Ibridazione in sito whole mount

L’ibridazione in situ a montaggio intero (WMISH) è una tecnica comune utilizzata per visualizzare la posizione degli RNA espressi negli embrioni. In questo processo, le sonde di RNA prodotte sinteticamente vengono prima legate in modo complementare, o “ibridate”, ai trascritti dei geni bersaglio. L’immunoistochimica o fluorescenza viene quindi utilizzata per rilevare questi ibridi di RNA, rivelando modelli spaziali e temporali di espressione genica. A differenza delle tradizionali tecniche di ibridazione in situ, che richiedono sezioni di tessuto sottile le cui immagini dovranno essere riassemblate computazionalmente, la tecnica a montaggio intero consente di valutare i modelli di espressione genica sull’intero embrione o struttura.

Questo video introdurrà i concetti di base della colorazione dell’intero supporto e descriverà in dettaglio le fasi procedurali chiave, tra cui la progettazione e la produzione della sonda, la fissazione e la colorazione dell’embrione e il rilevamento del segnale post-ibridazione. Gli spettatori impareranno quindi come i biologi dello sviluppo stanno applicando WMISH agli studi di ricerca attuali.