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Überwachung dynamischen Veränderungen in der mitochondrialen Kalzium während der Apoptose mit einem genetisch kodierten Kalzium-Sensor
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April 01, 2011
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Dieses Protokoll beschreibt eine Methode zur Echtzeit-Messung der mitochondrialen Kalzium-Flüsse durch Fluoreszenz-Imaging. Das Verfahren nutzt ein zirkular permutiert YFP-basierte Dual-Anregung ratiometrische Calcium-Sensor (ratiometrisch PERICAM-mt) selektiv in den Mitochondrien zum Ausdruck gebracht.
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MonitoringDynamic ChangesMitochondrial Calcium LevelsApoptosisGenetically Encoded Calcium SensorIntracellular Calcium ConcentrationStimuliCellular ProcessesProliferationDifferentiationCalcium AccumulationPro-apoptotic FactorsCytosolLiving CellsIn SituHigh-resolution Fluorescent ImagingDual-excitation RatiometricNon-ratiometric Synthetic Calcium Indicator DyesIntracellular Calcium SignalingCytosolic Calcium FluxesRhod-2Rhod-FFSynthetic IndicatorsMitochondriaRepetitive IncreasesMitochondrial MorphologyLeak Out Of MitochondriaLong-term ExperimentsGenetically Encoded Calcium IndicatorsGreen Fluorescent Protein (GFP)Aequorin
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Akimzhanov, A. M., Boehning, D. Monitoring Dynamic Changes In Mitochondrial Calcium Levels During Apoptosis Using A Genetically Encoded Calcium Sensor. J. Vis. Exp. (50), e2579, doi:10.3791/2579 (2011).
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