روتين فحص الطريقة المجهرية الدقيقة في عمليات نقل الدم الصفيحات
Summary
إدارة المخزون الصفيحات استناداً إلى فحص محتوى يمثل في مركزات الصفائح الدموية مبادرة جديدة لتحسين جودة في بنوك الدم في المستشفيات. والهدف من ذلك التفريق بين المنشط من غير تنشيط الصفائح الدموية الاستخدام الأمثل للصفائح الدموية. توفير غير تنشيط الصفائح الدموية لمرضى أمراض الدم-السرطان قد تقلل من خطر عالية لتصبح مقاومة للحرارة.
Abstract
إدارة المخزون الصفيحات استناداً إلى فحص محتوى يمثل في مركزات الصفائح الدموية مبادرة جديدة لتحسين نوعية لبنوك الدم في المستشفيات. يفتت الخلايا قبالة المجهرية الدقيقة (MP) عندما شددوا. قد تحتوي على مكونات الدم والأجزاء الخلوية من مجموعة متنوعة من الخلايا، ومن أبرزها تنشيط الصفائح الدموية. عند القيام بأدوارهم كخلايا المناعة الفطرية واللاعبين الرئيسيين في التخثر والارقاء، تغيير الشكل الصفائح الدموية وتوليد المجهرية الدقيقة. مع تشتت الضوء الحيوي (DLS)-على أساس الكشف يمثل، من الممكن للتفريق بين المنشط (يمثل عالية) من الصفائح الدموية غير المنشط (يمثل منخفضة) في عمليات نقل الدم، والاستخدام الأمثل لهذا المنتج الدم النادرة. وتقترح الأبحاث السابقة أن توفير غير تنشيط الصفائح الدموية للاستخدام الوقائي في المرضى الذين يعانون من أمراض الدم-السرطان يمكن الحد من مخاطر أن تصبح مقاومة للحرارة وتحسين رعاية المرضى. والهدف من هذا الأسلوب الفرز هو المنشط للتفريق بشكل روتيني من غير تنشيط الصفائح الدموية. الأسلوب الموصوفة هنا تحدد الخطوات التي يتعين القيام بها لإدارة المخزون الصفائح الدموية الروتينية في مستشفى بنك دم: الحصول على عينة من عملية نقل الصفائح الدموية، تحميل العينة في شعري لقياس دائرة الأراضي والمساحة، ويؤدون DLS اختبار إلى تحديد المجهرية الدقيقة، واستخدام المحتوى يمثل المبلغ عنها للتعرف على تنشيط الصفائح الدموية.
Introduction
وقد تمحورت اهتمام المجهرية الدقيقة معظمهم حول مشاركتها في عمليات الاتصال والبيولوجية للخلية الخلية. 1 , 2 , 3 في الآونة الأخيرة، المجهرية الدقيقة كما اجتذبت اهتمام المحتملة علامات التشخيص المبكر لأمراض المناعة الذاتية والقلب والأوعية الدموية. 4 , 5 المجهرية الدقيقة، حويصلات المعروف أيضا خارج الخلية أو اكسوسوميس، على نطاق واسع حققت التدفق الخلوي. ولسوء الحظ، على الرغم من الجهود الرامية إلى توحيد البروتوكولات التقليدية التدفق الخلوي هناك أي توافق في الآراء بشأن البروتوكول الأمثل لاستخدام. 6 , 7 , 8 , 9 , 10
على الرغم من أن قياس التدفق التقليدي يمكن تميز الفئات السكانية الفرعية MP محددة، أفادت11 فقد عدة قيود. 11 , 12 , 13 , 14 بعض هذه القيود قد عولجت باستخدام أعلى طاقة الليزر، وكاشفات في ما يسمى “الخيار جزيئات صغيرة”،15،16 ، فضلا عن الكشف على درجة 15-25 درجة مئوية إلى الأمام مبعثر زاوية وتعديل الضغط غمد . 17 , 18 على الرغم من ذلك، أسلوب فحص سريعة وسهلة الاستخدام التي يمكن دمجها مع هذه الأساليب المتطورة تزال مطلوبة للاستفادة من المجهرية الدقيقة كعلامات التشخيص المبكر. مستويات مرتفعة من المجهرية الدقيقة قابلة للاكتشاف في حوالي ثلث الدم العادي المانحين19 وقد تشير إلى الشروط السريرية. ونتيجة لذلك، يمثل ارتفاع مستويات في منتجات الدم المتبرع به قد يكون غير متوافق مع المستلمين الضعيفة. 20
عند توفير عمليات نقل الدم الصفيحات، هناك خطر غير المتمتعين بالمناعة ريفراكتورينيس-شرط حيث ترفض نقل الدم على التوالي جسم المريض ولا تسمح بجزء كبير من الصفائح الدموية تعميم. 21 , 22 ريفراكتورينيس عدم المناعة يمكن أن يؤدي نقل الدم الضائع، يبقى المضاعفات الصحية للمرضى، والمستشفى الموسعة. 23 نقل الصفائح الدموية التي تحتوي على إعداد كبيرة من المجهرية الدقيقة يمكن أن يكون عاملاً لتطوير ريفراكتورينيس غير المتمتعين بالمناعة في مرضى الأورام أمراض الدم الضعيفة. 20 فمن الممكن إدارة المخزون الصفائح الدموية وفقا لتكوين نقل الدم الصفيحات بفحص المجهرية الدقيقة مما يحد من الخطر للمرضى الضعفاء. ومع ذلك، معظم يمثل الاختبارات تتطلب عزل المجهرية الدقيقة من الصفائح الدموية5،12 أو خلاف ذلك، هي حزب العمل جداً مكثفة24،25 و ولذلك لا يمكن تنفيذه بشكل روتيني في مستشفى بنوك الدم.
ويستخدم الأسلوب الموصوفة هنا نثر الضوء الحيوي (DLS)-المعروف أيضا فوتون الترابط الطيفي أو تشتت الضوء شبه مرنة. على مدى عقود، تشتت الضوء الحيوي على نطاق واسع استخدمت في صناعة المستحضرات الصيدلانية لتوصيف تركيبات العقاقير الاسمافرون أو مستحلبات فيها أحجام الجسيمات في النطاق الفرعية ميكرون. 26 , 27 إلا أن الأدوات التي وضعت لهذه التطبيقات ليست الأمثل لمنتجات الدم الشاشة. تم وضع نظام جديد لدائرة الأراضي والمساحة للتغلب على القيود التقنية وجعل الضوء الحيوي أدى إلى تناثر مفيدة لفحص الصفائح الدموية نقل الدم. 28
تشتت الضوء الديناميكي القياسات تقوم بإلقاء الضوء الجسيمات المعلقة مع ضوء الليزر وتحليل التباين الوقت من شدة الضوء المتناثرة التي نتيجة للجسيمات تتحرك في تعليق. علاوة على ذلك، يستخدم هذا الأسلوب علاقة عكسية بين سرعة الجسيمات وحجم-جزيئات صغيرة التحرك بسرعة وجزيئات كبيرة تتحرك ببطء-تقديم معلومات عن توزيع حجم وتركيزات النسبية لمكونات العينة. استخدام دائرة الأراضي والمساحة، يمثل متوسط يمكن قياسها كمياً radius المحتوى ويعني يمثل العنصر. يتم إعطاء مضمون المجهرية الدقيقة في المنتج الدم ك % النائب على أساس المنطقة في الرسم البياني المقاسة لإنصاف أقطار الجسيمات من 50-550 نانومتر. بينما الجسيمات مع إنصاف أقطار أقل من 50 نانومتر يتم الكشف عنها بواسطة دائرة الأراضي والمساحة وعنها نظام دائرة الأراضي والمساحة، لا يتم تضمينها في % النائب. بدلاً من عزل المجهرية الدقيقة من الصفائح الدموية، يتحدد إلى التباين في عمليات نقل الدم الصفيحات استناداً إلى المحتوى النسبي المجهرية الدقيقة والصفائح الدموية في عينة. في الواقع، يمكن استخدام نسبة الصفائح الدموية ويمثل القمم لحساب تركيز MP مطلقة عندما يعرف عدد الصفائح الدموية. 19
ويوفر نظام DLS مهنيي الرعاية الصحية مع معلومات كمية ونوعية عن المجهرية الدقيقة الموجودة في العينات المستمدة من الدم البشري أو منتجات الدم. والميزة الرئيسية لوصف تقنية DLS أكثر تقنيات بديلة مثل التدفق الخلوي، والمجهر الإلكتروني، نانوحبيبات29 تتبع تحليل30 أو نبض مقاوم الانضباطي الاستشعار31 هو إعداد نموذج: ويمكن قياس مختبرين لمركزات الصفيحات مباشرة دون الحاجة إلى عزل النائب من الصفائح الدموية، وتمييع عينة أو تعديلات أخرى. 9 , 17 وبالإضافة إلى ذلك، DLS هو أسلوب تحجيم مطلقة ولا تعاني من الافتقار إلى معايرة الخرز مع الانكسار المناسبة. 14 , 32
ارتباط بين تنشيط الصفائح الدموية ومحتوى النائب السابق قد تبين بالفحص المجهري33،20 ويمكن أن يستدل من الزيادة في محتوى النائب في الحالات المرضية15،34، 35 , 36 وتحت في المختبر الظروف المعروفة لتنشيط الصفائح الدموية. 19 , 37 , 38 ولكن كذلك الدراسات مطلوبة لنفهم تماما العلاقة بين التنشيط يمثل DLS قياس المحتوى والصفائح الدموية. استناداً إلى معرفتنا الحالية أن تنشيط الصفائح الدموية تحتوي على أرقام عالية من المجهرية الدقيقة، فأفضل استخدام المعاملة العلاجية لنشاط النزيف39من المرضى، في حين يستفيد المرضى أمراض الدم-السرطان من عدم تفعيلها الصفائح الدموية مع عدم وجود أو مستويات منخفضة من المجهرية الدقيقة20. ذكرت مؤخرا أن في المختبر استجابة المانحين الصفائح الدموية لا تؤثر إلى حد كبير بالانتعاش والبقاء على قيد الحياة من هذه الصفائح الدموية في واحدة من عمليات نقل الدم للمرضى مستقرة، ومعظمها غير نزيف الدم-الأورام40 . من هذا الاستنتاج، فإنه يمكن الاستنتاج أن تنشيط الصفائح الدموية التي حددها المحتوى العالي من النائب أيضا ليس لها دور كبير في العلاج الوقائي للمرضى. ومع ذلك، سبب التحديد الضيق للمرضى، هذه الدراسة لم تتناول تأثير العوامل المانحة لمجمع المرضى الذين هم الحموية (استبعادها من الدراسة) وغير مستقرة وتتلقى العديد من أكثر من مجرد نقل الصفائح الدموية. السؤال كيف يمكن الحد من تعقيد هذه الحالات المريض-التي تبشر بالحد من ريفراكتورينيس–لا تزال دون إجابة.
علامات مبكرة لالتهاب41،42،،من4344 والصفائح الدموية التنشيط45 المجهرية الدقيقة ويتم الكشف عن ذلك في كثير من الجهات المانحة العادي. 19 وبالتالي تنشيط الصفائح الدموية والمجهرية الدقيقة موجودة في التبرعات الصفائح الدموية. ومن المعقول افترض أن المرضى الذين يعانون من الحمى، أي نظام المناعة فطرية تشغيلها بالكامل، لا يمكن أن تتسامح التحدي الإضافي المتمثل في نقل الصفائح المنشط. بيد أن الدراسات مطلوبة لإثبات هذه الفرضية. يمثل الفحص يمكن التخفيف من عدم اليقين الحالية حول مضمون الصفائح الدموية نقل الدم والحد من تعقيد معالجة المرضى.
نسبة الصفائح الدموية المنشط لعدم تفعيلها في بنك دم مستشفى يعتمد أساسا على السكان الجهات المانحة، وإلى درجة أقل بكثير على النقل والتشعيع والممرض المنظمة وغيرها من العمليات التي تؤدي إلى زيادة تنشيط الصفائح الدموية في ويركز. 19 أظهرت البيانات الواردة من بنوك الدم في المستشفيات الرئيسية في الولايات المتحدة أن معدل تكوين المخزون الصفائح الدموية هو 49% المنشط و 51% عدم تفعيلها (مجموعة لتنشيط الصفائح الدموية: 38-62 في المائة، والاتصالات الشخصية). إذا كان الدم المنتج مقدمي خدمات أو بنوك الدم في مستشفى تريد أن تعرف كم عدد الصفائح الدموية غير تنشيط وتفعيل المركزات أنها تنتج أو تلقي، وترغب في إدارة قوائم الجرد استناداً إلى تنشيط الصفائح الدموية كما أشار إلى ذلك يمثل المحتوى، وهذا البروتوكول قد يكون مناسباً لهم.
استناداً إلى تكوين الصفائح الدموية بنك دم في مستشفى سوف تكون قادرة على توجيه استخدام الصفائح الدموية عدم تفعيلها، ومتجانسة لأغراض الوقاية وتفعيلها، الصفائح الدموية غير المتجانسة للاستخدام العلاجي. فحص الصفائح الدموية يسمح المستشفيات إلى أقصى حد ممكن استخدام المخزون المتاح الذي يعمل على تحسين رعاية المرضى ويقلل التكلفة. ويهدف هذا البروتوكول للعاملين في المختبرات الذين على دراية بالتعامل مع الأساسية والتلاعب بالدم ومشتقاته.
قدم هنا هو أسلوب فرز المجهرية الدقيقة في عمليات نقل الصفائح الدموية التي يمكن تطبيقها بشكل روتيني لإدارة مخزون بنك الدم في مستشفى حيث يستحسن تحديد المنتج استناداً إلى محتوى يمثل. والهدف من هذا البروتوكول هو الخطوط العريضة للتنفيذ والتقييم لدائرة الأراضي والمساحة لفحص الصفائح المتبرع بها. ويتناول البروتوكول وصف الأسئلة الشائعة من الوصول غير الغازية للعينات، وإدماج التجارب في بنك الدم تدفق العمل، وخصائص الأداء.
Protocol
Representative Results
Discussion
ويصف هذا البروتوكول طريقة تشتت ضوء ديناميكي ليمثل الفحص الأمثل لتركيزات الجسيمات العالية الموجودة في العينات البيولوجية مثل الصفائح الدموية ويركز. يتم توحيد أسلوب DLS أصلاً لقياس الحجم بدقة. التركيز النسبي المجهرية الدقيقة يمكن تحويلها إلى بتركيز مطلق إذا كان من المعروف أن تركيز الصفائح الدموية ومنطقة الذروة الصفائح الدموية كذروة الإشارة19. كالصفائح الدموية تركيزات يتم عادة الحصول عليها مع تحليل الدم أو تدفق سيتوميتيرس يمكن اعتبار هذه الأساليب التكنولوجيات مصاحب لدائرة الأراضي والمساحة.
وظائف النظام DLS المؤمن عليه عن طريق تشغيل مراقبة الخرز بانتظام. ويمكن قياس الماء المقطر للتحقق من أن الضوضاء الخلفية الحد الأدنى. يمكن تحليل المعايير المتاحة تجارياً الصفائح الدموية كعناصر سلبية النائب، وبعد إضافة 125 نانومتر radius الخرز، كعناصر إيجابية النائب. حدود تركيزات النطاق البيولوجي للنائب من الاهتمام، الإجراءات عملية وسريعة لتنفيذ كجزء من روتين بنك الدم.
بدلاً من التدفق الخلوي، هذا الأسلوب لا يستند مقارنة كثافات تشتت الجسيمات ولكن بدلاً من ذلك سرعة بهم البراونية. وهكذا، اكسوسوميس يمكن أيضا الكشف عن على الرغم من صغر حجمها، وترد بشكل منفصل من النائب.
صممت كأداة لفحص، والقيود المفروضة على هذه الطريقة تتعلق بقدرته على التفريق بين أنواع مختلفة من المجهرية الدقيقة. وهناك مجال محتمل للتحسين إذا استخدمت الخطوات عزل إضافية؛ ويمكن اختبار العينات قبل وبعد إزالة المجهرية الدقيقة من خلال جسم معين إلى جانب التقاط حبة المغناطيسية. وبالإضافة إلى ذلك، أنه لا يمكن افتراض أن كل كشف المجهرية الدقيقة هي الخلية المشتقة لأنه سيبلغ chylomicrons شكلت في الدهون47،48 والصغيرة البكتريا أو الفيروسات6 أيضا في نطاق يمثل. ومع ذلك، توجد ضمانات أخرى داخل إمدادات الدم لتجنب شدة ليبيميك أو الصفائح الدموية الملوثة لإدخال مخزون بنك الدم في مستشفى.
اختيار تخثر الدم في العينة يؤثر في مدى تنشيط الصفائح الدموية ومن ثم النائب المحتوى49. لإجراء مقارنات لمنتجات مختلفة يلزم هذا العامل النظر فيها. وعلاوة على ذلك، تبادل البلازما مع وسائل الإعلام الحرة تعليق النائب مثل نظام تقييم الأداء سوف تؤثر على محتوى النائب والحد الأدنى لتحديد التباين-إلا إذا ترك حوالي ثلث محتوى النائب الأصلي داخل البلازما المتبقية في التركيز تبعاً لذلك سوف تشير إلى الحد الأدنى من المحتوى النائب على نفس المستوى من تنشيط الصفائح الدموية كما هو الحال في بلازما 100%. النائب النسبة المئوية هو مضمون بروتوكول مونتريال بالنسبة للصفائح الدموية. وذكر سابقا أن الصفيحات متوسط لمنتج نظام تقييم الأداء كان أقل حيث أن % متوسط النائب كان لا يزال 9.5%19. تم حاليا تعيين العتبة % MP للصفائح الدموية PAS مرخصة في الولايات المتحدة إلى 10%.
بينما هو المصدر الأساسي للنائب في مركزات الصفيحات الجهة المانحة، العمليات التي تسبب الإجهاد للصفائح الدموية سوف زيادة مستوى النائب تبعاً لقابلية الصفائح الدموية التأكيد-إذا كان الفعل عالية يتم تنشيط الصفائح الدموية، قاصر عوامل الإجهاد مثل تمديد مدة الصلاحية، المنظمة الممرض، الغسيل، التشعيع أو النقل مسافات طويلة يمكن أن يؤدي إلى زيادة كبيرة في محتوى MP. أيا من هذه الضغوطات قد ثبت أن تؤثر تأثيراً كبيرا على الصفائح الدموية متجانسة، وعدم تفعيلها19. وبالإضافة إلى ذلك، الاهتمام ينبغي أن تدفع إلى الإمكانات لإجراء تغييرات في تكوين نموذج داخل شعري إذا لم يكن اختبار مباشرة بعد التحضير (الانتهاء من الخطوة 3 من هذا البروتوكول).
هذا البروتوكول ينصب التركيز على تحديد التكوين للجسيمات الموجودة في الصفائح الدموية نقل الدم واستخدام المجهرية الدقيقة كالمؤشرات الحيوية لتنشيط الصفائح الدموية. نقل الصفيحات تنشيط أو يوصف بأنه أما عدم تفعيلها (برتقالي) (الوردي) استناداً إلى عتبة يمثل نسبة 15 في المائة. عتبة 15% MP للصفائح الدموية في بلازما 100% تجريبية مصممة حسبالمتوسط 66 المئوية من مواقع متعددة .
هدف إدارة المخزون الصفيحات استناداً إلى روتين يمثل الفحص مع دائرة الأراضي والمساحة تحسين المريض كفاءة تكلفة الرعاية ومحرك الأقراص عن طريق منع الصفيحات المناعية غير ريفراكتورينيس. تنفيذ نظام دائرة الأراضي والمساحة لفحص أكياس الصفيحات سوف تمكن المستخدم من توجيه غير تنشيط الصفائح الدموية للمريض من السكان الأكثر عرضه لتطوير ريفراكتورينيس الصفائح الدموية.
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ونشكر المتبرعين بالدم والموظفين في “المركز الكندي لشبكة خدمات الدم” “تطبيق التنمية” لجمع وإنتاج الصفيحات الوحدات المستخدمة في هذه الدراسة. ونعترف “المؤسسة الكندية” للابتكار ومايكل سميث مؤسسة “البحوث الصحية” لتمويل البنية التحتية في “مركز جامعة كولومبيا البريطانية” “أبحاث الدم”. تم توفير التمويل للمنشور بشركة تكنولوجيا لايتينتيجرا، الشركة المصنعة ثرومبولوكس.
Materials
| ThromboLUX-M | LightIntegra Technology Inc. | LPN120 | DLS System |
| ThromboSight Software | LightIntegra Technology Inc. | LPN124 | DLS analysis software |
| Capillaries | LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor Optinova MLE) | LPN065 | Custom extruded non-activating, non-birefringent plastic tube, inspected and irradiated |
| MiniPet | LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor TriContinent Scientific) | LPN082 | 100 µL fixed volume pipette for sampling |
| MicroFlex 1-200 µL Pipette tips | LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor ESBE Scientific) | LPN080 | Pipette tips for sampling |
| Critoseal | LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor Fisher Scientific) | LPN075 | Capillary Tube Sealant |
| Dukal Alcohol Pad or equivalent | LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor Dukal Corp.) | LPN085 | Isopropyl pad (saturated with 70% isopropyl alcohol) |
| Control beads, 50 nm radius | LightIntegra Technology Inc. (included in test kit, vendor PolySciences Inc.) | LPN128 | Control beads |
| Microbead NIST Traceable Particle Size Standard, 3 µm | PolySciences Inc. | 64060 | Standard microbeads: 1.5 µm radius Polystyrene beads; range 1.43-1.58 µm; 1% solids suspensions in de-ionized water |
| Nanobead NIST Traceable Particle Size Standard, 250 nm | PolySciences Inc. | 64014-15 | Standard nanobeads: 125 nm radius Polystyrene beads; range 120 – 130 nm; 1% solids suspensions in de-ionized water |
| Genesis BPS RapidSeal II or equivalent | Genesis BPS | 428-SE640 | Tube sealer |
| Fresenius Kabi Tube Stripper or equivalent | Fresenius Kabi | 6R4452 | Manual tube stripper |
| Biohazard Shield – Cell Counter or equivalent | CardinalHealth | S1389-75 | Splash Shield |
| Corning LSE Vortex Mixer or equivalent | Corning Incorporated | 6775 | Vortex mixer |
| FACSCanto II Flow cytometer with FACSDiva software version 6.1.3 or equivalent | BD Biosciences | 338960 | Flow cytometer |
References
- Dinkla, S., et al. Platelet microparticles inhibit IL-17 production by regulatory T cells through P-selectin. Blood. 127 (16), 1976-1986 (2016).
- Yin, W., Ghebrehiwet, B., Peerschke, E. I. Expression of complement components and inhibitors on platelet microparticles. Platelets. 19 (3), 225-233 (2008).
- Aatonen, M., Gronholm, M., Siljander, P. R. Platelet-derived microvesicles: multitalented participants in intercellular communication. Semin Thromb Hemost. 38 (1), 102-113 (2012).
- Suades, R., Padro, T., Alonso, R., Mata, P., Badimon, L. High levels of TSP1+/CD142+ platelet-derived microparticles characterise young patients with high cardiovascular risk and subclinical atherosclerosis. Thromb Haemost. 114 (6), 1310-1321 (2015).
- Obeid, S., et al. Development of a NanoBioAnalytical platform for “on-chip” qualification and quantification of platelet-derived microparticles. Biosens Bioelectron. 93, 250-259 (2017).
- Witwer, K. W., et al. Standardization of sample collection, isolation and analysis methods in extracellular vesicle research. J Extracell Vesicles. 2, (2013).
- Lacroix, R., Robert, S., Poncelet, P., Dignat-George, F. Overcoming Limitations of Microparticle Measurement by Flow Cytometry. Semin Thromb Hemost. 36 (8), 807-818 (2010).
- Lacroix, R., et al. Standardization of platelet-derived microparticle enumeration by flow cytometry with calibrated beads: results of the International Society on Thrombosis and Haemostasis SSC Collaborative workshop. J Thromb Haemost. 8 (11), 2571-2574 (2010).
- Shah, M. D., Bergeron, A. L., Dong, J. F., Lopez, J. A. Flow cytometric measurement of microparticles: pitfalls and protocol modifications. Platelets. 19 (5), 365-372 (2008).
- Nolan, J. P., Jones, J. C. Detection of platelet vesicles by flow cytometry. Platelets. 28 (3), 256-262 (2017).
- Connor, D. E., Exner, T., Ma, D. D., Joseph, J. E. The majority of circulating platelet-derived microparticles fail to bind annexin V, lack phospholipid-dependent procoagulant activity and demonstrate greater expression of glycoprotein Ib. Thromb Haemost. 103 (5), 1044-1052 (2010).
- Inglis, H., Norris, P., Danesh, A. Techniques for the analysis of extracellular vesicles using flow cytometry. J Vis Exp. (97), (2015).
- Inglis, H. C., et al. Techniques to improve detection and analysis of extracellular vesicles using flow cytometry. Cytometry A. 87 (11), 1052-1063 (2015).
- van der Pol, E., Coumans, F., Varga, Z., Krumrey, M., Nieuwland, R. Innovation in detection of microparticles and exosomes. J Thromb Haemost. 11, 36-45 (2013).
- Boudreau, L. H., et al. Platelets release mitochondria serving as substrate for bactericidal group IIA-secreted phospholipase A2 to promote inflammation. Blood. 124 (14), 2173-2183 (2014).
- Rousseau, M., et al. Detection and quantification of microparticles from different cellular lineages using flow cytometry. Evaluation of the impact of secreted phospholipase A2 on microparticle assessment. PLoS One. 10 (1), 0116812 (2015).
- Groot Kormelink, T., et al. Prerequisites for the analysis and sorting of extracellular vesicle subpopulations by high-resolution flow cytometry. Cytometry A. 89 (2), 135-147 (2016).
- van der Vlist, E. J., Nolte-‘t Hoen, E. N., Stoorvogel, W., Arkesteijn, G. J., Wauben, M. H. Fluorescent labeling of nano-sized vesicles released by cells and subsequent quantitative and qualitative analysis by high-resolution flow cytometry. Nat Protoc. 7 (7), 1311-1326 (2012).
- Maurer-Spurej, E., Larsen, R., Labrie, A., Heaton, A., Chipperfield, K. Microparticle content of platelet concentrates is predicted by donor microparticles and is altered by production methods and stress. Transfus Apher Sci. 55 (1), 35-43 (2016).
- Maurer-Spurej, E., et al. Platelet quality measured with dynamic light scattering correlates with transfusion outcome in hematologic malignancies. Transfusion. 49 (11), 2276-2284 (2009).
- Hess, J. R., et al. Clinical and laboratory correlates of platelet alloimmunization and refractoriness in the PLADO trial. Vox Sang. 111 (3), 281-291 (2016).
- Doughty, H. A., et al. Relative importance of immune and non-immune causes of platelet refractoriness. Vox Sang. 66 (3), 200-205 (1994).
- Vassallo, R. R., Norris, P. J. Can we “terminate” alloimmune platelet transfusion refractoriness. Transfusion. 56 (1), 19-22 (2016).
- Anderson, W., Kozak, D., Coleman, V. A., Jaemting, A. K., Trau, M. A comparative study of submicron particle sizing platforms: Accuracy, precision and resolution analysis of polydisperse particle size distributions. J colloid inter sci. 405, 322-330 (2013).
- Gyoergy, B., et al. Improved Flow Cytometric Assessment Reveals Distinct Microvesicle (Cell-Derived Microparticle) Signatures in Joint Diseases. Plos One. 7 (11), 49726-49726 (2012).
- Urey, C., et al. Combining gas-phase electrophoretic mobility molecular analysis (GEMMA), light scattering, field flow fractionation and cryo electron microscopy in a multidimensional approach to characterize liposomal carrier vesicles. Int J Pharm. 513 (1-2), 309-318 (2016).
- Mohr, K., et al. Evaluation of multifunctional liposomes in human blood serum by light scattering. Langmuir. 30 (49), 14954-14962 (2014).
- Maurer-Spurej, E., Brown, K., Labrie, A., Marziali, A., Glatter, O. Portable dynamic light scattering instrument and method for the measurement of blood platelet suspensions. Physics in Medicine and Biology. 51 (15), 3747-3758 (2006).
- Arraud, N., et al. Extracellular vesicles from blood plasma: determination of their morphology, size, phenotype and concentration. J Thromb Haemost. 12 (5), 614-627 (2014).
- Ambrose, A. R., Alsahli, M. A., Kurmani, S. A., Goodall, A. H. Comparison of the release of microRNAs and extracellular vesicles from platelets in response to different agonists. Platelets. , 1-9 (2017).
- Buzas, E. I., Gardiner, C., Lee, C., Smith, Z. J. Single particle analysis: Methods for detection of platelet extracellular vesicles in suspension (excluding flow cytometry). Platelets. 28 (3), 249-255 (2017).
- Stoner, S. A., et al. High sensitivity flow cytometry of membrane vesicles. Cytometry A. 89 (2), 196-206 (2016).
- Labrie, A., Marshall, A., Bedi, H., Maurer-Spurej, E. Characterization of platelet concentrates using dynamic light scattering. Transfus Med Hemother. 40 (2), 93-100 (2013).
- Ueba, T., et al. Plasma level of platelet-derived microparticles is associated with coronary heart disease risk score in healthy men. J Atheroscler Thromb. 17 (4), 342-349 (2010).
- Badimon, L., Suades, R., Fuentes, E., Palomo, I., Padro, T. Role of Platelet-Derived Microvesicles As Crosstalk Mediators in Atherothrombosis and Future Pharmacology Targets: A Link between Inflammation, Atherosclerosis, and Thrombosis. Front Pharmacol. 7, 293 (2016).
- Berezin, A. E., Kremzer, A. A., Berezina, T. A., Martovitskaya, Y. V. The pattern of circulating microparticles in patients with diabetes mellitus with asymptomatic atherosclerosis. Acta Clin Belg. 71 (1), 38-45 (2016).
- Marcoux, G., et al. Microparticle and mitochondrial release during extended storage of different types of platelet concentrates. Platelets. 28 (3), 272-280 (2017).
- Yanez-Mo, M., et al. Biological properties of extracellular vesicles and their physiological functions. J Extracell Vesicles. 4, 27066 (2015).
- Reddoch, K. M., et al. Hemostatic function of apheresis platelets stored at 4 degrees C and 22 degrees C. Shock. 41, 54-61 (2014).
- Kelly, A. M., et al. The effect of variation in donor platelet function on transfusion outcome: a semirandomized controlled trial. Blood. 130 (2), 214-220 (2017).
- Peerschke, E. I., Yin, W., Ghebrehiwet, B. Platelet mediated complement activation. Adv Exp Med Biol. 632, 81-91 (2008).
- Redman, C. W., Sargent, I. L. Microparticles and immunomodulation in pregnancy and pre-eclampsia. J Reprod Immunol. 76 (1-2), 61-67 (2007).
- Ripoche, J. Blood platelets and inflammation: their relationship with liver and digestive diseases. Clin Res Hepatol Gastroenterol. 35 (5), 353-357 (2011).
- Ling, Z. L., Combes, V., Grau, G. E., King, N. J. Microparticles as immune regulators in infectious disease – an opinion. Front Immunol. 2, 67 (2011).
- Melki, I., Tessandier, N., Zufferey, A., Boilard, E. Platelet microvesicles in health and disease. Platelets. 28 (3), 214-221 (2017).
- Culibrk, B., et al. Application of the ADVIA cerebrospinal fluid assay to count residual red blood cells in blood components. Vox Sang. 103 (3), 186-193 (2012).
- Connolly, K. D., et al. Lipoprotein-apheresis reduces circulating microparticles in individuals with familial hypercholesterolemia. J Lipid Res. 55 (10), 2064-2072 (2014).
- Mork, M., et al. Prospects and limitations of antibody-mediated clearing of lipoproteins from blood plasma prior to nanoparticle tracking analysis of extracellular vesicles. J Extracell Vesicles. 6 (1), 1308779 (2017).
- Raczat, T., et al. The influence of four different anticoagulants on dynamic light scattering of platelets. Vox Sang. 107 (2), 196-199 (2014).
