ハチミツの抑止化学物質をスクリーニングするためのビデオトラッキングプロトコル

ヨーロッパのミツバチ、 Apis melliferaL。世界的に2,000億ドル以上の受粉サービスを提供する、経済的かつ農業上重要な昆虫である¹ 。米国とヨーロッパでは、ミツバチのコロニー数は減少しています。米国はカリフォルニア州を失っている。 1947年から2008年にかけて管理されたミツバチのコロニーの60％を占めていました。 1961〜2007年の27％ ^2、3 。寄生虫の侵入、病原体の感染、養蜂の実践、殺虫剤の使用などがありますが、これらに限定されません。

ハチミツは、2つの主要経路を介して農薬に暴露される可能性があります。ハイブ以外の農薬の暴露は、餌を食べる人が農作物と接触するときに起こります害虫からの保護のための化学薬品を噴霧されている。蜂蜜中の農薬の暴露は、養蜂者がダニ、バクテリア、微胞子虫などの病害虫や病原菌を防除するために化学物質を利用する場合に発生する可能性があります⁴ 。米国とカナダの24の養蜂場のワックス、花粉、ミツバチのサンプルで農薬残留物が確認されている5,6。蜜蜂への農薬の接触の影響には、急性毒性ならびに麻痺、失見当識、および行動および健康の変化などの亜致死的影響が含まれる1,7。現代の農業では農作物収量を維持するために農薬を使用する必要があるため、これらの化学物質は将来も引き続き信頼されます² 。殺虫剤暴露からミツバチをより良く保護するためには、新しい議定書と規制の開発が必要である⁵ 。保護のための1つの可能なアプローチは、餌を餌取りする間、ミツバチが農薬にさらされるのを減らすための忌避剤の使用である。

節足動物防除剤（IR）は、典型的には、節足動物の病原菌に対する個人的な咬傷保護手段として用いられてきた⁸ 。 60年以上前に開発された最も広く使用され成功したIRはDEET ^8,9です。これは昆虫忌避試験のゴールドスタンダードとみなされ、世界保健機関と環境保護庁が忌避スクリーニングのためのポジティブコントロールとして使用されています¹⁰ 。さらに、DEETはミツバチを脅威から彼らのコロニーに分散させることが判明している¹¹ 。個人用IRに関連する現在の属性には、（1）広範な節足動物に対する持続的な効果、 （2）皮膚または衣類に適用したときに使用者に対して非刺激性であること; （3）無臭または楽しいにおい; （4）衣服への影響なし。 （5）皮膚に塗布し、使用者の発汗、洗浄、および拭きに耐えるときに油状の外観を示さない。 （6）一般的に使用されるプラスチックには影響を与えない。 （7）化学的に安定であり、広範な使用のために手頃な価格¹² 。ミツバチに使用される忌避剤は、永続的な効果、アプリケータに対する非刺激性、無臭または快適な臭気、化学的に安定で広範な使用のために手頃な価格、およびミツバチに対する無毒性のようないくつかの属性を必要とするだけである。しかしながら、これらの属性を深く探究する前に、高いスループットで忌避/抑止のための化合物をスクリーニングする方法が必要とされている。ここでは、ハチミツの抑止のための化合物をスクリーニングする実験室アッセイのプロトコールについて説明します。これは、忌避性を決定する重要なステップです。以下のプロトコールは、ミツバチに対する殺虫剤の致死効果を評価するための視覚的追跡方法を記述した以前の研究から変更されている¹³ 。ハウこのプロトコルは、農薬処理された作物からミツバチを抑える可能性がある候補忌避物質の効果を測定するように設計されているという点で異なる。ミツバチに対する化学的抑止剤の実験室試験に推奨されるプロトコールはないので、このプロトコールはそのような化合物をスクリーニングする簡単なアプローチを提供する。