Тестирование для метапознания отвечает с помощью запаха-на основе отложено матч тест в крыс

Все методы, описанные здесь были одобрены институциональный уход животных и использование Комитет (IACUC) Провиденс колледж. 1. Создание тестирования аппарата Используйте камеру социального взаимодействия (76.2 x 114,3 см.), который состоит из 3 отдельных комнат. Делят зале центра на образец и задержки прогиба, с использованием картона вставки, которые могут быть отменены путем сползать через металла треков, прилагается к боковым стенкам. Используйте непрозрачные контактной бумаги для покрытия ясно стены для предотвращения визуальный доступ в другие комнаты. На одной стороне номер на право (тестирование номер; см. Рисунок 1) покрывают пол с песком гранул и красной контактной бумаги. Это будет служить визуальные и тактильные дискриминационных Кий для параметра спад. На противоположной стороне тестирования комнаты покрыть пол с поднятой полосами, с использованием полос клейкой ленты для обслуживания как визуальные и тактильные дискриминационных Кий для выбора теста. Обложка полосы с перчиком контакта. Оставьте остальные средней трети камеры в неизмененном виде. 2. Разработка предпочтение продуктов питания вознаграждение иерархии/предпочтение тестирования Выберите возможные пищевые награды для тестирования. Обеспечить одну награду быть большего вознаграждения и поэтому «предпочтительный» над другим. Используйте целый кусок зерновых как больших, «предпочтительный» награды и ¼ часть зерновых меньше, «менее предпочтительным» награду.Примечание: Зерновые могут включать подслащенные зерновых или обезвоженной зефир. Это также можно использовать две различные награды (например зерновых против стандартной грызунов Пелле (TestDiet, 45 мг)), но это было трудно определить надежный предпочтение рейтинг внутри и между лицами, когда качество а не количество Источник изменчивости различных наград. Привести крысы (взрослый мужчина долго Эванс) в темной тестирование начинается номер 30 мин до начала испытаний. Используйте красный освещения для освещения тестирования камеры, если крысы в темные фазы их день цикла. Если нет, то проверить при условиях нормального освещения, как показано в видео. Место два награды, весь кусок зерновых и ¼ часть зерновых, в противоположных углах правильный номер камеры (см. Рисунок 1). Место крысы на противоположной стороне камеры, стоящие вдали от награды и позволяют крысы съесть одну из наград.Примечание: Пройти тестирование предпочтения и обеспечить, что большая часть зерновых является предпочтительным вознаграждение, предметом должны съесть больше награда на 4 из 5 испытаний (5 испытаний каждой сессии) за 2 последовательных сессий. Запуск двух заседаний в день. Если, после 10 сеансов, крыса не показали предпочтение для большей части зерновых, ввести различные награды. На протяжении тестирования, чтобы обеспечить последовательное крыс предпочтения, проверку предпочтение один раз в неделю. Выполнения предпочтение проверяется так же, как предпочтение, тестирование, с целыми и 1/4 часть зерновых на противоположных углах палаты.Примечание: 2 исследования включают проверку предпочтения. Если крысы выбрать менее предпочтительным награда для обоих испытаний, испытания Крыса на полное предпочтение тест 5 испытаний. Если крыса проходит, она может продолжать тестирование. Если крыса не удается, прекратить испытания и представить другого типа или размера вознаграждения. 3. Общие методы Использование последовательного экспериментаторов на протяжении тестирования, так что крысы полностью привыкли экспериментатор запахи и обработки.Примечание: Предполагается, что до начала испытаний крысы обрабатывались по крайней мере 1 неделю люди, так, что они привыкли к их подобрали и перевозимых экспериментаторов. Принесите крыс в их клетках shoebox (дома Кейдж) в тестирования номер 30 мин до начала испытаний акклиматизироваться их в новую комнату. Если тестирование выполняется в течение темные фазы цикла крыс, держите темные, за исключением красных огней для освещения аппарат среды тестирования. Убедитесь, что ароматические выбор чашки расположены в правильном порядке как определяется рандомизации сценарий, который включает для противовеса. Блесна правильно Кубок с весь кусок зерновых. Разрешить только крыса копать в одной чашке и немедленно удалить крысы из аппарата после Кубка был выбран как указано, копать. Место крыса в доме клетки где крыса может закончить потребление награду. Межамери-суда-интервал (ИТИ) крепится к 4 мин начать сроки на секундомер, когда крыса в доме клетке. Во время ITI чистой аппарат пылесосом любой пролитой песка и вытирая вниз пол с 70% изопропиловый спирт. Отменить награду, если он не был съеден во время предыдущего судебного разбирательства. Кроме того раз в неделю, чистить керамические чашки, отказавшись от старого песка и вытирая чашки с изопропиловым спиртом. Подготовьте песок чашки для следующего судебного разбирательства, переставляя порядка, основанного на сценарий рандомизации и травля правильный Кубок. 4. Подготовка к копать в песок чашки и привыкания к тестирование аппарат Налейте примерно ½ стакана песка играть в керамические чашки (6,99 см. в диаметре и 8.81 см высотой). Место в Кубке песок заполненные с пищи награды в каждой крыса дома клетке на ночь.Примечание: Крысы требуются успешно копать в Кубке и есть награда ночь для двух ночей подряд. Приучать крыса тестирования аппарата, поместив предмет в аппарат за 5 мин. Распространение продовольствия награды на протяжении аппарат для поощрения аппарата разведки и путешествия через открытые двери. Убедитесь, что крысы не мочиться, дефекации или заморозить внутри камеры на два дня подряд. Передать запаха песок заполненные Кубок с продовольствия награду тестирования аппарата. Убедитесь, что крысы успешно копаться в песке и получить вознаграждение по крайней мере два дня подряд без поведение при заморозке, дефекация и мочеиспускание. При необходимости удалите керамические чашки и место зерновых в камере. 5. матч к образец (МТС) обучение Создайте 4 различные ароматические груды песка, смешивая приблизительно 3 стакана песка играть с ¼ чайной ложки душистые пряности (корица, кофе, паприка и тимьян). Для управления для запаха подсказки, раскрошить один кусок награду в неправильный выбор чашки. Ремикс душистые песок один раз в неделю и хранить в стеклянной таре, так что запах сила последовательно через тестирование дней. Налейте полстакана каждый душистые песка 4 чашки и организовать чашки в полукруг на черный контакт бумаге (область задачи МТС; Рисунок 1A). Убедитесь, что все кубки равноудалена от входной двери. Организуйте чашки, помещая их в назначенной позиции, основанной на выходе из программирования «R» с использованием выборки без замены функции. Вне поля зрения субъекта похоронить полный кусок награду в чашке правильный душистые. Похоронить ½ часть вознаграждения в Кубке одинаково душистые образца. Похоронить все награды по крайней мере ½ путь вниз высоту песка. Псевдо-произвольно выбирать правильно душистые Кубок, единственным ограничением является не один аромат запах образца более чем в 2 раза подряд. Место вопросу в палате образец и ниже образец Кубок, с помощью шпателя Бент (ручка лоток под углом 90 градусов). Разрешить копать в чашке образец и получить награду ½ зерновых. Как только тема начинает есть награда, удалите Кубок. По окончании еды награду предметом снять картон перегородка и открыть дверь в испытательной камере, как предмет входит в комнату задержки. Разрешить вопрос «выберите» один из чашки, копать. Как только тема делает выбор и получает вознаграждение, если они присутствуют, удалите тему из камеры и место передачи клетке. Крысы могут понюхать каждый Кубка, но они только разрешены один выбор, как указано, копать. Во время 4-мин ITI очистите камеру с 70% изопропиловый спирт. Вакуумные любой песок, который может пролита и пополнить песок чашки, если это необходимо. Получение следующего образца Кубка и приманки как образец, так и тестирования Кубок. Если предметом выбирает неправильный Кубок предыдущего судебного разбирательства, снимите и выбросьте недоеденные награду. Убедитесь, что предметы получают одну сессию 6-триалу МТС в день. Для того чтобы пройти обучение МТС, предметы должны выбрать правильный Кубок три из шести судебных процессов в двух последовательных сеансах.Примечание: Это гарантирует, что производительность выше шанс, но ниже потолка на 4-Выбор теста. 6. Задержка титрования в задержки матч образца (ОМТС) Продолжить обучение предметам на МТС как раньше (начиная с задержкой 0 s).Примечание: Производительность должна оставаться между 40 и 70% правильно, чтобы убедиться, что производительность намного выше шанс (25%), но ниже потолка. Производительность в этом диапазоне позволяет субъектов испытать случаи, когда они когда же помнить и случаи, когда они забывают образца. Это создает возможность для использования ответа спад теста быть выгодным для субъекта, когда вводятся выбранного испытания. Если производительность превышает 70% правильно за 2 последовательных сессий 6-триалу, увеличить задержку от 0 до 30 s. В судебных процессах, на которых не является задержка 0 s, использовать секундомер на время каждой задержки. После того, как тема поглотил образца, поднять стены картонные делителя и позволяют тема войти в камеру задержки. Закройте картон делителя и начать времени задержки на секундомер. После 30 s прошло, открыть дверь в комнату, тестирования и закрыл дверь после вступления теме испытательной камеры. Носить на остальной части судебного разбирательства как раньше. Если производительность по-прежнему выше 70% правильно за 2 последовательных сессий 6-триалу, увеличьте каждой последующей задержки в 1,5 раза предыдущий задержки. Если производительность падает ниже 40% за 2 последовательных сессий, задержка возвращается к предыдущему одно использовало. Если производительность остается между 40% и 70% для 2 последовательных сессий, значение этой задержки как конкретным критерием задержки. 7. сокращение использования учебных После каждой сессии обучения ОМТС место другой Кубок различных текстурированных и цветного песка, напротив душистые песок чашки. Приманка Кубок с менее предпочтительный вознаграждение, ¼ часть зерновых, которая будет снижение Кубок. Удаление душистые песок чашки из камеры. Осуществляют судебное разбирательство как во время обучения ОМТС, позволяя предмет образец случайно душистые Кубок и ждать в зале задержки задержки конкретным. Разрешить копать в чашке без запаха песка и получить вознаграждение. Затем удалите тему из камеры. Это будет считаться пробу «принудительного спада». Проводить два испытания принудительного спад после каждой сессии ОМТС обучения. 8. Тестирование: Вынужден против выбор испытания Испытуемых на ОМТС, используя критерий задержки. Тестирование каждого предмета на один сессии 12-суд в день. Случайным образом выберите 8 судебных процессов будет «выбор» испытания и место снижение Кубок напротив душистые чашки. Использовать сценарий рандомизации для определения порядка судебного разбирательства тип с ограничением, которое не более чем 3 выбор или принудительного испытания происходят в процессе правопреемства.Примечание: Оставшиеся 4 испытания будут «вынуждены, «снижение Кубок удалены из камеры. В зависимости от субъекта критерий возможно, удастся испытания 2 или 3 в течение одного крыса ITI. В течение 1 предмет ITI Запустите второй предмет разбирательства. Обеспечить, чтобы очистить камеру с изопропиловым спиртом после каждого разбирательства. Испытуемых на десяти сессий. В ходе каждого судебного разбирательства, после того, как крыса вводит задержку палата обеспечивает что он либо повернуть налево отклонить тест или повернуть направо, пройти тест (см. рис. 1а; сверху вниз фотография). Запись, если крыса перемещается из одной стороне комнаты в другой (например «постановляет принять тест» и затем траверсы на спад тест сторону комнаты).Примечание: Крыса, таким образом, делает выбор потенциальных metamemory, как он выбирает, чтобы принять или отклонить тест перед сталкиваются четыре выбор запахов (см. Результаты бумаги19 для обстоятельного обсуждения параллельных против потенциальных metamemory тесты). Вычислите точность на принудительное испытания, непрерывно после двух сессий тестирования и мониторинга спад теста использования. Если точность поднимается выше 70% правильно в течение двух сессий, прекратить испытания и вернуться к задержке титрования с более длительную задержку. Если снижение тест 0% или 100% последовательно использовать подходы (свыше 2 сессии), приостанавливать тестирование и рассмотреть возможность увеличения или уменьшения значение ответа спад теста, обеспечивая снижение ставок от 10% до 40%. Если точность падает ниже 40% правильно 2 сессий, прекратить испытания и вернуться к задержке титрования с короче задержки. Вернуться испытаний после точность на принудительное испытаний остается между 40% и 70% для двух последовательных сессий. На протяжении всего испытания, чтобы крыс предпочтения остаются теми же, выполняют предпочтение проверяет (2 исследования сессия) один раз в неделю. Предпочтение проверки описаны выше. 9. предлагается обобщение тесты Обобщение тесты, такие как тех, которые описаны в документе результаты19 может быть использован для определения, если метапознания отвечает переводов различных условий, в которых нет единой ассоциации с внешними раздражителями, скорее всего управления ответ. Испытания крыс на без-пробоотборник испытания, в которых представлены не образец фазы, но Ри и тестовый этап испытаний идентична обычной испытания. Случайно перемешивают 4 зонд испытания с 8 нормальной образца испытания составляют 12-суда сессии. Испытуемых на 10 сеансов. Сравните цены снижение на не образца испытания с снижение цены на обычных судебных разбирательств. Испытания крыс на двойной образца испытания, в которых предметы представлены с оригинальным ароматом образец дважды, чтобы увеличить прочность памяти. Случайно перемешивают зонд испытания с нормальной образца испытания как описано выше. Сравните темпы истощения на двойной образца испытания с снижение цены на обычных судебных разбирательств. Испытания крыс с тремя различными RIs: критерий задержки, одной задержки, которая короче (например 0 сек) чем критерий задержки и один, который длиннее (например 4 мин). Для каждой задержки в рамках настоящей темы сессии с четырьмя выбор испытания и два вынуждены испытания, таким образом, что сеансы состоят из 18 испытаний. Случайно перемешивают все испытания и испытания крыс на десяти сессий. Сравните снижение темпов судебных разбирательств на три задержки, где сила памяти должны быть снизился и увеличились, соответственно. 10. анализ данных После завершения тестирования, рассчитайте средняя доля правильно для принудительного и выбранного испытания для каждого предмета. Чтобы найти долю правильного принудительного испытаний, разделите количество правильных принудительного испытаний на общее количество принудительного испытаний. Чтобы найти доля правильно выбранного испытания, сначала вычтите испытания, отказался от общего числа испытаний выбор. Разделите число испытаний правильный выбор на общее количество испытаний выбор минус отказался испытания для каждого крыса. Провести t тест на группу данных для сравнения доля правильных принудительного испытаний для доля правильно выбранных испытаний (см. Рисунок 2). Если обобщение тесты, проведите t тесты на снижение цены на обычных судебных процессов против зонд испытания, как описано в 9. Для смешанных задержки судебных разбирательств как описано в 9.1.3, Сравните принудительного и выбранные тесты с неоднократные меры ANOVA с задержкой и суда тип как фактор в рамках темы. Кроме того проводить одностороннюю ANOVA на сокращение использования через задержки для определения, если точность варьируется с ри.