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Propagação de<em> 01-vírus Homalodisca coagulata</em> Via<em> Homalodisca vitripennis</em> Cultura de Células
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JoVE 杂志 免疫与感染
Propagation of Homalodisca coagulata virus-01 via Homalodisca vitripennis Cell Culture

Propagação de<em> 01-vírus Homalodisca coagulata</em> Via<em> Homalodisca vitripennis</em> Cultura de Células

DOI:
10.3791/51953-v

•

12:52 min

•

September 25, 2014

•

, , ,
1Department of Biology,University of Texas at Tyler, 2U. S. Horticultural Research Laboratory,USDA ARS

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:52Cell Culture and Whole Virus Extraction
  • 03:56Viral Replication
  • 04:55RNA Extraction and RT-PCR
  • 07:45Confocal Microscopy
  • 09:55Results: Quantification of Cell Survivability in HoCV-01 Infected Cells
  • 12:03Conclusion

Summary

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Aqui apresentamos um protocolo para propagar células Homalodisca vitripennis e HoCV-1 in vitro. Médio foi removido do HoCV-1 culturas positivas e RNA extraído a cada 24 horas para 168 horas. A capacidade de sobrevivência das células foi quantificada por coloração com azul de tripano. Partículas de vírus inteiros foram extraídos após a infecção. RNA extraído foi quantificada por qRT-PCR.

Tags

Keywords: Homalodisca VitripennisHomalodisca Coagulata Virus-01 (HoCV-01)Xylella FastidiosaPierce’s DiseaseCell CultureViral PropagationBiopesticide ProductionQRT-PCRTrypan BlueConfocal Microscopy

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