העברה מינית של Trypanosomes האמריקאי של זכרים ונקבות כדי החברים נאיבי
Summary
סוכן Trypanosoma cruzi Chagas המחלה מייצרת לטווח ארוך ללא תסמינים זיהומים בפתאומיות להתפתח פתולוגיה רפואית מוכרת. פרוטוקול המחקר הבאים מתאר הקצר על בסיס משפחתי אפידמיולוגיים מחקר כדי לפענח את הזיהום טי cruzi מחלות מהאב את רומא.
Abstract
Trypanosomiasis האמריקאית מועבר לבני אדם על ידי חרקים triatomine דרך הבליעה של מזון מזוהם, על-ידי עירויי דם או בטעות, בתי חולים, מעבדות מחקר. בנוסף, הזיהום Trypanosoma cruzi מועבר מלידה מאמא chagasic לצאצא שלה, אבל התרומה של השותף זכר לזיהום ברחם אינו ידוע. הממצאים של קנים ובתצורות של amastigotes ושל trypomastigotes בתאים theca של השחלה, את goniablasts, לומן של בקוריאנית וכמה מראים כי זיהומים cruzi ט מועברות מינית. פרוטוקול המחקר במסמך זה מציג את התוצאות של אוכלוסיה משפחה המחקר מציג טפיל DNA גרעיני תאי תאי הדם דיפלואידי, את גמטות הפלואידי של בני אדם. לפיכך, שלוש דגימות ביולוגיות עצמאית שנאספו ששנה מבדילה בנינו אישר כי זיהומים טי cruzi מינית מועברות אל רומא. מעניין, הספציפית נוגדן cruzi ט נעדר הרוב צאצאי המשפחה זה נשא מחוסן סבילות אנטיגן טפיל. עמידות המערכת החיסונית הודגם עוף עקשן ל ט cruzi לאחר השבוע הראשון של צמיחה עוברית, בחורות בקעו מהביצים מצליפים-מחוסן היו מסוגלים לייצר נוגדן ספציפי. יתר על כן, החדרה של זרע אנושי גומר intraperitoneally או לתוך הנרתיק של עכברים תמים הניב cruzi ט amastigotes יותרת האשך, וכמה צנורית, צינור , צינור הרחם עם היעדרות של דלקתיות תגובות באיברים מיוחס המערכת החיסונית של רבייה. הרבייה של cruzi טי-עכברים נגועים זכר ונקבה עם החברים תמימה, גרמו רכישה של דלקות, אשר מאוחר יותר מועברות אל הוא צאצא. לכן, חזקים חינוך, מידע ותקשורת תוכנית המערבת את האוכלוסייה של הארגונים החברתיים נחשבת הדרושים למנוע Chagas המחלה.
Introduction
טפילים protozoan Trypanosoma cruzi השייך למשפחת Trypanosomatidae עובר שלבים במחזור החיים trypomastigote ו- amastigote בתרבית של המארחים, קיים epimastigotes של חרקים-וקטור (Reduviid: Triatominae) הבטן ואת תרבות axenic. במהלך העשורים האחרונים, מספר מחקרים הראו הנוכחות של Chagas המחלה במדינות ב-4 יבשות נחשב triatomine באג חינם1,2,3,4,5, 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13; הפיזור של trypanosomes האמריקאי יוחס בתחילה עולים מאמריקה הלטינית הכדור הצפוני, אך האפשרות כי חלקם מקרים autochthonous של Chagas המחלה ניתן עוד למנוע3,4 , 5 , 6 , 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 , 14. מקור אנדוגני המוכרת היחידה שידור cruzi ט יש כבר המיוחס העברת של האם chagasic הטפיל אופספרינג כ- 10% של הריונות15; התרומה של השותף זכר זיהומים ברחם דרך שופך זרע נותר לא מזוהה.
מעל מאה שנה, אחד החוקרים16,17 נצפתה תאיים cruzi ט amastigotes תאי theca של השחלה, הנבט שורת תאים של האשכים במקרים אקוטיים של Chagas המחלה. הקנים ואת גושים של cruzi ט trypomastigotes, amastigotes תאי theca של השחלה, ב- goniablasts וב -לומן של וכמה בקוריאנית (איור 1) של מקרים Chagas המחלה חריפה קטלני לפתח הרשאות מערכת החיסון באיברים של רבייה בהיעדרו של דלקתיות מחלחל18,19. במהלך העשורים האחרונים, כמה ניסיוני מחקרים הראו קינים של צורות עגולות amastigote של cruzi טי צנורית וכמה, יותרת האשך, וכן הזרע כמו גם הרחם, צינורות, השחלה תאי theca של עכברים נגועים בחריפות 1,20,21,22. יתר על כן, במהלך לימודי משפחה כדי לתעד את העברת protozoan דנ א מיטוכונדריאלי מחולים Chagas הורים לצאצאיהם, DNA גרעיני ט cruzi (nDNA) אומתה נבט הפלואידי האנושי שורת תאים23, ו שלבים במחזור החיים של הטפיל נצפתה שופך chagasic עכברים24. ממצאים אלה הם מסכים עם דיווחים על הסובלנות המערכת החיסונית על-ידי הוא צאצא של cruzi טי –נגוע מארחים בהיעדרו של25,1,26נוגדן ספציפי. בנוסף, דוחות אפידמיולוגיים כי הציע את התפשטות אנדמיים Chagas המחלה ביותר אחרים יבשות3,4,5,6,7,8 ,9,10,11,12,13 נתמכות כעת על-ידי ניסיוני מחקרים המראים כי Chagas המחלה יכול להיות מועבר מינית1 . החקירה הנוכחי מציג פרוטוקול מחקר אפידמיולוגי משפחה, מראה כי זיהום cruzi ט מפיצה על ידי יחסי.
Protocol
Representative Results
Discussion
במסמך זה, נדון פרוטוקול מחקר מבוסס המשפחה ענית לי על השאלה של האם האדם Chagas המחלה נובעת התמקדנו המועברות במגע מיני cruzi ט זיהומים. לימודי יכול לא לספק ראיות שההעברה המינית של זיהומים cruzi ט , כנראה בגלל זמינות הנתונים ואת המידע על Chagas המחלה, התקבלו בנפרד הפרט3,<sup class="…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
אנו להכיר במתקני מעבדה, את תגובות ביקורתיות של Izabela Dourado. קרלה אראוז’ו, גומס חכם וסיוע טכני של ברונו Dalago, רפאל אנדרדה. אנחנו חבים הקרן לקידום המדע (FAPDF), המועצה הלאומית למחקר, משרד המדע, הטכנולוגיה (CNPq/MCT), סוכנות עבור משאבי הדרכה אנוש, משרד החינוך (גלימות / לי), ברזיל, לתמיכה אלה חקירות.
Materials
| BCIP and NBT redox system | Sigma-Aldrich | 681 451 001 | |
| Blood DNA Purification columns | Amersham Biosciences | 27-9603-01 | |
| d-ATP, [α-32P], 250 µCi. | Perkin Elmer | BLU012H | |
| DNA, Solution Salt Fish Sperm | AMRESCO | 064-10G | |
| dNTP Set, 100 mM Solutions | GE Healthcare | 28-4065-51 | |
| Eco RI | Invitrogen | 15202-021 | |
| Goat anti-human IgG- alkaline phosphatase conjugated | Southern Biotech | 2040-04 | |
| Goat anti-human IgG- FITC conjugated | Biocompare | MB5198020 | |
| Hybond – N+ nylon membrane | GE Healthcare | RPN303B | |
| Hybridization oven | Thomas Scientific | 95-0031-02 | |
| Micro imaging software cell Sens software | Olympus, Japan | ||
| Molecular probes labeling System | Invitrogen | 700-0030 | |
| Nsi I | Sigma-Aldrich | R5584 1KU | |
| Plasmid Prep Mini Spin Kit | GE Healthcare | 28-9042-70 | |
| Plate reader | Bio-Tek GmBH | 2015 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-alkaline phosphatase conjugated | Sigma-Aldrich | A9171 | |
| Rabbit anti-chicken IgG-FITC conjugated | Sigma-Aldrich | F8888 | |
| Rabbit anti-mouse IgG- alkaline phosphatase conjugated | Sigma Aldrich | A2418 | |
| Rabbit anti-mouse IgG-FITC conjugated | Biorad | MCA5787 | |
| Spin Columns for radio labeled DNA purification, Sephadex G-25, fine | Sigma-Aldrich | G25DNA-RO | |
| Taq DNA Polymerase Recombinant | Invitrogen | 11615-010 | |
| Thermal cycler system | Biorad, USA | 1709703 | |
| Vector Systems | Promega | A1380 |
References
- Araujo, P. F., et al. Sexual transmission of American trypanosomiasis in humans: a new potential pandemic route for Chagas parasites. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 112 (6), 437-446 (2017).
- Teixeira, A. R. L., Nitz, N., Bernal, F. M., Hetch, M. M. Parasite Induced Genetically Driven Autoimmune Chagas Heart Disease in the Chicken Model. Journal of Visualized Experiments. (65), 3716 (2012).
- Kalil-Filho, R. Globalization of Chagas Disease Burden and New Treatment Perspectives. Journal of the American College of Cardiology. 66 (10), 1190-1192 (2015).
- Nunes, M. C. P., Dones, W., Morillo, A., Encina, J. J., Ribeiro, A. L. Chagas Disease: An Overview of Clinical and Epidemiological Aspects. Journal of the American College of Cardiology. 62 (9), 767-776 (2013).
- Pinazo, M. J., Gascon, J. Chagas disease: from Latin America to the world. Reports in Parasitology. 2015 (4), 7-14 (2015).
- Kessler, D. A., Shi, P. A., Avecilla, S. T., Shaz, B. H. Results of lookback for Chagas disease since the inception of donor screening at New York Blood Center. Transfusion. 53 (5), 1083-1087 (2013).
- Klein, N., Hurwitz, I. R. Globalization of Chagas Disease: A Growing Concern in Nonendemic Countries. Epidemiology Research International. , (2012).
- Pérez-Molina, J. A., Norman, F., López-Vélez, R. Chagas disease in non-endemic countries: epidemiology, clinical presentation and treatment. Current Infectious Diseases Report. 14 (3), 263-274 (2012).
- Hotez, P. J., et al. Chagas disease: "the new HIV/AIDS of the Americas". PLoS Neglected Tropical Diseases. 6, e1498 (2012).
- Schmunis, G. A., Yadon, Z. E. Chagas disease: a Latin American health problem becoming a world health problem. Acta Tropica. 115 (1-2), 14-21 (2010).
- Franco-Paredes, C., Bottazzi, M. E., Hotez, P. J. The Unfinished Public Health Agenda of Chagas Disease in the Era of Globalization. PLoS Neglected Tropical Diseases. 3 (7), e470 (2009).
- Teixeira, A. R. L., Vinaud, M., Castro, A. M. . Emerging Chagas Disease. In: Chagas Disease: – A Global Health Problem. 3, 18-39 (2009).
- Lee, B. Y., Bacon, K. M., Bottazzi, M. E., Hotez, P. J. Global economic burden of Chagas disease: a computational simulation model. Lancet Infectious Diseases. 13 (4), 342-348 (2013).
- Teixeira, A. R. L., Hecht, M. M., Guimaro, M. C., Sousa, A. O., Nitz, N. Pathogenesis of Chagas Disease: Parasite Persistence and Autoimmunity. Clinical Microbiology Review. 24 (3), 592-630 (2011).
- Murcia, L., et al. Risk factors and primary prevention of congenital Chagas disease in a nonendemic country. Clinical Infectious Diseases. 56 (4), 496-502 (2013).
- Chagas, C. New human trypanosomiasis. Morphology and lifecycle of Schizotrypanum cruzi, the cause of a new human disease. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 1, 159 (1909).
- Vianna, G. Contribution to the study of the Pathology of Chagas disease. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 3, 276 (1911).
- Teixeira, A. R. L., Roters, F., Mott, K. E. Acute Chagas disease. Gazeta Médica da Bahia. 3, 176-186 (1970).
- Teixeira, A. R. L., et al. Prevention and Control of Chagas Disease – An Overview. International STD Research, Reviews. 7 (2), 1-15 (2018).
- Rios, A., et al. Can sexual transmission support the enzootic cycle of Trypanosoma cruzi?. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 113 (1), 3-8 (2018).
- Lenzi, H. L., et al. Trypanosoma cruzi: compromise of reproductive system in acute murine infection. Acta Tropica. 71 (2), 117-129 (1998).
- Carvalho, L. O. P., et al. Trypanosoma cruzi and myoid cells from seminiferous tubules: Interaction and relation with fibrous components of extra cellular matrix in experimental Chagas’ disease. International Journal of Experimental Pathology. 90 (1), 52-57 (2009).
- Hecht, M. M., et al. Inheritance of DNA transferred from American trypanosomes to human hosts. PLoS One. 12, e9181 (2010).
- Alarcon, M., et al. Presencia de epimastigotes de Trypanosoma cruzi en el plasma seminal de ratones con infección aguda. Boletín Malariología y Salud Ambiental. 51, 237 (2011).
- Teixeira, A. R. L., et al. Trypanosoma cruzi in the Chicken Model: Chagas-Like Heart Disease in the Absence of Parasitism. PLoS Neglected Tropical Diseases. 5 (3), e1000 (2011).
- Guimaro, M. C., et al. Inhibition of Autoimmune Chagas-Like Heart Disease by Bone Marrow Transplantation. PLoS Neglected Tropical Diseases. 8 (12), e3384 (2014).
- Oliveira, C. I., et al. Leishmania braziliensis isolates differing at the genome level display distinctive features in BALB/c mice. Microbes and Infection. 6 (11), 977-984 (2004).
- Mendes, D. G., et al. Exposure to mixed asymptomatic infections with Trypanosoma cruzi, Leishmania braziliensis and Leishmania chagasi in the human population of the greater Amazon. Tropical Medicine, International Health. 12, 629 (2007).
- Moser, D. R., Kirchhoff, L. V., Donelson, J. E. Detection of Trypanosoma cruzi by DNA amplification using the polymerase chain reaction. Journal of Clinical Microbiology. 27 (7), 1477-1482 (1989).
- Da Silva, A. R. . Sexual transmission of Trypanosoma cruzi in mus musculus [MsD thesis]. , (2013).
- Ribeiro, M., et al. Can sexual transmission support the enzootic cycle of Trypanosoma cruzi?. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz. 113 (1), 3-8 (2018).
- Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B. Actively acquired tolerance of foreign cells. Nature. 172 (4379), 603-606 (1953).
- Burnet, F., Fenner, F. . The production of Antibodies. , (1949).
- Hasek, M. Parabiosis of birds during their embryonic development. Chekhoslovatskaia Biology. 2 (1), 29-31 (1953).
- Coura, J. R., Junqueira, A. C. V., Fernades, O., Valente, S. A., Miles, M. A. Emerging Chagas Disease in Amazonian Brazil. Trends Parasitology. Trends Parasitology. 18 (4), 171-176 (2002).
- Teixeira, A. R. L., et al. Emerging Chagas disease: Trophic network and cycle of transmission of Trypanosoma cruzi from palm trees in the Amazon. Emerging Infectious Diseases. 7 (1), 100112 (2001).
- Hazebroek, M., Dennert, R., Heymans, S. Idiopathic dilated cardiomyopathy: possible triggers and treatment strategies. Netherland Heart Journal. 20 (7-8), 332-335 (2012).
- Arimura, T., Hayashi, T., Kimura, A. Molecular etiology of idiopathic cardiomyopathy. Acta Myologica. 26 (3), 153-158 (2007).
- Dec, W. G., Fuster, V. Idiopathic Dilated Cardiomyopathy. New England Journal of Medicine. 33, 1564-1575 (1994).
- Niederkorn, J. Y. See no evil, hear no evil, do no evil: the lessons of immune privilege. Nature Immunology. 7 (4), 354-359 (2006).
- Smith, B. E., Braun, R. E. Germ cell migration across Sertoli cell tight junctions. Science. 338 (6118), 798-802 (2012).
- Garth, A., Wilbanks, J., Streilein, W. Fluids from immune privileged sites endow macrophages with the capacity to induce antigen-specific immune deviation via a mechanism involving transforming growth factor-β. European Journal of Immunology. 22 (4), 1031-1036 (1992).
- Meng, J., Anne, R., Greenlee, C., Taub, J., Braun, R. E. Sertoli Cell-Specific Deletion of the Androgen Receptor Compromises Testicular Immune Privilege in Mice. Biology of Reproduction. 85 (2), 254-260 (2011).
- Fujisaki, J., et al. In vivo imaging of Treg cells providing immune privilege to the haematopoietic stem-cell niche. Nature. 474 (7350), 216-219 (2011).
- Wood, K. J., Sakaguchi, S. Regulatory T cells in transplantation tolerance. Nature Review Immunology. 3 (3), 199-210 (2003).
