retro e lentivirus via Stereotassica iniezione

DOI:
10.3791/53783-v

•

11:28 min

•

May 23, 2016

•

, , , ,
1Department of Physiology and Neurobiology,Geisel School of Medicine at Dartmouth College

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:45Prepare 293FT/293GP Cells for Transfection
  • 03:02Calcium Phosphate Transfection and Viral Particle Collection
  • 05:24Concentration and Purification of the Virus
  • 06:42Stereotaxic Injection
  • 09:40Results
  • 10:59Conclusion

Summary

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Il sistema / Cas9 CRISPR offre il potenziale per fare l'editing genoma mirato accessibile e conveniente per la comunità scientifica. Questo protocollo ha lo scopo di dimostrare come creare virus che sarà ad eliminazione diretta di un gene di interesse utilizzando il sistema / Cas9 CRISPR, e poi iniettare stereotassica nel cervello di topo adulto.

Tags

CRISPRRetrovirusLentivirusStereotaxic Injection神经科学Gene ManipulationGuide RNAPlasmid DesignCell CultureTransfectionHEK293T Cells

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