O transplante de órgãos sólidos, tais como a pele, o coração e os rins já é um procedimento padrão na prática médica mundial ^1. Órgãos transplantados com sucesso pode ser rejeitado pela activação do sistema imune receptor, o qual reconhece os principais antigénios de histocompatibilidade dos dadores. Pacientes transplantados Portanto precisam de tratamento com drogas imunossupressoras ^2. O transplante alogênico de pele em ratos foi estabelecida por Medawar e seus colegas em 1955 e foi útil para identificar as moléculas-alvo mais tarde descrito como complexo principal de histocompatibilidade (MHC) de classe I e II. Desde então, o modelo de transplante de pele tem sido continuamente modificado e adaptado para estudar o papel das subpopulações de células T e a relevância da química e biológica de intervenção na supressão da rejeição do enxerto ^2-4. Pele da orelha e tronco são mais difíceis de preparar e são mais suscetíveis à hipóxia e necrose de pele ^tail-5; no entanto,o procedimento de transplante é semelhante. Além disso, o monitoramento de transplantes de cauda de pele é fácil, devido à textura do cabelo característico da pele.

Este artigo fornece um procedimento detalhado para a classe II do MHC transplante incompatibilidade cauda-de pele que permite que para o estudo de diferentes aspectos dos linfócitos T CD4 ⁺ mediada por células T e tolerância rejeição do enxerto em murganhos. A mutação de três pontos natural na molécula de MHC de classe II IA ^b (chamado IA ^{BM12) 6-9} é suficiente para induzir a rejeição de enxertos de pele em ratos C57BL / 6 ^8. A molécula ^BM12 IA activa as células T CD4 ⁺ com vários receptores de células αβ-T (TCR) cadeias de ratinhos C57BL / 6, entre os quais as células T Vα2Vβ8-específicos de TCR foram identificados, a fim de gerar um ratinho transgénico ^Tc-10. A transferência adoptiva de células T específicos de TCR Vα2Vβ8 tem sido usado para estabelecer um modelo de rejeição em C57B imunodeficienteL / 6 RAG2 ^{– / –} ratos transplantados com IA ^BM12 pele.

As diferenças genéticas entre doador e receptor influência sobre o resultado de aceitação de transplante e rejeição. Existem diferentes tipos de transplantes: auto-enxertos são transplantados a partir do próprio indivíduo receptor; syngrafts e enxertos são transplantes de indivíduos geneticamente idênticos e geneticamente não relacionadas, respectivamente. A aceitação de transplante de órgãos alogénicos foi demonstrada por intervenção química e biológica de pacientes e de modelos de rato ^11,3,4. Numa abordagem básica, anti-CD3 tratadas com anticorpo C57BL / 6 ratos mostraram sobrevivência prolongada de IA ^BM12 cauda-de pele (dados não publicados). A depleção de células T CD4 ⁺ e CD8 ^+, células T antes do transplante em ratinhos receptores resultou na aceitação do MHC de classe I e II enxertos incompatíveis (rev. em ^12). Curiosamente, a rejeição de enxertos de pele depende da presença de células T CD4 ⁺ </sup> As células T (Rev. em ^12). Neste modelo, tendo como alvo as interacções específicas entre as células imunes diferentes, bloqueando as moléculas de co-estimulação com anticorpos ou com supressão de células T reguladoras, pode induzir tolerância (dados não publicados). Na verdade, bloqueando tanto CD40 e CD28 levou a longo prazo a tolerância do enxerto de pele ^13,14.

O transplante de pele da cauda-é fácil de realizar e é fácil de monitorizar em comparação com o transplante de outros órgãos. Além disso, os transplantes de pele de cauda são fáceis de preparar e são menos susceptíveis à isquemia do que os outros tecidos da pele. Em contraste com os anestésicos injectáveis, o uso de gás anestésico (isoflurano) durante o transplante de ambos encurta o processo e o tempo de recuperação do destinatário. Curling do transplante de cauda-de pele, o que pode conduzir a cicatrização incompleta e rejeição de enxerto, é evitada por aplicação de adesivo de tecido. Além disso, o modelo de transplante de pele da cauda-IA ^BM12 ativa exclusivamente CD4 <sup> + Células T, tanto em imunocompetentes e camundongos imunodeficientes (do mesmo fundo genético) facilitando a interpretação dos resultados.

Este protocolo descreve um modelo fiável, reprodutível e facilmente monitorado rato que permite a intervenção química e biológica. O modelo destina-se a investigar a rejeição ea tolerância indução de transplantes de rabo-de pele.