전체 마운트 In Situ 하이브리드화
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概述
좌식 혼성화(WMISH)의 전산은 배아에서 발현 된 RNA의 위치를 시각화하는 데 사용되는 일반적인 기술이다. 이 과정에서, 합성으로 생성된 RNA 프로브는 표적 유전자의 성적증명서에 먼저 상호 결합되거나 “혼성화된”이다. 면역히스토케 또는 형광은 이러한 RNA 하이브리드를 검출하는 데 사용되어 유전자 발현의 공간 적 및 측두패턴을 드러낸다. 이미지가 계산적으로 재조립되어야 하는 얇은 조직 섹션을 필요로 하는 기존의 시상 혼성화 기술과 달리, 전체 마운트 기술은 전체 배아 또는 구조에 걸쳐 유전자 발현 패턴을 평가할 수 있게 합니다.
이 비디오는 프로브 설계 및 생산, 배아 고정 및 염색, 혼성화 후 신호 감지를 포함한 전체 마운트 염색 및 세부 주요 절차 단계의 기본 개념을 소개합니다. 그런 다음 연구 개발 생물학자가 현재 연구 연구에 WMISH를 적용하는 방법에 대해 알게 될 것입니다.
Procedure
시투 혼성화의 전산은 과학자들이 배아 발달의 분자 기초를 이해할 수 있게 하는 강력한 기술입니다. “전체 마운트”는 조직 조각뿐만 아니라 전체 배아가 사용될 것임을 나타냅니다. “”그 자리에서”위치”를 의미하는 라틴어 문구입니다. 그리고 마지막으로, “혼성화”는 유기체의 세포 내의 mRNA 전사체에 합성적으로 생성된 RNA 분자의 상호 결합을 지칭한다. 이 비디오는 발달 장애?…
Disclosures
No conflicts of interest declared.
成績單
Tags
Whole-mount In Situ HybridizationEmbryonic DevelopmentMolecular BasisComplementary BindingRNA MoleculeMRNA TranscriptDevelopmental DisordersOrganism MorphogenesisTemporally And Spatially Restricted PatternsRiboprobesDinitrophenolBiotinDigoxygeninHaptensAntibody BindingEnzyme ConjugationHorseradish PeroxidaseAlkaline PhosphataseFluorescent DyeColored Dye
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Whole-Mount In Situ Hybridization. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
