Summary

Phosphopeptides Gelişmiş Zenginleştirme için Makrogözenekli Polimer Monoliths üzerinde yüksek Gözenekli Koordinasyon Polymer Coatings Hazırlanması

Published: July 14, 2015
doi:

Summary

A procedure for the preparation of porous hybrid separation media composed of a macroporous polymer monolith internally coated by a high surface area microporous coordination polymer is presented.

Abstract

We describe a protocol for the preparation of hybrid materials based on highly porous coordination polymer coatings on the internal surface of macroporous polymer monoliths. The developed approach is based on the preparation of a macroporous polymer containing carboxylic acid functional groups and the subsequent step-by-step solution-based controlled growth of a layer of a porous coordination polymer on the surface of the pores of the polymer monolith. The prepared metal-organic polymer hybrid has a high specific micropore surface area. The amount of iron(III) sites is enhanced through metal-organic coordination on the surface of the pores of the functional polymer support. The increase of metal sites is related to the number of iterations of the coating process.

The developed preparation scheme is easily adapted to a capillary column format. The functional porous polymer is prepared as a self-contained single-block porous monolith within the capillary, yielding a flow-through separation device with excellent flow permeability and modest back-pressure. The metal-organic polymer hybrid column showed excellent performance for the enrichment of phosphopeptides from digested proteins and their subsequent detection using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry. The presented experimental protocol is highly versatile, and can be easily implemented to different organic polymer supports and coatings with a plethora of porous coordination polymers and metal-organic frameworks for multiple purification and/or separation applications.

Introduction

Gözenekli bir koordinasyon polimerler (yaratanlar) amorf ya da 1-3 kristalize olabilen 1, 2 ya da 3 boyutlu olarak uzanan bir koordinasyon kişiler tekrarlayan organik ligandlar ile bağlantılı metaller merkezlerine göre koordinasyon bileşikleri bulunmaktadır. Son yıllarda, gözenekli malzemelerin bu sınıf nedeniyle yüksek gözeneklilik, geniş kimyasal Ayarlanabilirliğin ve onların istikrar geniş ilgi gördü. Yaratanlar gaz depolama, gaz ayırma ve kataliz 3-6, ve çok yakın zamanda, yaratanlar ilk analitik uygulamalar 7 tarif edilmiştir dahil uygulamaları bir dizi için araştırılmıştır.

Çünkü onların gelişmiş kimyasal işlevsellik ve yüksek gözenekli yaratanlar arıtma süreçleri ve kromatografik ayırımlar iyileştirilmesi için onların büyük potansiyeli hedef seçilmişlerdir, ve bu konuyu ilgili raporların bir numara 7-13 yayınlandı. Bununla birlikte, yaratanlar performansı, bir equivale şu anda değil,nedeniyle parçacıkların ya da kristallerin kendi tipik düzensiz şekilli morfolojiler nedeniyle bu katıların dolu yatak büyük parçacıklar arası boşluklar aracılığıyla hızlı difüzyon olasılığı mevcut kromatografik malzemeleri ile nt seviyesinde. Bu, düzensiz olarak dağıtılmış ambalaj dan daha düşük bir beklenen performans, hem de yüksek sütun backpressuresin ve istenmeyen pik şekli morfolojileri 14,15 yol açar.

Parçacık arası boşluklara sayesinde hızlı yayılma sorunu çözmek ve eş zamanlı olarak analiz uygulamaları için yaratanlar performansını artırmak amacıyla, makro-yüzeyinde PCP ihtiva eden bir makro-gözenekli bir polimer monolit 16 dayanan bir hibrid malzemeden gelişimi olur istenebilecektir. Polimer yekpare keçeleri boncuk ve başarıyla birkaç c piyasaya sürülmüş en verimli alternatiflerden birini onları yapar, kendi gözenekler aracılığıyla konvektif akışını sürdürmek, tek parça malzemeleri kendine yeten ompanies 17,18. Gözenekli polimer yekpare genellikle monomerinin polimerizasyonu ve tipik olarak organik çözücülerin ikili karışımlarıdır porogens, mevcudiyetinde bir çapraz bağlayıcı dayanmaktadır. Elde edilen monolitik malzemeler microglobular yapısı ve yüksek gözeneklilik ve akış geçirgenliğine sahiptir.

Basit bir yaklaşım PCP içeren bir polimer monolit monolit polimerizasyon karışımı olarak sentezlenmiş yaratanlar doğrudan ilave dayanmaktadır hazırlamak için bu malzemeleri birleştirmek için. Yaratanlar sonuçlandı Bu yaklaşım çoğunlukla nihai malzemenin 14,15 daha fazla uygulama için aktif olan bir polimer iskele içinde gömülü değil. Bir farklı sentetik yaklaşımı, örneğin, kristal içinde bulunan gözeneklerin büyük bir kısmı bir polimer yekpare makro-erişilebilen yaratanlar, ya da kristal metal organik çerçevelerin (MOFs) üniform filmler geliştirmek için gereklidir.

t "> Bu yazıda kolayca uygulanabilir yaratanlar bağlanması için uygun bir fonksiyonel grup, bir makro-gözenekli bir polimer destek üzerine dayanan bir metal-organik bir polimer karma malzemesi (MOPH) hazırlanması için bir protokol rapor kendi kendine yeten bir tek akış uygulamaları için optimum özelliklere sahip bir sütun biçiminde parça Takımı polimer monolit. polimer sentezi prosedürü basit bir oda sıcaklığı çözüm tabanlı takip eder   yöntem, monolit 19-20 gözeneklerinin iç yüzeyi üzerinde bir PCP kaplama büyümesi. İlk örnek olarak, bir makro-gözenekli poli (stiren-divinilbenzen-metakrilik asit) yekpare olan, bir demir (III) benzenetricarboxylate (FeBTC) koordinasyon polimer filmin hazırlanmasını tarif etmektedir. Bu yöntem toplu tozlar hazırlanması gibi kapiler sütun için etkili olan ve tarif edilen protokol, diğer yaratanlar kolayca uygulanabilir değildir. Akış Throu fonksiyonel malzemeler olarak MOPHs potansiyelinin bir örnek olarakbu tip uygulamaların biz merkezleri Fe Phosphopeptides bağlanma afinitesini istismar sindirilmiş protein karışımları arasından fosfopeptidler zenginleştirmek (III) Fe yoğun bir kaplama içeren geliştirilmiş FeBTC MOPH uygulanan (III). geliştirilen protokol 21 üç ana bölümden oluşmaktadır: makropor organik polimer monolit destek hazırlanması; monolit gözeneklerin yüzeyinde PCP kaplama büyümesi; Phosphopeptides zenginleştirilmesi için uygulama.

Protocol

NOT: Başlamadan önce, tüm ilgili malzeme veri sayfaları (MSDS) kontrol edin. Sentetik ve uygulama prosedürleri kullanılan kimyasalların çeşitli toksik değildir. Tüm uygun güvenlik uygulamalarını takip ve yeterli koruyucu ekipman (laboratuvar önlüğü, tam uzunlukta pantolon, kapalı-toe ayakkabıları, koruyucu gözlük, eldiven) kullanın. Azot adsorpsiyon ölçümleri için sıvı azot (izolasyonlu eldiven, yüz maskesi) işlerken tüm kriyojenik kişisel koruyucu donanımları kullanın. <p class=…

Representative Results

Organik polimer yekpare gözenek yüzeyi üzerinde PCP büyüme şematik bir gösterimi, Şekil 1 'de gösterilmiştir. Bu şekilde, bizim göstermektedir, ilk Fe (III) atomu karboksilik fonksiyonel gruplara koordine orijinal polimer yekpare gözenek yüzeyi üzerinde tutulan . Protokol izlenmek suretiyle, burada ek bir organik ligand ve tarif Fe (III) iyonları, polimer yekpare olan gözenekli bir koordinasyon ağ şekillendirme yüzeyine ilave edilir. Ayrıca, şematik akış geçiş destek olarak…

Discussion

Orijinal polimerin monolit metaller bağlanabilen karboksilik fonksiyonel grupları içerir. Orijinal malzeme başlangıç ​​metal sitelerini koordine bir mikro-gözenekli bir ağ şekillendirme ek metal sitelerinin bir dizi içeren bir PCP kaplama (Şekil 1A) büyümek edebiliyoruz. Bu durum, hareketsiz metal iyonu yakınlık kromatografisi (IMAC) tekniği olarak metal türleri söz konusu ekstraksiyon ve saflaştırma işlemleri için çekici bir sunulan MOPH malzemeleri sağlar. Phosphopeptides z…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

This work has been performed at the Molecular Foundry, Lawrence Berkeley National Laboratory and supported by the Office of Science, Office of Basic Energy Sciences, Scientific User Facilities Division of the US Department of Energy, under Contract No. DE-AC02–05CH11231. The financial support of F.M. by a ME-Fulbright fellowship and A.S. by Higher Education Commission of Pakistan are gratefully acknowledged.

Materials

Polyimide-coated capillaries Polymicro Technologies TSP100375 100 μm i.d.
3-(trimethoxysilyl)propyl methacrylate, 98% Sigma-Aldrich 440159
Styrene, 99% Sigma-Aldrich W323306 Technical grade
Divinylbenzene, 80% Sigma-Aldrich 414565
Methacrylic acid, 98% Mallinckrodt MK150659
Toluene, ≥99.5% EMD chemicals MTX0735-6
Isooctane, ≥99.5% Sigma-Aldrich 650439
2,2'-azobisisobutyronitrile, 98% Sigma-Aldrich 441090
Aluminium oxide (basic alumina) Sigma-Aldrich 199443
Iron (III) chloride hexahydrate, 97% Sigma-Aldrich 236489
1,3,5-benzenetrycarboxylic acid, 95% Sigma-Aldrich 482749
Acetonitrile, ≥99.5% Sigma-Aldrich 360457
Ammonium bicarbonate, ≥99.5% Sigma-Aldrich 9830
Trifluoroacetic acid, ≥99% Sigma-Aldrich 302031
Ethanol, ≥99.8% Sigma-Aldrich 2854
Iodoacetamide, ≥99% Sigma-Aldrich I1149
Dithiothreitol, ≥99% Sigma-Aldrich 43819
Monobasic sodium phosphate dihydrate, ≥99% Sigma-Aldrich 71505
Dibasic sodium phosphate dihydrate, ≥99% Sigma-Aldrich 71643
Phosphoric acid, ≥85% Sigma-Aldrich 438081
2,5-dihydroxybenzoic acid, ≥99% Sigma-Aldrich 85707
Trypsin Sigma-Aldrich T8003 Bovine pancreas
β-casein Sigma-Aldrich C6905 Bovine milk
ZipTip pipette tips Merck Millipore ZTC18S096 C18 resin

References

  1. Li, H., Eddaoudi, M., O’Keeffe, M., Yaghi, O. M. Design and synthesis of an exceptionally stable and highly porous metal-organic framework. Nature. 402, 276-279 (1999).
  2. Kitagawa, S., Kitaura, R., Noro, S. i. Functional porous coordination polymers. Angew. Chem. Int. Ed. 43, 2334-2375 (2004).
  3. Furukawa, H., Cordova, K. E., O’Keeffe, M., Yaghi, O. M. The chemistry and applications of metal-organic frameworks. Science. 341, 974 (2013).
  4. Ma, S., Zhou, H. C. Gas storage in porous metal-organic frameworks for clean energy applications. Chem. Commun. 46, 44-53 (2010).
  5. Li, J. R., Sculley, J., Zhou, H. C. Metal-organic frameworks for separations. Chem. Rev. 112, 869-932 (2012).
  6. Lee, J., Farha, O. K., Roberts, J., Scheidt, K. A., Nguyen, S. T., Hupp, J. T. Metal-organic framework materials as catalysts. Chem. Soc. Rev. 38, 1450-1459 (2009).
  7. Gu, Z. Y., Yang, C. X., Chang, N., Yan, X. P. Metal-organic frameworks for analytical chemistry: From sample collection to chromatographic separation. Acc. Chem. Res. 45, 734-745 (2012).
  8. Ahmad, R., Wong-Foy, A. G., Matzger, A. J. Microporous coordination polymers as selective sorbents for liquid chromatography. Langmuir. 25, 11977-11979 (2009).
  9. Yang, C. X., Yan, X. P. Metal-organic framework MIL-101(Cr) for high-performance liquid chromatographic separation of substituted aromatics. Anal. Chem. 83, 7144-7150 (2011).
  10. Fu, Y. Y., Yang, C. X., Yan, X. P. Control of the coordination status of the open metal sites in metal-organic frameworks for high performance separation of polar compounds. Langmuir. 28, 6802-6810 (2012).
  11. Gu, Z. Y., Yan, X. P. Metal-organic framework MIL-101 for high-resolution gas-chromatographic separation of xylene isomers and ethylbenzene. Angew. Chem. Int. Ed. 49, 1477-1480 (2010).
  12. Chang, N., Gu, Z. Y., Yan, X. P. Zeolitic imidazolate framework-8 nanocrystal coated capillary for molecular sieving of branched alkanes from linear alkanes along with high-resolution chromatographic separation of linear alkanes. J. Am. Chem. Soc. 132, 13645-13647 (2010).
  13. Yu, L. Q., Xiong, C. X., Yan, X. P. Room temperature fabrication of post-modified zeolitic imidazolate-90 as stationary phase for open-tubular capillary electrochromatography. J. Chromatogr. A. 1343, 188-194 (2014).
  14. Fu, Y. Y., Yang, C. X., Yan, X. P. Incorporation of metal-organic framework UiO-66 into porous polymer monoliths to enhance the liquid chromatographic separation of small molecules. Chem. Commun. 49, 7162-7164 (2013).
  15. Lin, C. L., Lirio, S., Chen, Y. T., Lin, C. H., Huang, H. Y. A novel hybrid metal-organic framework-polymeric monolith for solid-phase extraction. Chem. Eur. J. 20, 3317-3321 (2014).
  16. Svec, F. Porous polymer monoliths: Amazingly wide variety of techniques enabling their preparation. J. Chromatogr. A. 1217, 902-924 (2010).
  17. Shekhah, O., et al. Step-by-step route for the synthesis of metal-organic frameworks. J. Am. Chem. Soc. 129, 15118-15119 (2007).
  18. Shekhah, O., Fu, L., Belmabkhout, Y., Cairns, A. J., Giannelis, E. P., Eddaoudi, M. Successful implementation of the stepwise layer-by-layer growth of MOF thin films on confined surfaces: mesoporous silica foam as a first case study. Chem. Commun. 48, 11434-11436 (2012).
  19. Saeed, A., Maya, F., Xiao, D. J., Naham-ul-Haq, M., Svec, F., Britt, D. K. Growth of a highly porous coordination polymer on a macroporous polymer monolith support for enhanced immobilized metal ion affinity chromatographic enrichment of phosphopeptides. Adv. Funct. Mater. 24, 5797-5710 (2014).
  20. Krenkova, J., Lacher, N. A., Svec, F. Control of selectivity via nanochemistry: Monolithic capillary column containing hydroxyapatite nanoparticles for separation of proteins and enrichment of phosphopeptides. Anal. Chem. 82, 8335-8341 (2010).
  21. Jabeen, F., et al. Silica-lanthanum oxide: Pioneer composite of rare-earth metal oxide in selective phosphopeptides enrichment. Anal. Chem. 84, 10180-10185 (2012).
  22. Hussain, D., et al. Functionalized diamond nanopowder for phosphopeptides enrichment from complex biological fluids. Anal. Chim. Acta. 775, 75-84 (2013).
  23. Aprilita, N. H., et al. Poly(glycidyl methacrylate/divinylbenzene)-IDA-FeIII in phosphoproteomics. J. Proteom. Res. 4, 2312-2319 (2005).
  24. Lo, C. Y., Chen, W. Y., Chen, C. T., Chen, Y. C. Rapid enrichment of phosphopeptides from tryptic digests of proteins using iron oxide nanocomposites of magnetic particles coated with zirconia as the concentrating probes. J. Proteom. Res. 6, 887-893 (2007).
  25. Aryal, U. K., Ross, A. R. S. Enrichment and analysis of phosphopeptides under different experimental conditions using titanium dioxide affinity chromatography and mass spectrometry. Rapid Commun. Mass. Spectrom. 24, 219-231 (2010).
  26. . . Select Iron Affinity Gel Technical Bulletin. , (2015).

Play Video

Cite This Article
Lamprou, A., Wang, H., Saeed, A., Svec, F., Britt, D., Maya, F. Preparation of Highly Porous Coordination Polymer Coatings on Macroporous Polymer Monoliths for Enhanced Enrichment of Phosphopeptides. J. Vis. Exp. (101), e52926, doi:10.3791/52926 (2015).

View Video