Uso da imagem latente de ressonância magnética e dados da biópsia para guiar procedimentos da amostragem para o cancro da próstata Biobanking

O protocolo adere às diretrizes locais e é aprovado pelo Comitê de ética em pesquisa da UCL/UCLC Biobank (referência 15/YH/0311). Nota: Como este método envolve a amostragem do tecido humano, todos os procedimentos locais em relação à ética e consentimento devem ser observados antes do início do protocolo. Os casos prostatectomia radicais podem ser incluídos se os dados de MRI e de biópsia estiverem disponíveis antes da cirurgia, com diâmetro do tumor ≥ 5 milímetros. os casos devem ser excluídos se a lesão do índice não é bem definida, isto é, somente as mudanças difusas são visíveis por MRI. 1. próstata cortando o aparelho Compre o aparelho de corte da próstata (tabela de materiais). Como alternativa, imprima uma alça de lâmina usando uma impressora 3D como anteriormente publicada10.Nota: O dispositivo e as lâminas descartáveis usados aqui foram comprados o acordo de transferência material do Instituto da pesquisa do cancer, Londres, Reino Unido. 2. segmentação por tumor Examine as notas clínicas para identificar a lesão do índice como indicado pela biópsia diagnóstica, por exemplo, posterior esquerdo. Reveja imagens de MRI para medir a posição do tumor acima. Encontre a sequência em que o tumor é mais visível no plano axial, por exemplo, ponderado em T2. Percorra imagens axiais para encontrar a imagem onde o tumor é maior e imprima a imagem para referência. Na imagem coronal correspondente, medir a distância da base da próstata para a posição axial selecionada, e o comprimento total da próstata do ápice para a base (mm), e imprimir para referência. 3. coleção de Ppróstata Verifique as notas do paciente para garantir o consentimento informado adequado foi obtido para este procedimento e quaisquer aplicações de investigação a jusante. Após a prostatectomia radical, colete a próstata em um pote seco. Assegure-se de que nenhum formalina ou outro fixador estêve adicionado à próstata. Transfira para um local estéril adequado para amostragem, por exemplo, uma capa de fluxo laminar em um laboratório de patologia. Proceder à amostragem o mais rapidamente possível se o tecido fresco é necessário.Nota: Para determinadas aplicações (por exemplo, a avaliação do ADN que não deve degradar tão rapidamente quanto o RNA), pode ser apropriado refrigerar o espécime e tomar amostras no dia seguinte. 4. preparação do espécime Prepare a capa do fluxo laminar e o instrumento de fatiamento da próstata de acordo com procedimentos locais da descontaminação, usando a técnica estéril. Aqui, pulverize 70% de etanol e limpe em todas as superfícies. Use agulhas e bipels estéreis de uso único. Use lâminas de fatiador até três vezes; Lave depois de cada uso em água quente e sabão, em seguida, spray e limpe com 70% etanol. Pesar a próstata (g) usando uma escala padrão. Tinta da próstata. Pinte o lado esquerdo com tinta azul e o lado direito com tinta preta. Cubra a cápsula completa e as vesículas seminais com tinta para denotar posteriormente as margens cirúrgicas.Nota: Os procedimentos de tinta podem variar localmente e podem ser modificados de acordo. 5. corte da próstata Montar o aparelho de fatiamento inserindo as paredes perpendicularmente na base do suporte (Figura 1a). Coloc a próstata de modo que a base e o vértice estejam enfrentando paredes opostas, com o lado do posterior para baixo e anterior acima. Coloc os pinos do ouro em torno da próstata. Empurre a próstata para dentro um pouco se necessário para obter um ajuste confortável, que irá apoiar a próstata durante o corte. Meça o comprimento da próstata da base ao vértice, usando uma régua, e compare com o comprimento da próstata como medido por MRI. Se a próstata encolhido, aplique uma correção ad hoc à distância esperada da base à fatia transversal do alvo. Por exemplo, se o comprimento total da próstata na imagem de ressonância magnética for de 50 mm, mas quando medido com uma régua neste ponto tem encolhido para 45 mm, reduza a posição de fatiamento antecipada em 10%. Medir a partir da base para a fatia transversal desejada. Escolha o pino que fica mais próximo a esta medida para cortar ao redor. Vestindo luvas Chainmail para evitar ferimentos, segure o dispositivo de corte (Figura 1B), coloque as lâminas de cada lado do pino identificado e use o espaçador para manter as lâminas de 5 mm de distância. Tome a fatia lentamente e firmemente movendo as lâminas para baixo, para a frente e para trás com cursos longos (Figura 1C). Assegure-se de que uma fatia completa tenha sido separada antes de desmontar o aparelho. Retire as paredes e os pinos e cuidadosamente retire a fatia para uma folha estéril de placa de cortiça usando luvas. 6. amostragem do tecido Inspecione visualmente a fatia transversal e compare com a imagem axial de MRI. Em alguns casos, a área do tumor pode parecer mais pálida do que o tecido circundante. Palpate a fatia transversal delicadamente. Em alguns casos, o tumor pode se sentir mais firme do que o tecido circundante. Usando a imagem axial de ressonância magnética como guia, selecione uma ou mais áreas para amostragem. Tome os socos da biópsia da área desejada do tecido. Usando um perfurador de 6 milímetros, empurre para baixo na área desejada do tecido. Torça o perfurador do tecido no ponto e para baixo de encontro à cortiça para assegurar a separação cheia e para usar um bisturi afiado para separar se necessário. Retire o perfurador e coloque em tubos/moldes, conforme necessário, ejectando usando o êmbolo. Repita para mais tumor e amostras benignas como exigido, com os socos estéreis separados da biópsia. Tinta os buracos onde os socos foram tomados em vermelho. Anote a posição de cada perfurador junto com o peso da próstata e todas as observações na cor/firmeza do tecido. 7. submissão da próstata para diagnósticos locais Fixe a próstata à cortiça com agulhas estéreis do único-uso antes da fixação a fim impedir o encolhimento e o entortamento do tecido, que poderiam alterar a aparência das margens cirúrgicas. Depois de fixar a cortiça, submeter a próstata para o departamento de histopatologia para diagnósticos clínicos padrão. 8. descontaminação de aparelhos Descarte todos os equipamentos descartáveis em fluxos de resíduos biomédicos e/ou recipientes de Sharps como designados localmente. Descontaminar a capota e o aparelho de corte de próstata de acordo com as avaliações de risco locais apropriadas ao tecido humano (por exemplo, pulverizando com 70% EtOH e limpando).