Elektroretinogram (ERG) är en icke-invasiv elektrofysiologisk metod som har använts i stor utsträckning i kliniken för att bestämma funktionen av näthinnan hos människor. Den elektriska aktiviteten som svar på en Ijusstimulus mäts genom att placera registreringselektrod på den yttre ytan av hornhinnan. Egenskaperna för stimulans paradigm och svarsvågformen definierar näthinnans nervceller bidrar till svaret. Denna metod har anpassats för användning med ett antal djurmodeller inklusive möss och zebrafisk. Den typiska ryggradsdjur ERG svar har fyra huvudkomponenter: a-våg, som är en hornhinna-negativ potential härrör från fotoreceptor cellaktivitet; b-våg, en hornhinna-positiv potential härledd från PÅ bipolära celler; d-våg, en hornhinna-positiv potential tolkas som aktiviteten hos de OFF bipolära celler; och c-våg, som uppträder flera sekunder efter det att B-vågen och återspeglar aktiviteten i Muller Glia och retginalets pigmentepitel ^1-4. Ytterligare referenser för att förstå historien och principer för ERG analys hos människor och modelldjur är online lärobok, Webvision, från University of Utah och texter såsom Principles and Practice of Clinical Elektro av Vision ^{4, 5.}

Danio rerio (zebrafisk) har länge använts som en modell för ryggradsdjur utveckling, på grund av dess snabba mognad och öppenhet, vilket möjliggör icke-invasiv morfologisk analys av organsystem, beteendeanalyser och både framåt och bakåt genetiska skärmar (för översikt se Fadool och Dowling ^6). Zebrafisk larver är mycket mottagliga för genetisk och farmakologisk manipulation, vilket, när den kombineras med deras höga fruktsamhet, gör dem till en utmärkt djurmodell för hög genomströmning biologiska analyser. Den högre förhållande mellan koner till stavar i larvzebrafisk – ungefär 1: 1 jämfört med möss (~ 3% kons) – gör dem särskilt användbara för studier av konen funktion ^7-9.

I ryggradsdjur näthinnan, koner utvecklas innan stängerna ^10. Intressant, zebrafisk kottar är operativ så tidigt som 4 dpf, vilket möjliggör selektiv elektrofysiologiska analys av koner i det skedet ^{6, 11,12.} Däremot ERG svar i stavar visas mellan 11 och 21 dpf ^13. Därför zebrafisk larver vid 4-7 dpf fungera funktionellt som en all-kon näthinnan. Emellertid är den nativa fotopiska ERG svaret hos 4-7 dpf larver domineras av b-vågen. Tillämpning av farmakologiska medel, såsom L – (+) – 2-amino-4-fosfono-smörsyra (L-AP4), en agonist för metabotropa glutamat (mGluR6) receptorn uttryckt av PÅ bipolära celler, effektivt blockerar alstringen av b-vågen och avslöjar den isolerade kon massreceptorpotential, ("a-wave") ^14-17.

Här beskriver vi en enkel och reliable metod för ERG analys med hjälp av kommersiellt tillgängliga ERG utrustning avsedd för användning med möss som har anpassats för användning med zebrafisk larver. Detta system kan utnyttjas på zebrafisk larver av olika genetiska bakgrunder, liksom de som behandlats med farmakologiska medel, för att hjälpa forskarna vid identifiering av signalvägar som bidrar till visuell känslighet och ljus anpassning ^16. De experimentella förfaranden som beskrivs i detta protokoll kommer att vägleda utredarna i användningen av ERG analys för att svara på en rad olika biologiska frågor som rör synen, och demonstrera byggandet av en flexibel ERG setup.