Modelo de Asfixia Perinatal de Leitões para Estudo da Lesão Cardíaca e Hemodinâmica após Parada Cardíaca, Ressuscitação e Retorno à Circulação Espontânea
Summary
Esse modelo de leitão envolve instrumentação cirúrgica, asfixia até a parada cardíaca, ressuscitação e observação pós-ressuscitação. O modelo permite múltiplas amostragens por animal e, por meio da monitorização contínua invasiva da pressão arterial, ECG e débito cardíaco não invasivo, fornece conhecimento sobre hemodinâmica e fisiopatologia cardíaca na asfixia perinatal e na ressuscitação cardiopulmonar neonatal.
Abstract
Leitões neonatais têm sido extensivamente utilizados como modelos translacionais para asfixia perinatal. Em 2007, adaptamos um modelo bem estabelecido de asfixia de leitões, introduzindo parada cardíaca. Isso nos permitiu estudar o impacto da asfixia grave em desfechos importantes, incluindo o tempo de retorno à circulação espontânea (ROSC), bem como o efeito das compressões torácicas de acordo com protocolos alternativos de ressuscitação cardiopulmonar. Devido às semelhanças anatômicas e fisiológicas entre leitões e neonatos humanos, os leitões servem como bons modelos em estudos de ressuscitação cardiopulmonar e monitorização hemodinâmica. De fato, esse modelo de parada cardíaca forneceu evidências para o desenvolvimento de diretrizes por meio de pesquisas sobre protocolos de ressuscitação, fisiopatologia, biomarcadores e novos métodos de monitorização hemodinâmica. Notavelmente, o achado incidental de que uma fração substancial de leitões tem atividade elétrica sem pulso (PEA) durante a parada cardíaca pode aumentar a aplicabilidade do modelo (ou seja, pode ser usado para estudar a fisiopatologia que se estende além do período perinatal). No entanto, a geração do modelo é tecnicamente desafiadora e requer vários conjuntos de habilidades, pessoal dedicado e um equilíbrio fino das medidas, incluindo os protocolos cirúrgicos e o uso de sedativos/analgésicos, para garantir uma taxa razoável de sobrevida. Neste artigo, o protocolo é descrito em detalhes, bem como as experiências com adaptações ao protocolo ao longo dos anos.
Introduction
A asfixia perinatal é causada pelo comprometimento das trocas gasosas (hipoxemia e hipercapnia) antes, durante e/ou após o nascimento. Resulta em redução do fluxo sanguíneo (isquemia) para órgãos vitais e subsequente acidose mista respiratória e metabólica. A asfixia perinatal é uma complicação comum no parto que anualmente causa 580.000 mortes infantis no mundo1. A diminuição desse número é essencial para reduzir as mortes em recém-nascidos e crianças menores de 5 anos, conforme estabelecido no Objetivo de Desenvolvimento Sustentável número 3.2 das Nações Unidas (i.e., mortalidade neonatal <12 por 1.000 nascidos vivos e mortalidade de menores de 5 anos <25 por 1.000 nascidos vivos)2.
Clinicamente, a asfixia apresenta-se como encefalopatia hipóxico-isquêmica (EHI), depressão respiratória e insuficiência circulatória no recém-nascido3 (isto é, sintomas e sinais de hipóxia-isquemia de órgãos vitais)4. Consequentemente, um lactente asfixiado pode precisar de tratamento para encefalopatia, incluindo convulsões e suporte respiratório e circulatório avançado. Globalmente, a cada ano, cerca de 10 milhões de bebês necessitam de alguma forma de intervenção, como estimulação tátil, e 6-7 milhões de bebês necessitam de ventilação assistida aonascer5. Assim, a asfixia perinatal coloca uma enorme pressão sobre o sistema de saúde, com implicações socioeconômicas associadas. Para reduzir a carga global de doenças atribuídas à asfixia perinatal, nossos grupos de pesquisa acreditam que as seguintes áreas de foco devem ser investigadas em estudos científicos: prevenção, incluindo a melhoria da assistência e acompanhamento pré-natal e obstétrico; biomarcadores prognósticos; e reanimação e estabilização otimizadas da sala de parto6.
Leitões recém-nascidos e lactentes humanos em gestação próxima ao termo têm anatomia e fisiopatologia semelhantes7. Embora nenhum modelo animal de asfixia perinatal e parada cardíaca possa criar o aspecto completo de transição perinatal fracassada levando a asfixia e parada cardíaca, os leitões são bons modelos translacionais.
Já na década de 1970, desenvolvemos um modelo de hipóxia em suínos adultos8. Foi aperfeiçoado com sucesso pelos grupos depesquisa9, fornecendo um modelo leitão de asfixia perinatal 10,11,12,13,14,15,16,17,18. Em 2007, os primeiros experimentos com parada cardíaca em leitões foram realizados no Institute for Surgical Research do Oslo University Hospital11,13,15,16. O modelo de parada forneceu evidências para o desenvolvimento de diretrizes10,13,15,16,19,20, bem como vastas oportunidades para estudos fisiológicos e testes de equipamentos/ferramentas diagnósticas14,21, protocolos de ressuscitação (estudos randomizados controlados)13,15,16,22, e biomarcadores sanguíneos e teciduais 10,12,20. Assim, o modelo tem se mostrado versátil, e uma única série experimental tem sido tradicionalmente utilizada para responder a diversas questões de pesquisa. Isso é importante e está de acordo com os três Rs (redução, substituição e refinamento) da pesquisa experimental com animais23 (ou seja, o princípio de reduzir o número de animais sacrificados para fins científicos).
No protocolo a seguir, o modelo leitão de asfixia perinatal é descrito em detalhes, incluindo como induzir, definir e determinar a parada cardíaca. O modelo foi refinado para minimizar a exposição a sedativos e intervenções cirúrgicas e inclui ventilação mecânica, asfixia, ressuscitação, observação pós-ressuscitação e coleta de amostras de sangue, urina e líquido cefalorraquidiano. Nossos grupos também tradicionalmente coletam tecidos de órgãos vitais post-mortem, mas o procedimento de coleta de tecidos não é descrito em detalhes neste protocolo. O modelo simula um insulto hipóxico com acidose mista respiratória e metabólica, que reflete a bioquímica de recém-nascidos humanos asfixiados. Através do monitoramento rigoroso dos leitões com avaliações invasivas de pressão arterial (PA) e frequência cardíaca (FC), oximetria de pulso (PO), eletrocardiograma (ECG), impedância cardiográfica (ICG) e espectroscopia no infravermelho próximo (NIRS), a fisiologia da asfixia perinatal, com foco particular no coração, pode ser estudada em detalhes.
O modelo é tecnicamente desafiador, pois um equilíbrio muito fino nas medicações, intervenções cirúrgicas e o método de indução da parada cardíaca são necessários para garantir uma taxa razoável de sobrevida. A realização dos experimentos requer uma preparação minuciosa e uma equipe dedicada e que funcione bem. A seleção de animais experimentais também parece desempenhar um papel importante na garantia do sucesso dos experimentos. Neste artigo, descrevemos o protocolo em detalhes e nossas experiências com ele.
Protocol
Representative Results
Discussion
Este modelo de leitão é demorado e tecnicamente desafiador, com várias etapas críticas. Um equilíbrio fino entre os medicamentos, as intervenções cirúrgicas e o método para induzir a parada cardíaca é necessário para garantir uma taxa razoável de sobrevida. Como o protocolo é de duração relativamente longa e inclui várias etapas críticas, a condução dos experimentos requer uma preparação completa e uma equipe dedicada e que funcione bem, e os experimentos devem ser conduzidos em instalações que tenham experiência com pesquisa com animais de grande porte. Nossas equipes de pesquisa realizaram experimentos em um a três leitões em paralelo. Recomenda-se ter pelo menos duas pessoas presentes em todos os momentos durante os experimentos e pelo menos três pessoas se os experimentos forem realizados com três leitões ao mesmo tempo.
Partes particularmente críticas e tecnicamente desafiadoras dos experimentos incluem o seguinte: 1) certificar-se de que todos os equipamentos estão funcionando e todas as ferramentas de amostragem de dados estão disponíveis, funcionando e calibradas; 2) ventilação mecânica boa e satisfatória, principalmente antes da asfixia e durante a RCP; 3) intervenção cirúrgica; 4) indução de asfixia; 5) constatação de parada cardíaca; 6) RCP; e 7) a amostragem de espécimes, especialmente em pontos críticos como parada cardíaca e ROSC. As etapas mais críticas do protocolo são a indução da asfixia e a verificação da parada cardíaca. Nos primeiros experimentos, o CO2 foi adicionado ao gás asfixia para mimetizar de perto a acidose mista respiratória e metabólica da asfixia perinatal 10,11,13,14,15,16,20. No entanto, em experimentos posteriores 7,21,22 em que o gás CO2 não estava disponível, a redução da taxa de ventilação mecânica seguida pelo clampeamento do TET após 20-30 min também resultou em acidose respiratória e metabólica mista. Níveis elevados de CO2 na parada cardíaca não são apenas importantes para mimetizar a situação clínica, mas também podem influenciar a RCE. A razão para isso pode ser que a parada cardíaca parece ocorrer em um pH específico, e o pH é dependente tanto do lactato quanto do CO2. Como a hipercapnia é mais facilmente revertida do que a acidose láctica, a acidose predominantemente respiratória versus metabólica pode determinar a rapidez com que os leitões se recuperam da asfixia. Outros modelos leitões de asfixia perinatal ou EHI frequentemente iniciam a reoxigenação/ressuscitação antes da parada cardíaca, tipicamente de acordo com os valores da PAM ou a duração da asfixia (por exemplo, 45 min de asfixia 29, 2h de asfixia 30, PAM de 20 mmHg 31, PAM de 30-35 mmHg 30, PAM70% abaixo do valor basal29,32). A vantagem desse modelo é que, ao induzir a parada cardíaca, é possível estudar a RCP neonatal e os dados da amostra antes, durante e logo após a parada cardíaca. Notavelmente, o achado incidental de que uma fração substancial de leitões tem PEA 7,33 durante a parada cardíaca pode aumentar a aplicabilidade do modelo além do campo da perinatologia 34.
Ao longo dos anos, o modelo foi aperfeiçoado para minimizar a exposição dos leitões a sedativos e intervenção cirúrgica e melhorar a amostragem e o registro dos dados. Protocolos prévios 10,11,13,14,15,16,20 incluíam a indução anestésica com sevoflurano. Isso foi abandonado, pois o protocolo atual envolve o estabelecimento direto do acesso IV através de uma veia auricular e medicações endovenosas. Isso é possível, pois o sofrimento do leitão é evitado simplesmente enfaixando o leitão em uma toalha antes da inserção do cateter intravenoso periférico por um profissional treinado. O midazolam também foi utilizado nos primeiros protocolos experimentais; no entanto, a avaliação subjetiva do pesquisador (R.S.) que realizou a grande maioria das autópsias foi de que o cérebro estava em pior estado durante a autópsia se o midazolam fosse usado como infusão contínua. Portanto, agora usamos apenas fentanil IV para manter a anestesia. O midazolam pode ser usado em doses em bolus se o leitão apresentar sinais de sofrimento e o fentanil e/ou o pentobarbital não mostrarem efeito; no entanto, quase nunca tivemos que administrá-lo.
Em termos de outros refinamentos, em experimentos anteriores, os leitões foram traqueostomizados com um tubo endotraqueal firmemente fixado, colocado através de uma incisão subglótica. Este procedimento proporciona uma via aérea livre de vazamentos, mas causa estresse cirúrgico para o leitão. Por outro lado, devido ao aumento das vias aéreas superiores do leitão, a intubação endotraqueal está associada a vazamento significativo quando se utilizam ETTs sem balonete. Portanto, começamos a usar ETTs com balonete, o que resultou em vazamento zero e taxas de RCE significativamente mais altas, comparáveis aos experimentos com leitões traqueostomizados. Além disso, foram feitos alguns ajustes no que diz respeito à amostragem de dados. Alguns dos experimentos anteriores 7,19,22,33,35,36 envolveram o uso de uma sonda de fluxo colocada ao redor da artéria carótida comum esquerda. Esta sonda de fluxo não tem sido prontamente disponível em nosso instituto em Oslo nos últimos anos. Nosso laboratório em Edmonton ainda utiliza uma sonda de fluxo carotídeo, e seu uso pode fornecer dados hemodinâmicos adicionais valiosos ao modelo. Alguns experimentos anteriores também envolveram o uso de um cateter de pressão-volume colocado no ventrículo esquerdo, avançando-o através de uma das carótidas. A administração de compressões torácicas confundiu os registros de pressão-volume do cateter e, em alguns casos, causou até falha e quebra do cateter. Assim, seu uso foi abandonado no modelo de prisão. Recentemente, monitores não invasivos de CO foram adicionados ao protocolo, e estamos nos concentrando em otimizar os sinais de ECG durante parada cardíaca e RCP, pois eles podem fornecer informações valiosas sobre a morfologia do ECG e PEA. Finalmente, o tempo de observação pós-ROSC foi estendido de 4 h para 9,5 h, porque 4 h é muito curto para ser capaz de detectar alterações histopatológicas, morte celular e alterações em alguns biomarcadores.
Uma das limitações mais importantes desse modelo, e do uso de leitões em geral como modelo translacional, é que, ao contrário da RCP na sala de parto, a transição cardiopulmonar pós-natal já ocorreu nos leitões. É improvável que os leitões tenham shunts cardiovasculares fetais abertos e pressões pulmonares elevadas, como seria o caso de um neonato asfixiado. Embora um estudo de Fugelseth et al.37, que utilizou uma versão anterior desse modelo de asfixia em leitões (não parada cardíaca), tenha mostrado que os shunts vasculares são propensos a reabrir nos leitões durante a asfixia, suas respostas à ventilação e ao suporte hemodinâmico podem diferir. Portanto, as medidas fisiológicas nem sempre podem ser representativas de um neonato humano em transição. Algumas diferenças anatômicas entre leitões e neonatos também estão presentes, como as maiores vias aéreas superiores nos leitões, que causam vazamento de TET (o que significa que é importante usar ETTs com balonete) e temperatura basal mais alta.
Apesar dessas limitações, há uma longa tradição na comunidade global de pesquisa do uso de leitões como modelo translacional para asfixia perinatal. O porco é semelhante ao homem em termos de anatomia, fisiologia, histologia, bioquímica e inflamação38 e, além do menor peso ao nascer a termo (1,5-2,5 kg), o leitão recém-nascido tem tamanho bastante semelhante ao neonato humano. O tamanho e a anatomia permitem instrumentação, monitoramento, imagem e coleta de espécimes biológicos comparáveis ao neonato humano. Esse modelo também permite estudos de ressuscitação, uma vez que as compressões torácicas são relativamente fáceis de serem realizadas da mesma forma que em recém-nascidos humanos, e os porcos têm anatomia e fisiologia cardíaca semelhantes às dos humanos39, incluindo a distribuição do sangue coronariano, o suprimento sanguíneo para o sistema de condução, o aspecto histológico do miocárdio e as respostas bioquímicas e metabólicas à injúria isquêmica40. Outro fator importante é que o leitão recém-nascido tem desenvolvimento cerebral perinatal comparável ao neonato humano41, e a asfixia resulta em resposta bioquímica com hipercapnia e acidose mista respiratória e metabólica, que se assemelha à do neonato asfixiado.
Concluindo, esse modelo de asfixia perinatal é tecnicamente desafiador e demorado. No entanto, fornece informações valiosas sobre as alterações fisiológicas e hemodinâmicas durante a asfixia perinatal, permite estudos de reanimação neonatal e fornece informações valiosas sobre as alterações fisiológicas antes, durante e após a parada cardíaca, que também podem ser de interesse para outras áreas de pesquisa na medicina além da perinatologia.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Gostaríamos de agradecer a todos os bolsistas e pesquisadores que ajudaram a estabelecer, desenvolver e refinar este modelo de leitões de asfixia perinatal e parada cardíaca em nossas instalações. Gostaríamos de agradecer à equipe das instalações de pesquisa animal do Instituto de Pesquisa Cirúrgica e do Instituto de Medicina Comparada da Universidade de Oslo, Noruega, e aos técnicos de pesquisa da Universidade de Alberta, Edmonton, Canadá, por sua colaboração durante os anos. Agradecemos ao Programa de Pesquisa de Estudantes de Medicina da Universidade de Oslo, ao Conselho de Pesquisa da Noruega e à Sociedade Norueguesa de SIDS e Natimorto pelo apoio econômico para esta publicação.
Materials
| Acid-base machine (ABL 800 Flex) | Radiometer Medical ApS, Brønshøj, Denmark | 989-963 | |
| AcqKnowledge 4.0 software for PC | Biopac Systems Inc., Goleta, CA, USA | ACK100W | |
| Adhesive aperture drape | OneMed Group Oy, Helsinki, Finland | 1505-01 | |
| Adrenaline (1 mg/mL) | Takeda AS, Asker, Norway | Vnr 00 58 50 | Dilute 1:10 in normal saline to 0.1 mg/mL |
| Arterial cannula 20 G 1,10 mm x 45 mm | Becton Dickinson Infusion Therapy, Helsingborg, Sweden | 682245 | |
| Arterial forceps | Any | ||
| Asphyxia gas, 8% oxygen in nitrogen | Linde Gas AS (AGA AS), Oslo, Norway | 110093 | |
| Benelyte, 500 mL | Fresenius Kabi, Norge AS, Halden, Norway | 79011 | |
| Biopac ECG and invasive blood pressure modules, Model MP 150 | Biopac Systems Inc., Goleta, CA 93117, USA | ECG100C, MP150WSW | |
| Box of cardboard for sample storage | Syhehuspartner HF, Oslo, Norway | 2000076 | |
| Cannula , 23G x 1 1/4"- Nr.14 | Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain | 300700 | |
| Cannula, 18G x 2" | Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain | 301900 | |
| Cannula, 21G x 1 1/2"- Nr.2 | Beckton Dickinson S.A., Fraga, Spain | 304432 | |
| Centrifuge (Megafuge 1.0R) | Heraeus instruments, Kendro Laboratory Products GmbH, Hanau, Germany | 75003060 | |
| Chlorhexidin colored 5 mg/mL | Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway | 00 73 24 | |
| Combi-Stopper | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4495101 | |
| CRF form | Self-made | ||
| Desmarres eyelid retractor 13 cm x 18 mm | Any | ||
| Digital Thermometer ama-digit ad 15 th | Amarell, Kreuzwertheim, Germany | 9243101 | |
| ECG electrodes, Skintact | Leonhard Lang, Innsbruck, Austria | FS-TC1 /10 | |
| Electric heating mattress | Any | ||
| Extension set | Codan Medizinische Geräte GmbH & Co KG, Lensahn, Germany | 71.4021 | |
| Fentanyl (50 µg/mL) | Hameln, Saksa, Germany | 00 70 16 | |
| Fine wood chips | Any | ||
| Finnpipette F1, 100-1000 µL | VWR, PA, USA | 613-5550 | |
| Fully equipped surgical room | |||
| Gas hose | Any | ||
| Gauze swabs 5 cm x 5 cm | Bastos Viegas,.a., Penafiel, Portugal | ||
| Heparin, heparinnatium 5000 IE/a.e./mL | LEO Pharma AS, Ballerup, Denmark | 46 43 27 | |
| HighClean Nonwoven Swabs, 10 cm x 10 cm | Selefa, OneMed Group Ay, Helsinki, Finland | 223003 | |
| ICON | Osypka Medical GmbH, Berlin, Germany | Portable non-invasive cardiometer | |
| ICON electrodes/ECG electrodes, Ambu WhiteSensor WSP25 | Ambu A/S, Ballerup, Denmark | WsP25-00-S/50 | |
| Infusomat Space medical pump | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 8713050 | |
| Invasive blood pressure monitoring system | Codan pvb Critical Care GmbH, Forstinning, Germany | 74.6604 | |
| Laryngoscope SunMed Greenlinen blade No 2 | KaWe Medical, Asperg, Germany | ||
| Leoni plus mechanical ventilator | Löwenstein Medical SE & Co. KG, Bad Ems, Germany | ||
| Liquid nitrogen 230 L | Linde Gas AS (AGA AS), Oslo, Norway | 102730 | |
| Microcentrifuge tubes, 1.5 ml | Forsyningssenteret, Trondheim, Norway | 72.690.001 | |
| Microcuff endotracheal tube, size 3.5 | Avanos, GA, USA | 35162 | |
| Needle holder | Any | ||
| Neoflon, peripheral venous catheter, 24 G 0.7 mm x 19 mm | Becton Dickinson Infusion Therapy AB, Helsingborg, Sweden | 391350 | |
| Neonatal piglets 12-36 h of age | As young as possible | ||
| NIRS electrodes, FORE-SIGHT Single Non-Adhesive Sensor Kit Small | Cas Medical systems Inc., Branford Connecticut, USA | 01-07-2000 | |
| NIRS machine, FORE-SIGHT Universal, Cerebral Oximeter MC-202, Benchtop regional oximeter FORE-SIGHT | Cas Medical systems Inc., Branford Connecticut, USA | 01-06-2020 | May also use INVOS, Covidien |
| Normal saline, NaCl 9 mg/mL, 500 mL. | Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway | Vare nr. 141387 | Unmixed |
| Normal saline, NaCl 9 mg/mL, 500 mL. | Fresenius Kabi Norge AS, Halden, Norway | 141388 | For IV blood pressure monitoring, add heparin (0.2 ml heparin 5000 IE/a.e./mL in 500 mL of 0.9% NaCl) |
| Nunc Cryogenic Tubes 1.8 mL | VWR, PA, USA | 479-6847 | |
| Original Perfusor Line, I Standard PE | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 8723060 | |
| Oxygen saturation monitor, MasimoSET, Rad 5 | Masimo, Neuchâtel, Switzerland | 9196 | |
| Oxygen saturation monitor, OxiMax N-65 | Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA | N65-PDN1 | |
| Pentobarbital (100 mg/mL) | Norges Apotekerforening, Oslo, Norway | Pnr 811602 | |
| Pipette tips | VWR, PA, USA | 732-2383 | |
| Plastic container with holes | Any | Has to allow for circulation of air | |
| Printer labels B-492, hvit, 25 mm x 9 mm, 3000 labels | VWR, PA, USA | BRDY805911 | For nunc tubes |
| Razor, single use disposable | Any | ||
| Rubber gloves | Any | ||
| Rubber hot water bottles | Any | ||
| Self-inflating silicone pediatric bag 500 ml | Laerdal Medical, Stavanger, Norway | 86005000 | |
| Smallbore T-Port Extension Set | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 471954 | |
| Sterile surgical gloves latex, Sempermed supreme | Semperit Technische Produkte Ges.m.b.H., Vienna, Austria | size 7: 822751701 | Different sizes |
| Stethoscope | Any | ||
| Stopcocks, 3-way, Discofix | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 16494C | |
| Stylet size 3.5 | Any | ||
| SunMed Greenlinen laryngoscope blade No 2 | KaWe Medical, Asperg, Germany | ||
| Surgical blade, size 15 | Swann Morton LTD, Sheffield England | 205 | |
| Surgical forceps | Any | ||
| Surgical scissors | Any | ||
| Surgical sponges, sterile | Mölnlycke Health Care, Göteborg, Sweden | C0130-3025 | |
| Surgical swabs | Mölnlycke Health Care, Göteborg, Sweden | 159860-00 | |
| Surgical tape Micropore 2.5 cm x 9.1 m | 3M Norge AS, Lillestrøm, Norway | 153.5 | |
| Suture, Monsoft Monofilament Nylon 3-0 | Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA | SN653 | |
| Suture, Polysorb Braided Absorbable | Covidien LP (formerly Nellcor Puritan Bennett Inc.), Boulder, CO, USA | GL884 | |
| Syringe 0.01-1 mL Omnifix F Luer Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 9161406V | Used for acid base blood sampling. Flush with heparin |
| Syringe 10 mL Omnifix Luer Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4616103V | |
| Syringe 2.5 mL BD Plastipak | Beckton Dickinson S.A., Madrid, Spain | 300185 | Used for blood sampling. Flush with heparinized NaCl |
| Syringe 20 mL Omnifix Luer Loc Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4617207V | |
| Syringe 20 mL Omnifix Luer Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4616200V | |
| Syringe 5 mL Omnifix Luer Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4616057V | |
| Syringe 50 mL Omnifix Luer Lock Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4617509F | |
| Syringe 50 mL Omnifix Luer Solo | B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany | 4616502F | |
| Table drape sheet, asap drytop | Asap Norway AS, Skien, Norway | 83010705 | |
| Tape Tensoplast 2.5 cm x 4.5 m | BSN Medical, Essity Medical Solutions, Charlotte, NC, USA | 66005305, 72067-00 | |
| Timer | Any | ||
| Towels | Any | ||
| Transparent IV-fixation | Mediplast AB, Malmö, Sweden | 60902106 | |
| Ultrasound gel | Optimu Medical Solutions Ltd. Leeds, UK | 1157 | |
| Ultrasound machine, LOGIQ e | GE Healthcare, GE Medical Systems, WI, USA | 5417728-100 | |
| Utility drape, sterile | OneMed Group Oy, Helsinki, Finland | 1415-01 | |
| Vacuette K3E K3EEDTA 2mL | Greiner Bio-One GmbH, Kremsmünster, Austria | 454222 | |
| Venflon Pro Safety 22 G 0.9 mm x 25 mm | Becton Dickinson Infusion Therapy, Helsingborg, Sweden | 393222 | |
| Ventilation mask made to fit tightly around a piglet snout | Any | Typically cone shaped | |
| Weight | Any |
References
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