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JoVE 杂志 生物学
A Protocol for Phage Display and Affinity Selection Using Recombinant Protein Baits

Um protocolo para exibição Fago e Affinity Seleção Usando Iscas proteína recombinante

DOI:
10.3791/50685-v

•

12:36 min

•

February 16, 2014

•

, ,
1Department of Horticulture,University of Kentucky

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:14Growing Bacterial Host (BLT5403) for Titering
  • 02:15Affinity Selection
  • 08:13Titering
  • 09:41Plaque Isolation
  • 10:59Results: Typical Titer and PCR Results for Affinity Selection over an Appropriate Bait
  • 12:12Conclusion

Summary

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A exibição em fagos é uma técnica poderosa para captura de proteínas ou fracções de proteínas que interagem com uma molécula de interesse imobilizada. Uma vez tomada uma decisão sobre o tipo de biblioteca de cDNA de fagos para criar e tela, o protocolo descrito aqui permite a seleção de afinidade eficiente levando à identificação de interagentes.

Tags

Keywords: Phage DisplayAffinity SelectionRecombinant Protein BaitsProtein-protein InteractionsCDNA LibraryAffinity Selection ProtocolPhage TiterNegative ControlsAmpliconsFalse PositivesViral Contamination

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