Здесь мы представляем протокол, описывающий методы разведения крыс, процедуры обучения плаванию и протоколы кормления беременных крыс после размножения. Этот протокол представляет собой животную модель для изучения влияния материнских упражнений во время беременности на потомство и лежащие в их основе механизмы.
Концепция «Истоки здоровья и болезней развития» подчеркивает влияние ранней среды на хронические неинфекционные заболевания, такие как диабет, сердечно-сосудистые заболевания и рак. Исследования с использованием животных моделей изучали, как материнские факторы, такие как недоедание, переедание, ожирение, воздействие химических веществ или гипоксия, влияют на развитие плода и здоровье потомства, что приводит к таким проблемам, как низкий вес при рождении, высокое кровяное давление, дислипидемия и резистентность к инсулину. Учитывая растущую распространенность избыточного веса и ожирения среди женщин репродуктивного возраста, решающее значение имеют эффективные вмешательства. Физические упражнения для матери во время беременности стали ключевым вмешательством, приносящим пользу как матери, так и потомству и снижающим риск заболеваний. В этом исследовании сравниваются различия трех моделей упражнений на беременных крысах: добровольный бег на колесах, моторизованные беговые дорожки и плавание. Плавание является наиболее выгодным вариантом из-за его безопасного и контролируемого уровня интенсивности. В этом протоколе подробно описаны методы разведения крыс, обучение плаванию во время беременности и протоколы кормления после осеменения. Эта модель, подходящая для различных видов крыс и мышей, полезна для изучения пользы физических упражнений для здоровья потомства и благополучия между поколениями.
В последние два десятилетия появилась концепция «Истоки здоровья и болезней в развитии» (DOHaD), которая показала, что влияние окружающей среды на ранних этапах развития влияет на риск более поздних патофизиологических процессов, связанных с хроническими неинфекционными заболеваниями (НИЗ), особенно диабета, сердечно-сосудистых заболеваний и некоторыхвидов рака1. Во время наиболее пластичной фазы внутриутробного развития плода, когда потомство подвергается воздействию внутриутробной среды, взаимодействие генов и окружающей среды и перфузия матки являются решающими факторамиперепрограммирования плода. В предыдущих исследованиях преимущественно использовались животные модели для изучения пагубных эффектов, таких как недоедание матери, переедание или ожирение во время беременности, а также пренатальное воздействие химических веществ или гипоксия, на развитие плода и долгосрочные фенотипические эффектыу потомства. Это привело к снижению массы тела при рождении и последующему росту, а также к неблагоприятным последствиям для потомства, включая повышенное кровяное давление, дислипидемию и резистентность к инсулину4. Поскольку уровень избыточного веса и ожирения среди женщин репродуктивного возраста быстро растет, срочно необходимо разработать эффективные меры для предотвращения передачи этих вредных материнских расстройств из поколения в поколение, что оказывает важное влияние на здоровьенаселения5,6.
Физические упражнения уже давно признаны важным профилактическим средством при сахарном диабете 2 типа, гипертонии и некоторых других заболеваниях7. Физические упражнения во время беременности оказывают благотворное воздействие на мать и оказывают благотворное влияние на потомство, тем самым снижая передачу болезней от матери потомству8. Несколько лет исследований продемонстрировали безопасность и глубокие преимущества физических упражнений, включая значительное снижение распространенных заболеваний беременности, таких как гестационный сахарный диабет 9,10. Что касается безопасности матери и плода, проведение тренировок по физическим упражнениям и протоколов после кормления грудью является сложной задачей.
David11et al. Описаны модели упражнений на животных, применимые к исследованиям сердечно-сосудистого здоровья. Три широко используемые модели упражнений — добровольный бег на колесах, беговые дорожки с электроприводом и плавание — имеют свои преимущества и недостатки. Произвольный бег колеса точно имитирует локомоторное поведение крыс, позволяя им двигаться в соответствии со своим циркадным ритмом. Тем не менее, этот вид упражнений требует более точного регулирования интенсивности и продолжительности. Моторизованная беговая дорожка может контролировать интенсивность, объем и продолжительность упражнений, но иногда ей требуется электрическая стимуляция, которая может вызвать физическое и психологическое напряжение у животных. Плавание широко используется в исследованиях на грызунах из-за присущей крысам способности плавать, что также позволяет избежать электрической стимуляции или механического повреждения ног ихвостов. В исследованиях на моделях пренатальных упражнений13,14 плавание является широко используемым методом упражнений. По мере прогрессирования беременности и увеличения живота крысы упражнения на беговой дорожке и колесе могут вызвать повторный контакт живота с твердыми поверхностями. Напротив, водная среда при плавании обеспечивает плавучесть, снижая риск травм, связанных с физическими упражнениями, у беременных животных.
В этом протоколе представлены методы разведения крыс, как проводить тренировки по плаванию во время беременности, а также протоколы кормления беременных крыс после вязки. Эта модель обучения плаванию беременных может быть применена к широкому кругу видов крыс и мышей, что, таким образом, может предоставить полезную модель грызунов для будущих исследований с использованием животных моделей для изучения механизмов, регулирующих благотворное влияние материнских упражнений на здоровье потомства и преимущества физических упражнений из поколения в поколение.
Это исследование направлено на создание осуществимой программы упражнений для беременных крыс, включая подробные методы спаривания крыс, протоколы обучения плаванию и методы исследования для оценки физиологических показателей у плода. Мы разработали пренатальную …
The authors have nothing to disclose.
Работа выполнена при поддержке Национального фонда естественных наук Китая (32071174, 32200941, 32371183 и 31771312).
Caliper | Mitutoyo Measuring Instruments (Shanghai) Co., Ltd | 530-101 N15 | Fetus dissect |
Circular water bucket | Naliya | N/A | Rat swimming |
Experimental Surgical Instrument | Shenzhen RWD Life Technology Co., LTD | SP0001-G | Fetus dissect |
Glass Microscope Slides | Jiangsu Shitai experimental equipment Co., LTD | 80312-3161 | Vaginal smear |
Glass petri dish | Merck Life Technologies | BR455751-10EA | Offspring rearing |
Hairdryer | Panasonic | EH-WNE5H | Post-swimming care |
Information Card | Zhongke Life Science | SS3 | Rat mating |
Isoflurane | Shenzhen RWD Life Technology Co., LTD | R510-22-10 | Fetus dissect |
Light microscope | Olympus | IX71-F22PH | Vaginal smear |
Mating cage | Zhongke Life Science | SS3 | Rat mating |
Medical Absorbent Cotton | Hongxiang Sanitary Materials Co., LTD | N/A | The pregnant rats are anticipating giving birth |
Rodent Anesthesia Machine, Gas Anesthesia | Shenzhen RWD Life Technology Co., LTD | R500IE | Fetus dissect |
Rodent breeding feed | Beijing Huafukang Biotechnology Co., LTD | 1032 | Pregnant rat feeding |
Rodent maintenance feed | Beijing Huafukang Biotechnology Co., LTD | 1022 | Offspring rearing |
Rodent sunflower seeds | Jolly | JP241 | Nutritional supplement |
Soundproof cotton | Kufu Medical Instrument | N/A | The pregnant rats are anticipating giving birth |
Sterile Cotton Swab (2 mm diameter) | Kufu Medical Instrument | N/A | Vaginal smear |
Sterile gauze | Kufu Medical Instrument | N/A | Fetus dissect |
Stroke-physiological Saline Solution (0.9% NaCl) | Shandong Hualu Pharmaceutical Co., LTD | N/A | Vaginal smear |
Thermometer | Beekman organism | N/A | The monitoring of rat swimming |
Towels | Grace | N/A | Post-swimming care |
Transparent plastic container | Naliya | N/A | Swimming adaptive training |
Ultraviolet light | Merck Life Technologies | Z169633-1EA | Post-swimming care |
Water heater | Haier | EC6001-Q6S | Rat swimming |
Weight Scale | Electronlc Acale | JM.A10001 | Body weight measurement |
Wistar Rats | Vital river Laboratory Animal Technology Co., LTD | N/A | Experiment |