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Suivi des réduction et par oxydation demi-réactions d'une monooxygénase flavine-dépendante à l'aide Stopped-Flow Spectrophotométrie
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生物工程
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Monitoring the Reductive and Oxidative Half-Reactions of a Flavin-Dependent Monooxygenase using Stopped-Flow Spectrophotometry
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Suivi des réduction et par oxydation demi-réactions d'une monooxygénase flavine-dépendante à l'aide Stopped-Flow Spectrophotométrie

DOI:
10.3791/3803-v

•

12:08 min

•

March 18, 2012

•

, ,
1Department of Biochemistry,Virginia Polytechnic Institute and State University

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:37Anaerobic Buffer
  • 02:24Removing Oxygen from the Stopped-flow System
  • 03:22Key Solutions
  • 04:45Reductive Half-reaction: Monitoring Flavin Reduction
  • 07:31Oxidative Half-reaction: Monitoring Flavin Oxidation
  • 10:10Stopped Flow: Spectral Forms of Af SidA
  • 11:27Conclusion

Summary

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Nous décrivons l'utilisation d'un instrument stopped-flow d'enquêter sur les deux réductrices et l'oxydation des demi-réactions de<em> Aspergillus fumigatus</em> Un sidérophore (Asdi), une monooxygénase flavine-dépendante. Nous montrons ensuite les spectres correspondant à des espèces dans la réaction de l'Asdi et nous calculons les constantes de vitesse de leur formation.

Tags

Stopped-flow SpectrophotometryFlavin-dependent MonooxygenaseAspergillus Fumigatus Siderophore A (SidA)Hydroxylation Of OrnithineBiosynthesis Of Hydroxamate SiderophoresReductive Half-reactionOxidative Half-reactionFADNADPHC4a-hydroperoxyflavin IntermediateMeasurement Of RatesSpectral FormsStopped-flow InstrumentAnaerobic Glove BoxSingle ModeDouble Mixing Settings

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