El trasplante de órganos sólidos, como la piel, el corazón y los riñones es ahora un procedimiento estándar en la práctica médica en todo el mundo ^1. Órganos trasplantados con éxito pueden ser rechazadas por la activación del sistema inmune receptor, que reconoce los antígenos principales de histocompatibilidad del donante. Por lo tanto los pacientes transplantados necesitan tratamiento con medicamentos inmunosupresores ^2. El trasplante alogénico de piel en ratones fue establecido por Medawar y sus colegas en 1955 y ha sido útil para la identificación de las moléculas específicas que se describen más adelante como complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase I y II. Desde entonces, el modelo de trasplante de piel ha sido modificado y adaptado para estudiar el papel de los subconjuntos de células T y la relevancia de la química y la intervención biológica en la supresión de rechazo de injertos ^2-4 continuamente. La piel de la oreja y el tronco son más difíciles de preparar y son más susceptibles a la hipoxia y la necrosis de la piel de la ^cola-5; Sin embargo,el procedimiento de trasplante es similar. Además, el seguimiento de trasplantes de cola de la piel es fácil debido a la textura del cabello característico de la piel.

Este artículo proporciona un procedimiento detallado de MHC de clase II desajuste trasplante de cola de la piel que permite el estudio de los diferentes aspectos de la T CD4 ⁺ rechazo de aloinjertos mediada por células y la tolerancia en ratones. La mutación natural de tres puntos en la molécula de MHC clase II IA ^B (llamado IA ^{BM12) 6-9} es suficiente para inducir el rechazo de aloinjertos de piel en ratones C57BL / 6 ^8. La molécula de ^BM12 IA activa las células T CD4 ⁺ con diferentes receptor de células αβ-T (TCR) cadenas de ratones C57BL / 6, entre las que se identificaron las células T Vα2Vβ8-TCR-específicas con el fin de generar un ratón transgénico ^TCR-10. La transferencia adoptiva de células-TCR-específicos Vα2Vβ8 T se ha usado para establecer un modelo de rechazo en C57B inmunodeficienteL / 6 Rag2 ^{– / –} ratones transplantados con la piel IA ^BM12.

Las diferencias genéticas entre el donante y el receptor afectan el resultado de la aceptación y el rechazo de trasplante. Hay diferentes tipos de trasplantes: autoinjertos son los trasplantes de la persona beneficiaria misma; syngrafts y aloinjertos son los trasplantes de individuos genéticamente idénticos y no relacionados genéticamente, respectivamente. Aceptación de diferentes trasplantes de órganos alogénicos se ha demostrado por la intervención química y biológica en pacientes y modelos de ratón ^11,3,4. En un enfoque básico, anti-CD3 tratados C57BL / 6 ratones mostraron una supervivencia prolongada de IA ^BM12 cola-piel (datos no publicados). El agotamiento de los CD4 ⁺ y CD8 ⁺ T las células antes del trasplante en ratones receptores resultó en la aceptación de MHC de clase I y II injertos no coincidentes (Apocalipsis en ^{el 12).} Curiosamente, el rechazo de injertos de piel depende de la presencia de células CD4 ⁺ </sup> Células T (rev. en ^12). En este modelo, la orientación interacciones específicas entre diferentes células inmunes mediante el bloqueo de las moléculas coestimuladoras con anticuerpos o supresión con células T reguladoras podría inducir tolerancia (datos no publicados). De hecho, el bloqueo de ambos CD40 y CD28 dio lugar a la tolerancia ^13,14 aloinjerto de piel a largo plazo.

Trasplante de Cola-piel es fácil de realizar y fácil de controlar en comparación con el trasplante de otros órganos. Además, los trasplantes de cola de la piel son fáciles de preparar y son menos susceptibles a la isquemia de otros tejidos de la piel. En contraste a los anestésicos inyectados, el uso de gas anestésico (isofluorano) durante el trasplante acorta tanto el procedimiento y el tiempo de recuperación destinatario. Curling del trasplante de cola de la piel, que puede conducir a la cicatrización de heridas incompleta y el rechazo del injerto, se evita mediante la aplicación de adhesivo de tejido. Además, el modelo de trasplante de piel de la cola-IA ^BM12 activa exclusivamente CD4 <sup> + Células T, tanto inmunocompetentes como ratones inmunodeficientes (de los mismos antecedentes genéticos) facilitar la interpretación de los resultados.

Este protocolo describe un modelo de ratón fiable, reproducible y fácilmente controlables que permite la intervención química y biológica. El modelo está diseñado para investigar el rechazo y la tolerancia a la inducción de los trasplantes de cola de la piel.