ウィリスのマウスサークルを単離するためのプロトコル
Summary
We describe here a reproducible protocol for isolating the mouse circle of Willis.
Abstract
ウィリス（のCoW）の大脳動脈輪（大脳動脈輪）または円は、脳や周囲の構造に血液を供給する光学キアズマと視床下部を取り囲む循環吻合術です。これは、脳アミロイド血管症（CAA）関連血管障害、頭蓋内アテローム性動脈硬化症と頭蓋内動脈瘤を含むいくつかの脳血管障害、に関与しています。その予防のための新規な薬物標的の同定のために、これらの疾患の根底にある分子メカニズムの研究は、動物モデルを必要とします。他のものは、ここで説明CoW.The方法は、任意のマウス系統でのCoW分離に適しており、（タンパク質産生の遺伝子の発現をスクリーニングするための大きな可能性を有しているなどの、脳血管系の単離を含むであろう一方、これらのモデルのいくつかは、トランスジェニックであってもよいです翻訳後タンパク質修飾など secretome分析、）マウスの脳の大型船舶に関する研究血管系。それはまた、単離されたマウスの嗅覚動脈のために開発された臓器槽システムを適合させることにより、ex vivoでの研究のために使用することができます。
Introduction
また、ウィリス（のCoW）、Willisorウィリス多角形のループの円として知られる脳動脈円（大脳動脈輪）は、）最初のそれは、光学キアズマとすることができ、視床下部の周囲に位置する循環吻合である1664にトーマス・ウィリスによって記述されました脳および周囲の構造に血液を供給する中央ハブとみなすこと。血液は、内頸動脈と椎骨動脈を経由してこの構造体に入り、それが内部の中間及び後大脳動脈を経由して、円の外に流れます。これらの動脈の各々は、円の両側の枝を左右しています。完全な円を動脈通信基底、郵便通信、及び前方（ 図1及び図2）。流出動脈のいずれかに血流障害のリスクは、それによって、十分な血液がBに供給されることを保証し、頸動脈および大脳動脈の円に入る血液の融合によって最小化されます雨。この構造は、内頸動脈の重症閉塞性疾患における側副血流のための主経路として機能します。
脳血管障害のいくつかの種類の牛にその起源を持っています。最も一般的には1、2、3これらの障害が原因で血管拡張に低灌流につながる可能性があります。脳アミロイド血管症（CAA）関連血管障害、頭蓋内アテローム性動脈硬化症と頭蓋内動脈瘤であり、脳内および/またはくも膜下出血は、最終的には、虚血性または出血性脳卒中またはに変換しますせいぜい、一過性脳虚血発作。おそらく血管造影法と組み合わせた神経画像などの診断手順における最近の進歩は、それが可能な脳生検を必要とせず、臨床的にこれらの主要な脳血管疾患を診断するために行きました。それにもかかわらず、効果的かつ具体的な治療法（薬理学的または血管内）は、現在不足していると、新しい定義する必要性が存在します分子標的。
ヒトにおけるこれらの疾患の予防のための新規な薬物標的の同定は、動物モデル牛などの脳血管系を単離する方法を必要とします。このようなモデルは、頭蓋内動脈瘤、CAAまたは頭蓋内アテローム性動脈硬化症の動物モデルにおける大血管の壁に生じる、炎症性変化を含む特定の変更、にの証拠や手がかりを提供する必要があります。4、5、6
当社は、CAAのようなアルツハイマー病（AD）における血管の炎症の研究および関連疾患を容易にするために、マウスのCoWを単離するための方法を確立しました。マウスの牛を単離するためのこの方法は、疾患の進行中の炎症性脳血管遺伝子発現の評価のために開発されました。一緒に軟膜および軟膜動脈の壁内のアミロイドβ沈着の検出と、この方法は、簡単に阻止するために作ることができます鉱山炎症性脳血管壁での遺伝子発現およびAβペプチドの蓄積の間の可能な関係。くも膜下空間内の軟膜および軟膜を含む脳の血管網は、ウィリス動脈輪を形成する大きな動脈の拡張です。ここに記載された方法は、任意のマウス系統の牛を単離するために使用することができ、マウスの脳血管系の大きな血管のスクリーニング（ 例えば 、遺伝子発現、タンパク質産生、および翻訳後タンパク質修飾）すべてのタイプのために使用することができます。
Protocol
Representative Results
Discussion
ここではウィリス動脈輪の単離のための再現可能なプロトコルを記述します。牛を含む最も一般的な脳血管障害は、動脈血管の壁に影響を与えるのすべてがCAA関連血管障害、頭蓋内アテローム性動脈硬化症と頭蓋内動脈瘤、です。危険因子にはよく知られているが、これらの脳疾患の分子的病因はよくわかっていないままであり、その発生を予測するための特異的な生物学的マーカーが欠如?…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
この作品は、パリVI大学とピエールファーブルイノベーション助成金によってサポートされていました。
Materials
| Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline | Sigma-Aldrich | D8537 | |
| Dumont #55 Forceps | Fine Science Tools | 11295-51 | |
| Hardened Fine Iris Scissors | Fine Science Tools | 14090-11 | |
| Scissors – Straight / Sharp / Sharp 16.5 cm | Fine Science Tools | 14002-16 | |
| Dumont #7b Forceps | Fine Science Tools | 11270-20 | |
| Stereoscopic Zoom Microscope | Nikon | SMZ745T | |
| CellBIND Surface 60mm Culture Dish | Corning | #3295 | |
| Peristaltic Pump – MINIPULS 3 | Gilson | M312 | |
| Pentobarbital Sodique | Ceva Santé Animale | FR/V/2770465 3/1992 |
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