Transplantasjon av faste organer som hud, hjerte og nyrer er nå en standard prosedyre i medisinsk praksis over hele verden ^en. Vellykket transplanterte organer kan forkastes ved aktivering av mottakerens immunsystem, som gjenkjenner de store histocompatibility antigenene til donoren. Derfor transplanterte pasienter trenger behandling med immundempende medisiner ^to. Allogen transplantasjon hud hos mus ble etablert av Medawar og medarbeidere i 1955, og var nyttig for å identifisere de målrettede molekyler senere beskrevet som store histocompatibility kompleks (MHC) klasse I og II. Siden den gang har hudtransplantasjon modellen vært kontinuerlig modifisert og tilpasset for å studere rollen til T celle undergrupper og relevansen av kjemiske og biologiske intervensjon i å undertrykke pode avvisning ^2-4. Hud fra øret, og stammen er mer vanskelig å fremstille og er mer utsatt for hypoksi og nekrose enn hale-skin ^5; Mentransplantasjon prosedyren er lik. I tillegg til overvåkning av tail-skin transplantasjoner er lett på grunn av den karakteristiske konsistens av hår på huden.

Denne artikkelen gir en detaljert fremgangsmåte for MHC klasse II mismatch tail-hudtransplantasjon som gjør det mulig for studier av ulike aspekter av CD4 ⁺ T-celle-mediert allograft avvisning og toleranse hos mus. Den naturlige tre-punkt-mutasjon i MHC klasse II molekyl IA ^b (kalt IA ^{bm12) 6-9} er tilstrekkelig til å indusere hud-avvisning av allografter i C57BL / 6 mus ^8.. IA ^bm12 molekyl aktiverer CD4 ⁺ T-celler med forskjellige αβ-T-celle-reseptoren (TCR) kjeder fra C57BL / 6 mus, hvorav Vα2Vβ8-TCR-spesifikke T-celler ble identifisert for å generere en TCR-transgene mus ^10. I adoptive transfer of Vα2Vβ8-TCR-spesifikke T-celler har blitt brukt for å etablere en avvisning modell i immunodeficient C57BL / 6 Rag2 ^{– / –} mus transplantert med IA ^bm12 hud.

Genetiske forskjeller mellom giver og mottaker påvirke utfallet av transplantasjon aksept og avvisning. Det finnes forskjellige typer transplantasjoner: autografts er transplantasjoner fra mottakeren enkelte selv; syngrafts og allografts er transplantasjoner fra genetisk identiske og genetisk ubeslektede individer hhv. Aksept av forskjellige allogene organtransplantasjoner har blitt demonstrert av kjemiske og biologiske intervensjon hos pasienter og musemodeller ^11,3,4. I en grunnleggende tilnærming, anti-CD3 antistoff-behandlet C57BL / 6 mus viste forlenget overlevelse av IA ^bm12 tail-hud (upubliserte data). Nedbryting av CD4 ⁺ og CD8 ⁺ T celler før transplantasjon i mottaker mus resulterte i aksept av MHC klasse I og II umake grafts (rev. i ^12). Interessant, avvisning av skin grafts avhenger av nærværet av CD4 ⁺ </sup> T-celler (rev. i ^12). I denne modellen, kan målrette spesifikke interaksjoner mellom ulike immunceller ved å blokkere kostimulerende molekyler med antistoffer eller undertrykkelse med regulatoriske T-celler indusere toleranse (upubliserte data). Faktisk, blokkerer både CD40 og CD28 førte til langsiktig hud allograft toleranse ^13,14.

Tail-hudtransplantasjon er lett å utføre og lett å overvåke forhold til transplantering av andre organer. I tillegg, hale-skin transplantasjoner er lett å tilberede og er mindre utsatt for ischemi enn andre hudvevet. I motsetning til injiserte bedøvelsesmidler, bruk av anestesigass (isofluorane) under transplantasjon forkorter både fremgangsmåten og mottaker restitusjonstid. Curling på halen-hud transplantasjon, noe som kan føre til ufullstendig sårheling og pode avvisning, forhindres ved bruk av vev lim. Videre IA ^bm12 tail-hudtransplantasjon modell aktiverer utelukkende CD4 <sup> + T celler i både immunkompetente og immunsvikt mus (av samme genetiske bakgrunn) å legge til rette tolkningen av resultatene.

Denne protokollen beskriver en pålitelig, reproduserbar og enkelt overvåkes mus modell som gjør det mulig for kjemisk og biologisk intervensjon. Modellen er beregnet for å undersøke avvisning og toleranse induksjon av hale hud transplantasjoner.