蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）¹在药物研发中起着关键作用。通过化学方法构建具有固定构象的稳定肽是开发^PPIs模拟基序的最重要方法之一2。迄今为止，已经开发了几种靶向PPI的环肽用于临床³。大多数肽被限制在α螺旋构象中，以降低构象熵并改善代谢稳定性、靶标结合亲和力和细胞通透性^4，5。在过去的20年中，Cys⁶，⁷，赖氨酸⁸，⁹，色氨酸¹⁰，精氨酸¹¹和Met ¹²，¹³的侧链已入到非天然氨基酸中^，以将肽固定成环状构象。这种环肽可以靶向独特的化学空间或特殊位点，从而触发共价反应以形成蛋白质-肽共价结合^14，15，^16，17。在Yu等人最近的一份报告中，氯乙酰胺被锚定在肽配体结构域上，确保具有出色蛋白质特异性的共价偶联反应¹⁸。此外，Walensky等人将丙烯酰胺和芳基磺酰氟（ArSO₂F）等亲电弹头进一步掺入肽中¹⁹，形成稳定的肽共价抑制剂，提高肽抑制剂的抗肿瘤作用。因此，引入额外的官能团以共价修饰蛋白质-肽配体²⁰是非常重要的。这些基团不仅与侧链上的蛋白质反应，而且还稳定肽²¹的二级结构。然而，由于复杂的合成路线和化学基团²²，²³的非特异性结合^，由肽配体诱导的共价修饰蛋白的应用受到限制。因此，迫切需要合成环肽的有效策略。

受环肽²，²⁴，²⁵，²⁶的多种策略的启发^，该协议试图开发一种简单有效的稳定肽的方法。此外，我们注意到稳定肽的侧链基团在空间上接近肽配体时可以与目标蛋白共价反应。2013年，戴明小组通过开发一种生产选择性修饰肽蛋氨酸²⁷的新方法，填补了化学修饰Met的缺乏。基于这一背景，Shi等人重点研究了侧链闭环形成锍盐中心的发展。当肽配体与靶蛋白结合时，锍盐基团与空间接近的Cys蛋白共价反应。近年来，Shi等人设计了一种稳定环肽²⁸的新方法。环肽上的锍盐被具有巯基的还原剂还原，该还原剂可逆地还原为Met。然而，该反应效率低，对后续的生物学应用研究有害。在目前的研究中，设计了Met-Cys和丙炔基溴-Cys闭环反应，在环肽的侧链上保留单个锍盐。锍盐充当了一种新的弹头，在空间接近下与蛋白质Cys共价反应。简而言之，Cys和Met突变的肽通过分子内烷基化环化，导致系绳上锍中心的产生。在这个过程中，侧链桥的形成对环肽至关重要。总体而言，该协议描述了使用简单的反应条件和操作实现的详细基于锍的肽环化。目的是为进一步广泛的生物学应用开发一种潜在的方法。