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Planung, Verpackung und Lieferung von hohen Titern CRISPR Retro und Lentiviren über stereotaktische Injektion
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Designing, Packaging, and Delivery of High Titer CRISPR Retro and Lentiviruses via Stereotaxic Injection
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Planung, Verpackung und Lieferung von hohen Titern CRISPR Retro und Lentiviren über stereotaktische Injektion

DOI:
10.3791/53783-v

•

11:28 min

•

May 23, 2016

•

, , , ,
1Department of Physiology and Neurobiology,Geisel School of Medicine at Dartmouth College

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:45Prepare 293FT/293GP Cells for Transfection
  • 03:02Calcium Phosphate Transfection and Viral Particle Collection
  • 05:24Concentration and Purification of the Virus
  • 06:42Stereotaxic Injection
  • 09:40Results
  • 10:59Conclusion

Summary

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Der CRISPR / Cas9 System bietet das Potenzial, um gezielte Genom Bearbeitung zugänglich und erschwinglich für die wissenschaftliche Gemeinschaft. Dieses Protokoll soll zeigen, wie Viren zu schaffen, die ein Gen von Interesse unter Verwendung des CRISPR / Cas9 System Knockout wird, und sie dann stereotaxically in die erwachsenen Maus Gehirn zu injizieren.

Tags

CRISPRRetrovirusLentivirusStereotaxic Injection神经科学Gene ManipulationGuide RNAPlasmid DesignCell CultureTransfectionHEK293T Cells

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