Transplantation av fasta organ såsom hud, hjärta och njurar är nu ett standardförfarande i medicinsk praxis i hela världen ^1. Framgångsrikt transplanterade organ kan avvisas av aktivering av mottagarens immunsystem, som erkänner de stora histokompatibilitetsantigener av donatorn. Därför transplanterade patienter behöver behandling med immunosuppressiva läkemedel ^2. Allogen hud transplantation på möss etablerades av Medawar och kollegor i 1955 och var till hjälp för att identifiera de riktade molekylerna senare beskrivs som MHC (MHC) klass I och II. Sedan dess har hudtransplantation modellen kontinuerligt modifierats och anpassats för att studera betydelsen av T-cell-undergrupper och relevansen av kemiska och biologiska intervention i trycka avstötning av transplantat ^2-4. Hud från örat och bålen är svårare att förbereda och är mer mottagliga för hypoxi och nekros än tail-skin ^5; docktransplantationsförfarandet är likartad. Dessutom är lätt på grund av den karakteristiska hårstruktur av huden övervakning av svans-hudtransplantat.

Den här artikeln innehåller en detaljerad beskrivning av MHC klass II mismatch svans-hudtransplantation som gör det möjligt att studera olika aspekter av CD4 ⁺ T-cellmedierad avstötning och tolerans hos möss. Den naturliga tre-punktmutation i MHC klass Il-molekyl IA ^b (kallat IA ^{bm12) 6-9} är tillräcklig för att inducera avstötning av hud-allograft i C57BL / 6 möss ^8. Den IA ^bm12 molekylen aktiverar CD4 ^+-T-celler med diverse cell αβ-T-receptor (TCR)-kedjor från C57BL / 6 möss, bland vilka Vα2Vβ8-TcR-specifika T-celler identifierades i syfte att alstra en TCR-transgen mus ^10. Den adoptiv överföring av Vα2Vβ8-TcR-specifika T-celler har använts för att etablera en kasse modell i immundefekta C57BL / 6 RAG2 ^{– / –} möss som transplanterats med IA ^bm12 hud.

Genetiska skillnader mellan givare och mottagare påverkar resultatet av transplantatacceptans och avvisande. Det finns olika typer av transplantationer: auto är transplantationer från den mottagande individen själv; syngrafts och allografter är transplantationer från genetiskt identiska och genetiskt obesläktade individer respektive. Godkännande av olika transplantationer allogen organ har visats genom kemisk och biologisk ingripande i patienter och musmodeller ^11,3,4. I en grundläggande tillvägagångssätt, anti-CD3-antikropp-behandlade C57BL / 6 möss uppvisade förlängd överlevnad av IA ^bm12 tail-skin (opublicerade data). Utarmning av CD4 ⁺ och CD8 ⁺ T-celler före transplantation i mottagarländerna möss resulterade i godkännande av MHC klass I och II inkompatibla transplantat (rev. i ^12). Intressant, avstötning av hudtransplantation beror på närvaron av CD4 ⁺ </sup> T-celler (rev. i ^12). I denna modell kan rikta specifika interaktioner mellan olika immunceller genom att blockera samstimulerande molekyler med antikroppar eller undertryckande med regulatoriska T-celler inducerar tolerans (opublicerade data). Faktum är att blockera både CD40 och CD28 ledde till långvarig hud allograft tolerans ^13,14.

Svans hudtransplantation är lätt att utföra och lätt att övervaka jämfört med transplantation av andra organ. Dessutom svans-hud transplantationer är lätt att förbereda och är mindre känsliga för ischemi än andra hud vävnader. I motsats till injicerade bedövningsmedel, användning av narkosgasen (isofluoran) vid transplantation förkortar både förfarandet och mottagare återhämtningstid. Curling av svansen-hud transplantation, vilket kan leda till ofullständig sårläkning och transplantatavstötning, förhindras genom tillämpning av vävnadslim. Dessutom IA ^bm12 tail-hudtransplantation modell aktiverar CD4 uteslutande <sup> + T-celler i både immunkompetenta och immundefekta möss (med samma genetiska bakgrund) att underlätta tolkningen av resultaten.

Detta protokoll beskriver en pålitlig, reproducerbar och lätt övervakas musmodell som möjliggör kemisk och biologisk ingripande. Modellen är avsedd för undersökning av avstötning och toleransinduktion av svans-hudtransplantat.