В естественных условиях Отслеживание человека жировой производные мезенхимальных стволовых клеток в мышиной модели артроз колена с красителем липофильных флуоресцентных мембраны

Коленного остеоартрита (КОА) является результатом потери суставного хряща и прогрессирующим воспалением, который стал основным хронических заболеваний у пожилых людей во всем мире¹дегенеративные расстройства. Однако текущий терапии с использованием противовоспалительных препаратов, физической добавки и хирургических процедур может обеспечить лишь временное облегчение для симптоматического боли².

Жировой производные мезенхимальных стволовых клеток человека (haMSCs) стали многообещающим регенеративной средство для коленного остеоартрита, ввиду их Multipotent с дифференциации, потенциал для регенерации хряща и иммуномодулирующие свойства^{3, 4}. По сравнению с фармакологическими маршрутов для изучения механизмов действий в естественных условиях, отслеживание жить haMSCs в небольших животных моделях KOA поучительно в настоящее время установить обоснование и целесообразности haMSC терапии до клинического применения. Для доклинических испытаний, медиальной meniscectomy (мм) дестабилизирует механической нагрузки совместной побудить KOA в крыс, которая обеспечивает относительно осуществимости модель с последовательной воспроизводимость⁵. Начала KOA индуцированных мм раньше чем передней крестообразной связки перерезка отдельно или в сочетании с частичным медиальный meniscectomy⁶. Таким образом долгосрочного взаимодействия между вводят haMSCs с патологическим микроокружения KOA часто оцениваются в крыс, вызванных мм^7,8.

Хотя Терапевтическая эффективность haMSCs был широко сообщалось, соответствующие знания на сохранение в vivo имплантированных haMSCs через Внутрисуставных инъекций (IA) является дефицитных^9,10. Таким образом были разработаны различные методы клеточной маркировки, включая immunohistology¹¹, Люцифераза¹², Зеленый флуоресцирующий белок¹³ трансфекции, оксид железа, маркировки для магнитно-резонансная томография (МРТ)¹⁴ и многочисленные люминесцентные клеток красители^8,,1516. По сравнению с трудоемкой гистология анализы, в естественных условиях неинвазивной визуализации использует оптические устройства для обнаружения реального времени распределение и динамика клеток, помечены флуоресцентные сигналов^10,17. Для функциональной живой клетки изображений, cytocompatible люминесцентные маркировки — сложные отслеживания радиоактивных бесплатно техника раскрыть клеточной деятельности после трансплантации стволовых клеток¹⁸. Кроме того многоцветный липофильных флуоресцентных красителей обладают преимуществами над амино реактивной гидрофильные красителей или флуоресцентных белков, включая их Улучшенная ячейка проницаемость и расширенной флуоресценции квантовой урожайности¹⁹.

Таким образом, здесь включены протоколы используют красный лазер для возбуждения клеток, помечены липофильных carbocyanines сделал (ДППК₁₈(5)), который является far-red флуоресцентные Дил (диалкилкарбоцианины) аналоговый²⁰. Красный смещается возбуждения и выбросов спектры избегает вмешательства autofluorescent и позволяет глубоко ткани изображений в течение длительного периода времени в живых животных⁸. Этот метод отслеживания-клеток в vivo помечены сделал действителен для мониторинга пересаженные стволовые клетки, такие как haMSCs, в моделях животных, которая необходима для понимания и улучшения текущей восстановительной терапии стволовой клетки.