تقدم هذه الورقة طريقة الفقس دون استخدام قشر البيض للدراسات السمية لملوثات الجسيمات مثل البلاستيك الدقيق.
البلاستيك الدقيق هو نوع من الملوثات العالمية الناشئة التي تشكل تهديدا صحيا كبيرا للحيوانات بسبب امتصاصها ونقلها في الأنسجة الحيوانية والأعضاء. الآثار الإيكولوجية للبلاستيك الدقيق على تطور أجنة الطيور غير معروفة. بيضة الطيور هي نظام تطوير وتغذية كامل ، ويحدث تطور الجنين بأكمله في قشر البيض. لذلك ، فإن السجل المباشر لتطور جنين الطيور تحت ضغط الملوثات مثل البلاستيك الدقيق محدود للغاية بسبب قشر البيض المبهم في الفقس التقليدي. في هذه الدراسة، تم رصد آثار البلاستيك الدقيق على نمو جنين السمان بصريا عن طريق الفقس دون قشر البيض. وتشمل الخطوات الرئيسية تنظيف وتطهير البويضات المخصبة، والحضانة قبل التعرض، والحضانة القصيرة الأجل بعد التعرض، واستخراج العينة. تظهر النتائج أنه بالمقارنة مع مجموعة التحكم ، أظهر الوزن الرطب وطول الجسم للمجموعة المعرضة للبلاستيك الدقيق فرقا إحصائيا وزادت نسبة الكبد للمجموعة المعرضة بالكامل بشكل كبير. بالإضافة إلى ذلك، قمنا بتقييم العوامل الخارجية التي تؤثر على الحضانة: درجة الحرارة والرطوبة وزاوية دوران البيض وغيرها من الحالات. وتوفر هذه الطريقة التجريبية معلومات قيمة عن التكسينات الإيكولوجية للبلاستيك الدقيق وطريقة جديدة لدراسة الآثار الضارة للملوثات على نمو الأجنة.
بلغ إنتاج النفايات البلاستيكية حوالي 6300 طن متري في عام 2015، تم إعادة تدوير عشرها، وتم حرق البقية أو دفنها تحت الأرض. وتشير التقديرات إلى أن حوالي 12000 طن من النفايات البلاستيكية سيتم دفنها تحت الأرض بحلول عام 20501. مع اهتمام المجتمع الدولي للنفايات البلاستيكية، اقترح طومسون لأول مرة مفهوم البلاستيك الدقيق في عام 20042. تشير البلاستيك الدقيق (أعضاء البرلمان) إلى البلاستيك الجسيمات الصغيرة التي يقل قطرها عن 5 ملم. في الوقت الحاضر، اكتشف الباحثون وجود أعضاء البرلمان في كل مكان في الساحل من مختلف القارات، وجزر المحيط الأطلسي، والبحيرات الداخلية، والقطب الشمالي، وموائل أعماق البحار3و4و5و6و7. ولذلك، بدأ المزيد من الباحثين في دراسة المخاطر البيئية لأعضاء البرلمان.
يمكن للكائنات الحية استيعاب أعضاء البرلمان في البيئة. تم العثور على أعضاء البرلمان في الجهاز الهضمي من 233 الكائنات البحرية في جميع أنحاء العالم (بما في ذلك 100٪ أنواع السلاحف، 36٪ أنواع الفقمة، 59٪ أنواع الحيتان، 59٪ أنواع الطيور البحرية، 92 نوعا من الأسماك البحرية، و 6 أنواع من اللافقاريات)8. وعلاوة على ذلك، قد يمنع أعضاء البرلمان الجهاز الهضمي للكائنات الحية، وتتراكم، وتهاجر في البوب9بهم . وقد تبين أنه يمكن نقل أعضاء البرلمان عبر السلسلة الغذائية، ويختلف مداها مع التغيرات في الموائل، ومرحلة النمو، وعادات التغذية، ومصادر الغذاء10. وأفاد بعض الباحثين بوجود أعضاء البرلمان في فضلات الطيور البحرية11، مما يعني أن الطيور البحرية تعمل كناقل لأعضاء البرلمان. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يؤثر ابتلاع أعضاء البرلمان على صحة بعض الكائنات الحية. على سبيل المثال ، يمكن أن يكون أعضاء البرلمان متشابكين في الجهاز الهضمي ، وبالتالي زيادة وفيات الحيتانيات12.
فلنواب وحدهم لهم آثار سامة على الكائنات الحية، فضلا عن الآثار السامة المشتركة على الكائنات الحية ذات الملوثات الأخرى. ابتلاع تركيزات ذات الصلة بالبيئة من الحطام البلاستيك قد يزعج وظيفة نظام الغدد الصماء من الأسماك البالغة13. حجم البلاستيك الدقيق هو واحد من العوامل الهامة التي تؤثر على امتصاصها وتراكمها من قبل الكائنات الحية14،15. البلاستيك صغير الحجم ، وخاصة البلاستيك نانو الحجم ، عرضة للتفاعل مع الخلايا والكائنات الحية ذات السمية العالية16،17،18،19. وعلى الرغم من أن الآثار الضارة للبلاستيك الدقيق بحجم الجسيمات النانوية على الكائنات الحية تتجاوز مستوى البحوث الحالي، فإن الكشف عن البلاستيك الدقيق وتحديد حجمه بأحجام تقل عن عدة ميكرومترات، ولا سيما البلاستيك دون الميكرون/نانو في البيئة، لا يزال يشكل تحديا كبيرا. بالإضافة إلى ذلك ، فإن البلاستيك النانوي له أيضا بعض الآثار على الأجنة. البوليسترين يمكن أن تلحق الضرر تطوير أجنة قنفذ البحر من خلال تنظيم البروتين والجينات ملامح20.
لاستكشاف التأثير المحتمل لأعضاء البرلمان على الكائنات الحية، أجرينا هذه الدراسة. نظرا للتشابه بين أجنة الطيور والأجنة البشرية ، وعادة ما تستخدم في بحوث البيولوجيا التنموية21 بما في ذلك تولد الأوعية وتولد الأوعية ، وهندسة الأنسجة ، وزرع المواد الحيوية ، وأورام الدماغ22،23،24. أجنة الطيور لديها مزايا منخفضة التكلفة، ودورة ثقافة قصيرة وسهلة التشغيل25،26. لذلك، اخترنا أجنة السمان مع دورة نمو قصيرة كحيوان تجريبي في هذه الدراسة. في وقت واحد، يمكننا أن نلاحظ مباشرة التغيرات المورفولوجية لأجنة السمان المعرضة لأعضاء البرلمان خلال مرحلة النمو الجنيني باستخدام تكنولوجيا الفقس الخالية من قشر البيض. وكانت المواد التجريبية المستخدمة هي البولي بروبلين (PP) والبوليسترين (PS). لأن PP و PS27 تمثل أكبر نسبة من أنواع البوليمر التي تم الحصول عليها في الرواسب والمائيات في جميع أنحاء العالم، وأنواع البوليمر الأكثر شيوعا المستخرجة من الكائنات البحرية التي تم التقاطها هي الإيثيلين والبروبيلين28. يصف هذا البروتوكول التجريبي العملية الكاملة للتقييم البصري للآثار السمية لأعضاء البرلمان على أجنة السمان المعرضة لأعضاء البرلمان. يمكننا بسهولة توسيع هذه الطريقة لفحص سمية الملوثات الأخرى لنمو الأجنة من الحيوانات الأخرى oviparous.
تقدم هذه الورقة خطة تجريبية فعالة لتقييم نمو جنين السمان من خلال الكشف عن مؤشرات النمو الأساسية. ومع ذلك، لا تزال هناك بعض القيود على هذه التجربة.
أولا، معدل وفيات أجنة السمان في المرحلة اللاحقة من الفقس أعلى بسبب الفقس أقل قذيفة. هناك عوامل لا يمكن السيطرة عليها بشكل مصطنع …
The authors have nothing to disclose.
تم دعم هذا العمل من خلال مشاريع البحث والتطوير الرئيسية في منطقة شينجيانغ الويغورية ذاتية الحكم (2017B03014، 2017B03014-1، 2017B03014-2، 2017B03014-3).
Multi sample tissue grinder | Shanghai Jingxin Industrial Development Co., Ltd. | Tissuelyser-24 | Grind large-sized plastics into small-sized ones at low temperature |
Electronic balance | OHAUS corporation | PR Series Precision | Used for weighing |
Fertilized quail eggs | Guangzhou Cangmu Agricultural Development Co., Ltd. | Quail eggs for hatching without shell | |
Fluorescent polypropylene particles | Foshan Juliang Optical Material Co., Ltd. | Types of plastics selected for the experiment | |
Incubator | Shandong, Bangda Incubation Equipment Co., Ltd. | 264 pc | Provide a place for embryo growth and development |
Nanometer-scale polystyrene microspheres | Xi’an Ruixi Biological Technology Co., Ltd. | 100 nm, 200 nm, 500 nm | Types of plastics selected for the experiment |
Steel ruler | Deli Group | 20 cm | Used to measure length |
Vertical heating pressure steam sterilizer | Shanghai Shenan Medical Instrument Factory | LDZM-80KCS-II | Sterilize the experimental articles |