셀 리니지 마커의 공동 현지화와 토마토 신호

개발하는 동안, 연골 내 골 형성의 골격 체적의 80 % 이상을 차지한다. 널리은 비대 연골 세포의 사멸로 시작하는 것으로 생각된다. 그 후, 기본 골수의 세포 침입과 뼈 marrow- 및 골막 유래 세포 ^1,2에 의해 새로운 뼈 증착 다음에 혈관 신생을 시작합니다. 비대 연골 세포 운명 HCS ()는, 그러나, 수십 년 ³ 논쟁의 문제였다. 초기의 HC는 연골 세포 분화 경로의 종료로 간주하고, 일반적으로 아폽토시스의 HC의 궁극적 운명 것으로 생각되었다. 지금, 일부 연구자들은 적어도 일부의 HC가 살아남을 수 및 연골 뼈 형성에 기여하는 것이 좋습니다. 그들이 그 성장을 제안했지만 판 연골 세포는 미세 구조, 면역 조직 화학 염색을 기반으로 조골 세포에 transdifferentiate 수있는 능력을 가지고 있었고, 시험 관내에서, ^46이 방법 w 전혀 연구되지조골 세포 계보에 연골 세포의 기여를 입증에 결정적인 감수해야.

셀 혈통 추적 기술은 세포의 운명을 연구하는보다 엄격한 방법을 제공합니다. 간단히 말하자면, 오직 셀의 특정 유형에서 발현되는 재조합 효소, 리포터 유전자의 발현을 자극한다. 이러한 방식으로,이 세포의 종류와 그 후손 영구적 ^7로 표시된다. Cre 호텔-에 loxP 시스템은 일반적으로 혈통 추적에 사용됩니다. CRE (재조합 효소 효소) 둘에 loxP 부위 사이 STOP 서열을 절제하고 특정 세포주 (도 1a)에서 리포터를 활성화한다. 일부의 경우, 연구자는 에스트로겐 수용체 (Cre 호텔 ^{ERT2) (8)의} 수정 된 형태로 융합 Cre 호텔을 일으키는 등 타목시펜과 같은 약물을 사용하여 Cre 호텔을 활성화 유리한 시점을 선택할 수 있습니다. 형광 기자는 극적으로 복잡성을 줄일 수 있기 때문에 실험을 추적 혈통의 표준이되었다및 ^{8,9 추적} 세포 운명의 정확성과 효율성을 향상시킨다. 그것은 쉽게 ⁷ (도 1A)를 시각화하게 밝은 형광 단백질과 강한 표면 형광을 갖기 때문에 tdTomato 형광 리포터 중에서 최상의 선택되고있다.

시스템을 추적 Rosa26 ^{tdTomato 계보를} 사용하여, 우리 그룹과 다른 연구자의 HC 개발 ^10-14 동안 뼈 세포로 자신의 표현형을 변경할 수 있습니다 것으로 나타났습니다. 2.3Col1a1-GFP (조골 세포에 특정)과 면역 (뼈 세포에 특정) :이 작업을 수행하기 위해, 우리는 Rosa26의 ^tdtomato (유비쿼터스 식 모든 셀에서) / Cre 호텔 (연골 세포에 특정) 마우스와 조합을 추적하는 두 세트를 개발했다. 데이터는 두 가지 방법이 생체 내에서 세포의 운명을 연구하는 가능한 방법이라는 것을 보여줍니다.