Elektroretinogrammet (ERG) er en ikke-invasiv elektrofysiologisk metode som har vært brukt i stor utstrekning i klinikken for å bestemme funksjonen av retina hos mennesker. Den elektriske aktivitet som svar på en lett stimulus måles ved å plassere opptakselektroder på den ytre overflaten av hornhinnen. Det karakteristiske ved stimulus paradigmet og responsen bølgeform definerer de retinale nevroner som bidrar til reaksjonen. Denne metode er blitt tilpasset for bruk med en rekke dyremodeller, inkludert mus og sebrafisk. Den typiske vertebrate ERG respons har fire hovedkomponenter: en bølge, som er en hornhinne-negativt potensial avledet fra fotoreseptoren celleaktivitet; b-bølge, en hornhinne-positive potensial avledet fra ON bipolare celler; d-bølge, en hornhinne-positive potensial tolket som aktiviteten av de av bipolare celler; og c-bølge, som forekommer i flere sekunder etter at b-bølgen og viser aktivitet i Müller gliaceller og retInal pigment epitel ^1-4. Andre referanser for å forstå historien og prinsipper av ERG analyse hos mennesker og modell dyr er den elektroniske lærebok, Webvision, fra University of Utah og tekster som prinsipper og praksis for klinisk Elektro av Vision ^{4, 5.}

Danio rerio (sebrafisk) har lenge vært foretrukket som en modell for virveldyr utvikling, på grunn av sin raske modning og åpenhet, som gjør det mulig for ikke-invasiv morfologisk analyse av organsystemer, atferdsanalyser og både framover og bakover genetiske skjermer (for oversikt, se Fadool og Dowling ^6). Sebrafisk larver er svært mottagelig for genetisk manipulasjon og farmakologisk, som, når kombinert med deres høye fruktbarhet, gjør dem til et utmerket dyremodell for high-throughput biologiske analyser. Jo høyere forholdet mellom kjegler til stenger i larvesebrafisk – omtrent 1: 1 i forhold til mus (~ 3% kjeglee) – gjør dem særlig anvendelige for studium av kjeglen funksjon ^7-9.

I virveldyr netthinnen, kjegler utvikle før stenger ^10. Interessant, sebrafisk kjegler er operative så tidlig som 4 dpf, noe som åpner for selektiv elektrofysiologisk analyse av kjegler på det stadiet ^{6, 11,12.} I kontrast, ERG responser i stenger vises mellom 11 og 21 dpf ^13. Derfor, sebrafisk larver 4-7 dpf tjene funksjonelt som en all-cone netthinnen. Imidlertid er den native photopic ERG respons på 4-7 dpf larver dominert av b-bølge. Anvendelse av farmakologiske midler, så som L – (+) – 2-amino-4-fosfono-smørsyre (L-AP4), en agonist for metabotropic glutamat (mGluR6) reseptoren uttrykkes ved ON bipolare celler, effektivt blokkerer dannelsen av b-bølgen og avslører den isolerte membran masse reseptor potensial, ("a-bølge") ^14-17.

Her beskriver vi en enkel og reliable metode for ERG analyse ved hjelp av kommersielt tilgjengelig ERG utstyr utformet for bruk med mus som har blitt tilpasset for bruk med sebrafisk larver. Dette systemet kan utnyttes på sebrafisk larver av varierende genetiske bakgrunn, så vel som de som ble behandlet med legemidler som er, for å hjelpe forskere i identifisering av signalveier som bidrar til visuell følsomhet og lys tilpasning ^16. De eksperimentelle prosedyrer som er skissert i denne protokollen vil lede etterforskerne i bruk av ERG analyse for å besvare en rekke biologiske spørsmål knyttet til syn, og demonstrere bygging av en fleksibel ERG oppsett.