Summary

适用于鼠标机关高精度锌同位素测量

Published: May 22, 2015
doi:

Summary

We present the technique to measure with high precision zinc isotope ratios in mouse organs.

Abstract

我们提出一个过程,在小鼠器官高精度锌同位素比值来衡量。锌是由5稳定同位素(64,66Zn,67Zn,68 Zn和70的Zn),这些小鼠器官之间自然分级。我们首先说明如何以溶解,以释放所述锌原子的不同器官;这个步骤是通过HNO 3和H 2 O 2的混合物中实现。然后,我们从所有其他元素净化锌原子,特别是从等压干扰( 例如 ,镍),通过阴离子交换色谱法中的稀的HBr / HNO 3介质。前两个步骤都在一个干净的实验室使用高纯度的化学品进行。最后,同位素比率通过使用多集电极感应耦合等离子体质谱仪,在低分辨率测量。将样品使用喷雾室和同位素分馏诱导质谱仪是correc注入泰德通过样品的比与一个标准(标准包围技术)的比例。这充分典型的过程产生的同位素的比例与50ppm的(2 SD)的重现性。

Introduction

高精度的测量(较好100ppm以下/原子质量单位)锌稳定同位素组合物只可能为大约15年由于多集电极等离子体源质谱仪的发展,至今在地球被主要应用于与行星科学。应用到医疗领域是新颖的,并具有很强的潜力作为生物标志物用于修改锌的代谢( 例如,阿尔茨海默病)的疾病。本文报道一种测量高精度锌的天然稳定同位素比率在各脏器鼠标的方法。同样的情况也适用于人类样本。该方法包括器官,锌从原子的其余部分的化学提纯,然后在一个质谱仪同位素比率分析的溶解。

锌同位素测量的质量取决于化学纯化的质量(锌的纯度,低空白排版ARED到的锌存在于样品中的量,该过程的高化学产率)和在仪器偏差的控制。最终锌馏分的高纯度是需要删除这两个同量异序的干扰和非等压干扰创建矩阵的效果。等压核素创建直接干扰( 例如,64镍)。非等压干扰产生的所谓“基质”的效果,并通过改变电离相比,纯锌标准到的样本进行比较,以1的条件改变的测量值的分析精度。低空白(<10毫微克)表明不存在由外部锌污染的样品是将偏压测量同位素组成。以Zn同位素可以在离子交换层析2被分馏,所有的锌原子的集合确保没有同位素分馏发生时,这意味着该化学过程应当有充分的产率。最后,质谱测量时的器乐同位素分馏的校正是通过“标准包围”的方法进行。

因此,存在的主要困难,以获得精确的测量结果控制外部污染( 低空白),生产全收率化学纯化的洁净的任何其他原子或分子,并校正在质谱仪器乐同位素分馏。在本文中,我们将介绍我们的分析协议锌从小鼠器官以及在质谱测量分开。

提取是使用稀释的酸的低量(的HBr / HNO 3介质)上的阴离子交换树脂的微柱(0.5微升和0.1微升)。它有一个完整的产量和测量有一个外部的可重复性优于50 ppm的在66锌/锌64的比例。冰毒的另一个优点外径是,它是非常快的。该方法因此很好地适应于医学,其中一个需要分析大量的样品相比,地球科学,在那里被开发这些分析方法。

Protocol

注:程序涉及动物已被批准的机构动物护理和使用委员会(IACUC)在巴黎大学狄德罗。 1.准备材料亚沸腾馏1升的酸(HNO 3,氢溴酸),以从杂质纯化它们。 清洁烧杯和尖端适配器在热(〜100℃)浓HNO 3酸浴中至少两天。 洗冷3 N HNO 3浴室的枪头数天,单独漂洗三次去离子水。 2.样品制备麻醉小鼠腹腔注射氯胺酮和?…

Representative Results

在1.5N的HBr的,主要锌物种(ZnBr3-)形式非常强配合物与阴离子交换树脂,而大多数其他元素不与树脂相互作用。锌,然后,通过改变介质稀释的HNO 3,改变Zn构成的形态至Zn 2+这是从树脂6,7释放回收。 同位素比通常表示为每1000个的偏差相对于标准部分: <p clas…

Discussion

测量的再现性,通过在不同的分析会话进行同一样品重复分析评价。例如如图6所示 ,我们已复制同一陆地岩石7倍,我们获得了记录在表2中的结果。

正如预期的那样从同位素分馏10的理论和测量任何太阳系材料至今( 陨石11-13,3-5植物,深海沉积物中14,动物15-17),结果遵循质量-依赖法(参见图1)。</stro…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

FM通过chaire D'IDEX卓越巴黎的索邦大学太阳城确认来自ANR资助下,INSU通过PNP赠款,研究所区大学法国以及在巴黎的索邦大学太阳城(ANR-10-的LabX-0023和ANR的Labex UniverEarth程序-11-IDEX-0005-02)。我们也感谢来自欧洲研究委员会的资助下,欧洲共同体的H2020框架方案/ ERC赠款协议#637503(精粹)。

Materials

Name of Material/ Equipment Company Catalog Number Comments/Description
Multi-collection inductively-coupled-plasma mass-spectromter Thermo-Fisher
Anion-exchange resin AG1 X8 200-400 Bio-Rad 140-1443-MSDS
teflon beakers Savillex  200-015-12
Home-made teflon colunms made with shrinkable teflon

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check_url/cn/52479?article_type=t

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Cite This Article
Moynier, F., Le Borgne, M. High Precision Zinc Isotopic Measurements Applied to Mouse Organs. J. Vis. Exp. (99), e52479, doi:10.3791/52479 (2015).

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