L'électrorétinogramme (ERG) est une méthode électrophysiologique non invasive qui a été largement utilisé en clinique pour déterminer la fonction de la rétine chez les humains. L'activité électrique en réponse à un stimulus lumineux est mesuré en plaçant des électrodes d'enregistrement sur la surface externe de la cornée. Les caractéristiques du modèle de stimulus et la forme d'onde de réponse définissent les neurones rétiniens qui contribuent à la réponse. Cette méthode a été adaptée pour une utilisation avec un certain nombre de modèles animaux, y compris les souris et le poisson zèbre. La réponse ERG vertébrés typique a quatre composantes principales: l'une d'onde, qui est un potentiel de cornée négatif provenant de l'activité des cellules photoréceptrices; la b-ondes, un potentiel de cornée positif dérivé de l'ON cellules bipolaires; le d-ondes, un potentiel de cornée positif interprété comme l'activité des cellules bipolaires OFF; et c-ondes, qui se produit quelques secondes après le b-ondes et reflète l'activité dans la glie Müller et retInal épithélium pigmentaire ^1-4. Références supplémentaires pour comprendre l'histoire et les principes de l'analyse ERG chez les humains et les animaux modèles sont le manuel en ligne, WebVision, de l'Université de l'Utah et des textes tels que les Principes et pratique de électrophysiologie clinique de Vision ^{4, 5.}

Danio rerio (poisson zèbre) a longtemps été privilégiée comme un modèle pour le développement des vertébrés, en raison de sa maturation et la transparence rapide, ce qui permet pour l'analyse morphologique non invasive de systèmes d'organes, les tests comportementaux et les deux avant et arrière écrans génétiques (pour revue, voir Fadool et Dowling ^6). Larves de poisson zèbre sont prêtent très bien à la manipulation génétique et pharmacologique, qui, lorsqu'il est couplé avec leur taux de fécondité élevé, en font un modèle animal excellente pour les analyses biologiques à haut débit. Le ratio plus élevé de cônes à des tiges chez le poisson zèbre larves – environ 1: 1 par rapport à des souris (~ 3% cônes) – rendent particulièrement utile pour l'étude de la fonction de cône ^7-9.

Dans la rétine de vertébrés, cônes se développent avant ¹⁰ tiges. Fait intéressant, les cônes de poisson zèbre sont opérationnels dès 4 dpf, permettant une analyse électrophysiologique sélective des cônes à ce stade ^{6, 11,12.} En revanche, les réponses ERG en tiges apparaissent entre 11 et 21 dpf ^13. Par conséquent, larves de poisson zèbre à 4-7 servir dpf fonctionnellement comme une rétine tout-cône. Cependant, la réponse ERG photopique natif de 4-7 larves de DPF est dominée par la b-ondes. Application des agents pharmacologiques, tels que la L – (+) – 2-amino-4-phosphono-butyrique (L-AP4), un agoniste de glutamate métabotropique (mGluR6) récepteur exprimé par les cellules conductrices bipolaires, bloque efficacement la génération de la b-ondes et révèle le potentiel de masse isolée de cône du récepteur, (la «une vague») ^14-17.

Nous décrivons ici un simple et reliablméthode de e pour l'analyse ERG en utilisant l'équipement disponible dans le commerce ERG conçu pour une utilisation avec des souris qui ont été conçus pour être utilisés avec des larves de poisson zèbre. Ce système peut être utilisé sur des larves de poisson zèbre divers milieux génétiques, ainsi que ceux traités avec des agents pharmacologiques, pour aider les chercheurs à l'identification des voies qui contribuent à la sensibilité visuelle et adaptation à la lumière ¹⁶ signalisation. Les procédures expérimentales décrites dans ce protocole guideront les enquêteurs dans l'utilisation de l'analyse ERG pour répondre à une variété de questions biologiques relatives à la vision, et de démontrer la construction d'une configuration souple ERG.