Accès à la différenciation précoce des lymphocytes T CD4⁺ auxiliaires folliculaires spécifiques du virus chez les souris infectées par le LCMV aigu

Lorsqu’ils rencontrent différents agents pathogènes ou menaces, les lymphocytes T CD4⁺ naïfs adaptent leurs réponses immunitaires en se différenciant en divers sous-ensembles de lymphocytes T auxiliaires (T_H) dotés de fonctions spécialisées¹. Dans le scénario d’une infection virale aiguë, une grande partie des lymphocytes T CD4⁺ naïfs se différencient en lymphocytes T auxiliaires folliculaires (T_FH) qui aident les lymphocytes B ^2,3. Distinctes des autres sous-ensembles de cellules T_H CD4⁺ (p. ex., cellules T_H1, T_H2, T_H9 et T_H17), les cellules T_FH expriment un niveau substantiel de CXCR5, qui est le récepteur de la chimiokine à tête chercheuse des cellules B CXCL13, permettant aux cellules T_FH de migrer dans les follicules des cellules B. Dans les follicules des cellules B, les cellules T_FH aident les cellules B apparentées à initier et à maintenir les réactions du centre germinal, permettant ainsi une production rapide d’anticorps de haute affinité et une mémoire humorale à long terme ^2,3.

Lors d’une infection virale aiguë, l’engagement précoce du devenir des lymphocytes T_FH spécifiques du virus se produit dans les 72 h ^4,5 et est contrôlé par le répresseur transcriptionnel lymphome-6 à cellules B (Bcl-6)^5,6,7,8, qui agit comme le « régulateur principal » régissant les décisions de destin des cellules T_FH. La carence en Bcl-6 ralentit sévèrement la différenciation des cellules T_FH, tandis que l’expression ectopique de Bcl-6 favorise considérablement l’engagement du destin des cellules T_FH. En plus de Bcl-6, plusieurs molécules sont impliquées dans l’instruction de l’engagement précoce du destin des cellules T_FH. Les facteurs de transcription TCF-1 et LEF-1 initient la différenciation des cellules T_FH via l’induction de Bcl-6 ^9,10,11. L’inhibition de Blimp1, à la fois par Bcl-6 et TCF-1, est nécessaire pour l’engagement précoce du destin des cellules T_FH ^11,12. STAT1 et STAT3 sont également nécessaires à la différenciation précoce des cellules T_FH ¹³. De plus, les modifications épigénétiques par l’histone méthyltransférase EZH2^14,15 et la méthyltransférase m6A METTL3¹⁶ aident à stabiliser les programmes transcriptionnels des cellules T_FH (en particulier Bcl6 et Tcf7) et donc à amorcer l’engagement précoce du destin des cellules T_FH. Bien que des progrès, y compris les molécules susmentionnées et d’autres, résumées ailleurs^{3, aient} été réalisés dans la compréhension des régulations transcriptionnelles et épigénétiques de l’engagement précoce des cellules T_FH, des molécules jusqu’alors inconnues restent à apprendre.

Dans le modèle murin d’infection par le virus de la chorioméningite lymphoïde aiguë (LCMV), les lymphocytes T CD4⁺ congéniques SMARTA (SM) transgéniques transférés par adoption, qui reconnaissent spécifiquement l’épitope de la glycoprotéine LCMV I-A^BGP_66-77, SUBISSENT UNE DIFFÉRENCIATION CELLULAIRE T_FH ou T_H1 au cours de l’infection virale. Ce modèle de différenciation de la bifurcation T_FH/T_H1 soutient l’avancement du modèle d’infection SM/LCMV aiguë dans l’étude de la biologie des cellules T_FH spécifiques du virus. En effet, le modèle d’infection SM/LCMV aiguë a été largement utilisé dans le domaine de la recherche sur les cellules T_FH et a joué un rôle crucial dans des découvertes marquantes en biologie des cellules T_FH. Cela comprend l’identification de Bcl-6 susmentionné comme facteur de transcription définissant la lignée des cellules T_FH ^5,6, ainsi que d’autres facteurs transcriptionnels importants (par exemple, Blimp-1⁶, TCF-1/LEF ^9,10,11, STAT1/STAT3¹³, STAT5¹⁷, KLF2¹⁸ et Itch¹⁹) guidant la différenciation des cellules T_FH, les régulations post-transcriptionnelles ( par exemple, METTL3¹⁶ et miR-17~92²⁰) de la différenciation des cellules T_FH, de la mémoire et de la plasticité des cellules T_FH ^21,22 et des stratégies de vaccination rationnelles ciblant les cellules T_FH (par exemple, le sélénium²³).

La présente étude décrit des méthodes reproductibles pour accéder à l’engagement précoce du devenir des cellules T_FH spécifiques du virus, y compris (1) l’établissement d’un modèle de souris chimère SM infectée par un LCMV aigu adapté à l’accès aux cellules T_FH différenciées précocement, (2) la réalisation de colorations par cytométrie en flux de molécules associées aux cellules T_FH différenciées précocement, et (3) la manipulation de gènes basée sur des vecteurs rétroviraux dans SM CD4⁺ lymphocytes T. Ces méthodes seront utiles pour les études portant sur l’engagement précoce du devenir des cellules T_FH spécifiques du virus.