Screening tests karakteriseren roman Endothelial toezichthouders die betrokken zijn bij de ontstekingsreactie

Ontsteking is een gunstig biologische reactie tegen infectieuze agentia, met het grote doel te elimineren van het pathogene agens en het herstellen van beschadigd weefsel. Onder bepaalde voorwaarden, zoals chronische infecties of auto-immune ziekten, ontsteking niet is opgelost. In plaats daarvan is er een afwijkende reactie met continue infiltratie van leukocyten, resulterend in een langdurige immuunrespons die leidt tot weefselbeschadiging, fibrose, verlies van functie, en de algehele, handicap en in sommige gevallen dood van de patiënt. Deze menselijke aandoeningen, gecatalogiseerd als ontstekingsziekten, alle betrekking hebben op de bloedvaten voor de controle van leukocyten extravasation^1,2.

De endotheliale cellen spelen een fundamentele rol in de regulatie van de ontstekingsreactie door het beheersen van de leukocyten mensenhandel. Wanneer het endotheel laag is blootgesteld aan inflammatoire mediatoren zoals LPS, de rust endotheel activeert en spreekt van pro-inflammatoire cytokines (Cxcl10, Cxcl5, Cxcl1, enz.) en celadhesie-moleculen (E-selectine, VCAM-1 en ICAM-1) die gunst werving van circulerende leukocyten op de site van de infectie. De leukocyten primer door de vrijgegeven cytokines dan bemiddelen rollen en interactie met de endothelial laag door de correspondent zelfklevende tegenhangers: PSGL-1 selectine, α4β1 integrine aan VCAM-1 en αLβ2 integrine aan ICAM-1. Tot slot migreren de leukocyten over de therapieën richting de focus ontsteking³.

De essentiële rol van het endotheel bij het reguleren van de inflammatoire respons is aangetoond op muizen die werden genetisch gewijzigd om uit te drukken de LPS receptor, toll-like receptor 4 (TLR4), alleen op de endotheliale cellen. Deze endotheel-TLR4 dieren konden reageren op een ontsteking LPS-gemedieerde en detecteren de infectie gegenereerd na inoculatie van de bacteriën, en bijgevolg bereiken infectie resolutie en overleven op een vergelijkbaar niveau als de muizen wild type^{4 , 5}.

Voor het endotheel-gereglementeerde ontstekingsreactie traject, heeft het is gepostuleerd dat de remming in bepaalde stadia van de leukocyten-endotheel interactie zou resulteren in de vermindering van de trans-endothelial migratie en een betere prognose voor inflammatoire-gerelateerde ziekten. In feite, zijn verschillende strategieën gericht op de endotheliale activering en leukocyten-endotheel interactie te hinderen extravasation van immune cellen als een behandeling voor inflammatoire aandoeningen^6,7ontworpen.

In dit verslag beschrijven we een grondige groep van in vitro technieken om de endothelial activiteit in reactie op de inflammatoire stimulans LPS en haar rol bij activering van de leukocyten en hechting aan de vasculaire laag volledig te karakteriseren. De endothelial cell model gebruikt in dit manuscript was de muis Long endothelial cellijn (MLEC-04), zoals beschreven door Hortelano et al. ⁸. de MLEC-04 cellijn is gevalideerd in de literatuur als een passend systeem om te studeren endothelial activering^9,10. Op basis van het onderzoeksinteresses, deze benaderingen kunnen worden gemakkelijk geëxtrapoleerd naar ieder endothelial of leukocyten systemen en inflammatoire profiel. Zodra de endothelial parameters in de geselecteerde voorwaarden zijn gedefinieerd, kan het systeem nieuwe medicijnen op de voorgestelde experimenten te evalueren van de vasculaire activering testen. In deze inflammatoire context, de cellen van de endotheel getest met de stof van belang kunnen worden vergeleken met de controlevoorwaarden van de cellen en eventuele resulterende verschillen kunnen in kennis stellen van de drug prognostische resultaat op de ontwikkeling en de vooruitgang van ontsteking. Tot slot stellen wij voor een relevante systeem karakteriseren nieuwe drug targets op de endotheliale cellen, die invloed op het ontwerp van nieuwe vasculaire-specifieke therapieën tegen inflammatoire-gerelateerde ziekten uitoefenen kunnen.