Ils métacognitives répondant à l’aide de base d’odeur analysés Match à l’échantillon Test chez le rat

Toutes les méthodes décrites ici ont été approuvés par l’animalier institutionnel et utilisation Comité (IACUC) du Collège de la Providence. 1. création de l’appareil d’essai Utiliser une chambre d’Interaction sociale (76,2 x 114,3 cm.), qui est divisée en 3 salles séparées. Diviser la salle du centre en un carrossage échantillon et retard à l’aide d’un insert en carton qui peut être soulevé en glissant à travers les pistes métalliques fixés aux murs latéraux. Papier opaque de contact permet de couvrir les murs clairs pour empêcher l’accès visuel à d’autres salles. D’un côté de la salle-sur-le-droit (tests chambre ; voir Figure 1), recouvrir le plancher avec des granules de sable et rouge papier contact. Cela servira visuel et tactile discriminative inspirant pour l’option de baisse. Du côté opposé de la salle d’examen, toute la surface avec des rayures relief en utilisant des bandes de ruban adhésif pour servir un visuel et tactile discriminative inspirant pour le test de choix. Couvrir les rayures avec papier contact noir. Laisser le tiers médian restant de la chambre sans modification. 2. développer préféré alimentaire récompenser la hiérarchie/préférence stable Sélectionnez les récompenses alimentaires possibles pour les tests. Assurer une récompense pour être une récompense plus grande et donc « préféré » sur l’autre. Utiliser un morceau entier de céréale comme récompense plus grande, « privilégié » et un morceau de ¼ de céréales comme récompense plus petit, « les moins privilégié ».Remarque : Céréales peuvent inclure des céréales sucrées ou déshydraté de guimauve. Il est également possible d’utiliser deux récompenses différentes (p. ex. céréales vs standard rongeurs pellet (TestDiet, 45 mg)), mais il était difficile de déterminer une préférence fiable au sein et entre les individus lorsque la qualité plutôt que quantité de classement était le source de variation dans l’ensemble de récompenses. Apporter des rats (adultes mâles Long Evans) dans testing sombre salle 30 min avant le test commence. Utilisez éclairage rouge pour éclairer la chambre d’essai, si les rats sont dans la phase nocturne du cycle de la journée. Si ce n’est pas le cas, comme sur la vidéo de test dans des conditions normales d’éclairage. Placer les deux récompenses, le morceau entier de céréales et de la pièce de ¼ de céréales, dans les coins opposés de la pièce de droite de la chambre (voir Figure 1). Placer le rat sur le côté opposé de la chambre, à l’opposé de la récompense et laisser le rat à manger une des récompenses.Remarque : Pour passer des tests de préférence et pour s’assurer que le plus gros morceau de céréales est la récompense préférée, le sujet doit manger la plus grande récompense sur 4 des 5 essais (5 essais par session) pour 2 sessions consécutives. Exécuter deux séances par jour. Si, après 10 séances, le rat n’a pas démontré une préférence pour le gros morceau de céréales, introduire une récompense différente. Tout au long des essais, pour s’assurer que les préférences des rats’ restent cohérentes, effectuent des vérifications de préférence une fois par semaine. Exécution de préférence vérifie à l’instar de préférence stable, avec le morceau entier et 1/4 de céréales sur les coins opposés de la chambre.Note : 2 essais comprennent un chèque de préférence. Si des rats sélectionnez la récompense moins privilégiée pour les deux essais, tester rat sur un test complet de préférence de 5 essais. Si le rat passe, il peut poursuivre ses essais. Si rat échoue, cesser d’essais et présenter un type différent ou le montant de la récompense. 3. Généralités les méthodes Utilisez des expérimentateurs cohérentes tout au long de tester si les rats sont parfaitement habitués à la manipulation et les odeurs de l’expérimentateur.Remarque : On suppose qu’avant l’essai les rats ont été traités pendant au moins 1 semaine par les hommes, afin qu’ils sont habitués à être ramassé et transportés par les expérimentateurs. Apporter des rats dans leurs cages de boîte à chaussures (Accueil-cage) dans la salle d’examen 30 min avant le test commence à s’habituer à eux à la nouvelle salle. Si les tests sont effectués pendant la phase nocturne de cycle de rats, de garder l’environnement de test sombre, à l’exception des feux rouges pour allumer l’appareil. Veiller à ce que les tasses choix parfumées sont disposés dans l’ordre approprié, tel que déterminé par un script de randomisation qui inclut pour faire contrepoids. Appât la coupe correcte avec le morceau entier de céréales. N’autoriser que le rat à creuser dans une tasse et retirer immédiatement le rat de l’appareil une fois qu’une coupe a été sélectionnée comme indiqué en creusant. Placez le rat en cage d’accueil où le rat peut finir de consommer la récompense. L’inter-procès-intervalle (ITI) est fixé à 4 min. commencer “timing” sur un chronomètre, une fois que le rat est dans la maison-cage. Au cours de l’ITI, nettoyer l’appareil en passant l’aspirateur tout renversé sable et essuyer le plancher avec l’alcool isopropylique à 70 %. Jeter la récompense si elle n’était pas mangé au cours du procès précédent. Aussi, une fois par semaine, nettoyer les tasses en céramique par en supprimant les vieux sable et essuyage des tasses d’alcool isopropylique. Préparer les coupes du sable pour le prochain procès en réorganisant l’ordre basé sur le script de randomisation et amorce la coupe correcte. 4. formation à creuser dans le sable tasses et accoutumance à l’appareil d’essai de Verser environ 1/2 tasse de sable jouer dans des tasses en céramique (6,99 cm. de diamètre et de 8,81 cm de hauteur). Place la coupe remplie de sable avec des récompenses alimentaires en cage maison de tous les rats pendant la nuit.Remarque : Les rats sont requis de creuser dans la coupe avec succès et de manger la récompense du jour au lendemain pour deux nuits consécutives. S’habituer à rat à l’appareillage d’essai en plaçant le sujet dans l’appareil pendant 5 min. Étaler les récompenses alimentaires tout au long de l’appareil visant à encourager l’exploration de l’appareil et voyageant à travers les portes ouvertes. Veiller à ce que des rats pas uriner, déféquer ou geler à l’intérieur de la chambre pour deux jours d’affilée. Transfert inodore tasse remplie de sable avec la récompense de la nourriture à l’appareil d’essai. Veiller à ce que les rats avec succès creusent dans le sable et récupérer la récompense au moins deux jours d’affilée sans comportement de gel, défécation, ou de la miction. Si nécessaire, retirer les tasses en céramique et placer des céréales dans la chambre. 5. match à l’échantillon (MTS) formation Créez 4 différents tas parfumées de sable en mélangeant environ 3 tasses de sable jouer avec ¼ c. à thé d’épices parfumées (cannelle, café, paprika et thym). Pour contrôler des indices de l’odeur, émietter un morceau de récompense dans des tasses de choix incorrect. Remix parfumés sable une fois par semaine et les entreposer dans des conteneurs de verre afin que le parfum force est constante dans les essais de jours. Versez 1/2 tasse de chaque sable parfumé dans 4 tasses et organiser les tasses dans un demi-cercle sur le papier de contact noir (zone de tâches de MTS ; Figure 1 a). S’assurer que toutes les tasses sont équidistants de la porte d’entrée. Organiser les tasses en les plaçant dans la position assignée basée sur la sortie du logiciel de programmation « R » à l’aide de l’échantillonnage sans fonction de remplacement. Hors de vue du sujet, enterrer une pièce intégrale de récompense dans la tasse parfumée correcte. Enterrer ½ pièce de récompense dans une tasse d’échantillon de parfum de manière identique. Enterrer toutes les récompenses au moins une descente ½ de la hauteur du sable. Pseudo-choisir au hasard la coupe correctement parfumée, la seule contrainte est qu’aucun un parfum n’est le parfum de l’échantillon plus de 2 fois de suite. Placer l’objet dans le compartiment de mesure et abaisser la coupe de l’échantillon en utilisant une spatule courbée (poignée-plateau à un angle de 90 degrés). Permettre le sujet à creuser dans la coupe de l’échantillon et récupérer la récompense de céréales ½. Retirez la coupelle dès que le sujet commence à manger la récompense. Une fois que l’objet a fini de manger de la récompense, soulevez le paravent en carton et ouvrir la porte de la chambre d’essai que l’objet entre dans la salle de retard. Permettre à l’objet de « sélectionner » une des coupes en creusant. Dès que le sujet fait un choix et récupère une récompense le cas échéant, retirer le sujet de la chambre et le place dans la cage de transfert. Des rats peuvent renifler chaque tasse, mais ils ne sont autorisés qu’une seule possibilité comme il est indiqué en creusant. Au cours de l’IIT 4 min, nettoyer la chambre avec l’alcool isopropylique à 70 %. N’importe quel sable qui a pu associer à vide et de reconstituer les tasses sable si nécessaire. Obtenir la prochaine coupe de l’échantillon et des appâts de l’échantillon et le test de coupe. Si le sujet sélectionne la coupe incorrecte dans l’essai précédent, retirer et jeter la récompense non consommée. S’assurer que les sujets reçoivent une seule session MTS 6-épreuve par jour. Pour réussir la formation de MTS, sujets doivent choisir la bonne coupe trois des six essais en deux sessions consécutives.Remarque : Cela garantit que les performances sont plus que le hasard, mais en dessous du plafond sur le test 4-choix. 6. retard titrage en Match retardé à échantillon (DSSS) Continuer comme avant les sujets de formation sur les MTS (commençant par le retard de 0 s).Remarque : Performances doit rester entre 40 et 70 % correct, pour s’assurer que les performances sont bien plus que le hasard (25 %), mais en dessous du plafond. Performances dans cette gamme permet aux sujets de l’expérience des instances quand ils quand n’oubliez pas les mêmes et instances quand ils oublient l’échantillon. Cela crée des possibilités d’utilisation de la réponse de baisse-test étant avantageuse au sujet où les essais choisis sont introduites. Si le rendement dépasse 70 % de réponses correctes pour 2 sessions consécutives de 6-trial, augmenter l’intervalle de 0 à 30 s. Dans les essais où le retard n’est pas 0 s, utiliser un chronomètre à chaque temporisation. Après que le sujet a consommé de l’échantillon, soulever la cloison en carton et laisser sujet d’entrer dans la chambre de retardement. Fermer la cloison en carton et de commencer à chronométrer le retard sur le chronomètre. Après 30 s a passé, ouvrir la porte de la salle d’examen et ferma la porte une fois que le sujet est entré dans la chambre d’essai. Porter sur le reste du procès comme avant. Si performance continue à rester au-dessus de 70 % de réponses correctes pour 2 sessions consécutives de 6-trial, augmenter chaque retard subséquent de 1,5 fois le délai précédent. Si cette performance tombe au-dessous de 40 % pour 2 sessions consécutives, le retard est retourné à la précédente, on a utilisé. Si performance reste entre 40 % et 70 % pendant 2 sessions consécutives, définir ce retard comme le disciplinaire retard de critère. 7. diminuer la formation d’utilisation Après chaque session de formation DMTS, placez une autre coupe d’un sable de texture et de couleur différente, en face les tasses sable parfumés. Appât la coupe avec la prime moins appréciée, ¼ de morceau de la céréale, qui sera à la Coupe du déclin. Retirer les coquilles de sable parfumés de la chambre. Mener le procès que pendant l’entraînement de DMTS, permettent ainsi de déguster une tasse parfumée au hasard et d’attendre dans la chambre de retardement pour le retard de sujets particuliers. Laisser le sujet à creuser dans la tasse de sable non parfumée et récupérer la récompense. Puis retirer le sujet de la chambre. Est considérée un procès « baisse forcée ». Effectuer deux essais baisse forcée après chaque session de formation DMTS. 8. test : Forcé vs choix essais Sujets d’essai sur DMTS utilisant le retard de critère. Testez chaque sujet sur une session de 12 essais par jour. Choisir au hasard 8 des essais essais de « choix » et placer la tasse de déclin en face les coupes parfumées. Utiliser le script de randomisation pour déterminer l’ordre de procès-type avec la contrainte que pas plus de 3 essais de choix ou forcées se produisent dans une succession.Remarque : Le reste des 4 procès seront « obligés, » avec la coupe de déclin retirée de la chambre. Selon critère du sujet, il serait possible de tester les 2 ou 3 sujets durant ITI d’un rat. Au cours ITI du 1 sujet, exécutez procès du deuxième sujet. S’assurer pour le nettoyage de la chambre avec de l’alcool isopropylique après chaque essai. Sujets d’essai sur dix séances. Pendant chaque essai, dès que le rat pénètre dans la chambre de retardement ce qu’il soit à gauche pour le test du déclin ou de tourner à droite pour passer le test (voir Figure 1 a; photo de haut en bas). Noter si le rat se déplace d’un côté de la pièce à l’autre (par exemple « décide de faire le test » et puis plus tard traverses du côté de baisse-test de la salle).Remarque : Le rat, donc un choix éventuel metamemory comme il choisit de prendre ou de refuser le test avant de rencontrer les odeurs de quatre choix (voir résultats papier19 pour une analyse approfondie des simultanés vs metamemory éventuels essais). Calculer la précision sur les essais forcés en continu après que deux séances d’essais et de moniteur de recul-test utilisation. Si précision dépasse 70 % de réponses correctes au cours de deux sessions, cesser les essais et retournez pour retarder le titrage avec un délai plus long. Si baisse-test des démarches 0 % ou 100 % de façon constante (plus de 2 sessions), pause essais et envisager d’augmenter ou de diminuer la valeur de la réponse de baisse-test assurant les taux de déclin pour se situer entre 10 % et 40 %. Si précision est inférieure à 40 % de réponses correctes pour 2 sessions, cesser de tests et de remettre pour retarder le titrage avec un délai plus court. Retourner à l’essai au bout de précision sur les essais forcés reste entre 40 % et 70 % de réponses correctes pour deux sessions consécutives. Tout au long de l’essai, pour s’assurer que les préférences des rats’ restent les mêmes, effectuer de préférence vérifie (2 essais par session) une fois par semaine. Contrôles de préférence sont décrites ci-dessus. 9. suggéré généralisation des Tests Généralisation des tests, tels que ceux décrits dans le document de résultats19 peuvent être utilisés pour déterminer si métacognitives répondant des transferts dans l’ensemble des conditions dans laquelle aucune association unique avec des stimuli externes sont susceptible de contrôler la réponse. Test de rats soumis à des essais de sonde non-échantillon, dans lequel aucune phase d’échantillon n’est présentée, mais la phase d’essais RI et test est identique aux essais de normales. Au hasard, mélangez 4 essais de sonde avec 8 essais sur échantillons normaux comme comprenant une session 12-procès. Sujets sur 10 séances. Comparer les taux de déclin sur aucun essai de l’échantillon avec le taux de déclin sur les essais de normales. Test de rats soumis à des essais sur échantillons double, dans lequel les sujets sont présentés avec le parfum original d’échantillon deux fois pour augmenter la force de la mémoire. Au hasard d’intermix sonde essais avec des essais sur des échantillons normaux comme expliqué ci-dessus. Comparer les taux de déclin sur le double des essais sur échantillons avec le taux de déclin sur les essais de normales. Tester les rats avec trois RIs différents : le retard du critère, un retard qui est plus courte (par exemple 0 s) que le retard de critère et l’autre qui est plus long (par exemple 4 min). Pour chaque retard dans un sujets présente session avec les essais de quatre choix et deux forcé essais, tels que les sessions sont composées de 18 essais. Au hasard, mélangez tous les essais et tester des rats sur dix séances. Comparer les taux de déclin des essais sur trois retards, où force de mémoire devrait être diminuée et augmentée, respectivement. 10. analyse des données Après que le test est terminé, calculer la proportion moyenne correcte aux essais de forcé et choisis pour chaque sujet. Pour trouver la proportion correcte Trials forcé, divisez le nombre de bon essais forcés par le nombre total d’essais forcés. Pour trouver la proportion correcte essais choisis, tout d’abord de soustraire les essais est passées le nombre total d’essais de choix. Divisez le nombre d’essais de choix correct par le nombre total d’essais de choix moins épreuves déclinées pour chaque rat. Effectuer un test t sur les données de groupe pour comparer la proportion correcte Trials forcée à la proportion de corrects essais choisis (voir Figure 2). Si la généralisation des tests sont exécutés, effectuer des tests t sur les taux de déclin sur les essais de normal vs sonde essais selon 9. Pour les essais de retard mixtes, comme décrit dans 9.1.3, comparer les tests forcés et choisies avec une ANOVA à mesures répétées avec retard et le procès-type comme facteur intra-sujet. Procéder également à une ANOVA à utilisation de déclin dans les délais afin de déterminer si la précision varie avec RI.