サイトカインキャプチャシステムを用いた臨床応用のためのサイトメガロウイルス特異的T細胞の自動化された細胞濃縮

造血幹細胞移植^{（HSCT）1は、}移植片対腫瘍効果を改善し、日和見感染²に対する免疫を提供するために、養子T細胞療法と組み合わせることができます。注入のための抗原特異的なドナー由来T細胞の生成は、歴史的に熟練者とGMP準拠している専門の施設の使用を必要としてきました。このようなT細胞の送達は、日和見感染症³の解像度と同様に、基礎となる悪性腫瘍^4の治療をもたらしました。最近、研究者は実証されているそのわずか数千のウイルス特異的T細胞の養子移入（〜1×10 ^{4から2.5×10 5細胞} / kgを、レシピエントの体重）が正常に同種HSCT ^5-9後の日和見のCMV感染症を治療することができます。関連した製造業者の要件にGMP施設の限られた数および細胞の生産に関連する高いコストは、しかしながら、RESTRを有しT細胞療法^10を約束に対する患者のアクセスをicted。抗原特異的T細胞を単離するための一つのアプローチは、CD45およびIFN-γを認識する二重特異性試薬を用いてCCSに基づいています。示されているように、この方法は、自動化された細胞濃縮CCS装置（ 図1B）を用いた臨床グレードのCMV特異的T細胞を生成するために使用することができます。

CMV特異的T細胞は、CMV血清反応陽性ドナーからの白血球搬出総核細胞（TNC）でのCMVのpp65抗原のオーバーラップペプチドをインキュベートすることにより生成されます。ヒト白血球抗原（HLA）との関連で表示されるこれらのペプチドは、IFN-γを分泌するTNC内のCMVのpp65特異的T細胞を活性化します。これらのT細胞は、その後、「捕捉される」ことと、磁気的に分離することができます。第一世代の細胞濃縮装置の動作（ 図1A）は、複数のを行うことGMP条件下で細胞培養での人材を必要とし、スタッフのコーディネート「捕捉された」製品を生成するために必要なTEPS。

手順は、通常、連続運転の10〜12時間を必要とするため、担当者はおそらく、GMP施設で2シフト上で動作する必要があります。これらの制約は、現在（ 図1Bに示される）第二世代のデバイスの実装によって回避されます。このデバイスは、最初の生成装置と同等の磁気濃縮を、引き受けるが、unbreachedアプローチで、CCSの他の側面を自動化します。ステップのほとんどは、スタッフが無人達成することができるので、これはかなりのGMPチームの負担を軽減します。デバイスは、閉鎖系として動作するので、さらに、抗原特異的T細胞が捕捉され、機器を起動する前に、白血球搬出単離および材料の製造に含まれる工程を除いて、ベンチトップ上で処理することができます。この第二世代の細胞濃縮装置の完全な計測および機能の詳細については、パブされています¹¹ lished。

ここでは、自動化された細胞濃縮CCSシステムを使用して、定常状態のアフェレーシス産物からのCMVのpp65特異的T細胞を濃縮するための手順について説明します。一旦単離されると、これらのCMV特異的T細胞は、直ちに患者に注入することができます。