大型動物モデルの絶縁型ワーキングハートシステム

1。ランゲンドルフ装置の構築（ 図1を参照してください） 3/8 "チューブを用いて、血液貯留、心臓リザーバを接続する。 このチューブは、ローラーポンプを通過することを確認してください。注：これはローラーポンプを通過する1/4 "チューブの部分を作成するために2 3/8チューブコネクタ「1/4」を使用して必要な場合があります。 3/8 "のチューブとヒーター/人工肺に貯血槽を接続します。 Yコネクタにヒーター/人工肺を接続するために3/8 "のチューブを使用してください。 第2のYコネクタ（すべて3月8日に "チューブ）に遠心ポンプを接続して、遠心ポンプにYコネクタの一方のアームを接続します。 気泡トラップと圧力変換器を挿入する手段の両方として機能する上向きアームに止血弁を固定する配管ピース3/8 "を取り付ける。 下向きのアームに3/8 "チューブの一部を添付してください。この部分は、AORに付着する （後負荷ラインIE）TICカニューレ。 3/8 "のチューブを使用して、プリロード室の流入にYコネクタの他のアームを接続します。このチューブは第二のローラーポンプを通過することを確認してください。 このチャンバーの流出に対する過剰3/8 "のチューブを接続します。この部分は（プリロード·ラインIE）左心房に付着する。 ヒーター/人工肺に酸素タンクと加熱装置を接続します。 心臓が作業モードになるまで、この行は使用されませんように、予圧室にYコネクタから行くラインをクランプする。 2。圧力 – 体積カテーテルの準備 37℃の水浴中で、生理食塩水の瓶を温める。 少なくとも30分間、温生理食塩水にPVコンダクタンスカテーテルおよび圧力変換器を浸す。 どちらも、少なくとも30分間ウォームアップすることができ、データ·アクイジション·システムの電源をオンにします。 TLE "> 3。ランゲンドルフ装置の準備酸素タンク、加熱装置、2つのリザーバを接続するローラポンプ、遠心ポンプの電源をオンにします。加熱装置は、動物の体温（〜36°C）に設定されるべきである。 メーカーの指示に従って血を洗う。低速の洗浄速度は血液から老廃物をより完全に除去（ 例えば 、過剰の電解質、溶解された細胞物質）をお勧めします。 血液を洗浄した後、前に血液希釈のヘマトクリットレベルをチェック。 希望のヘマトクリット濃度（推奨:20-25％）のための生理食塩水で洗浄した赤血球を再構成し、ランゲンドルフ装置に追加する。 （プリロード室を除く）システムを介して血流を開始するために二つのポンプの速度を調整します。 血液混合物のpHと電解質を確認し、使用される種のための生理学的になるまで調整します。注：有害でのを防ぐために再灌流時にカルシウムのフラックスは、ランゲンドルフ装置上のカルシウムレベルは、最初は（0.3〜0.5ミリモル/ L）を低く保つべきである。 カリウムが同時増加に伴ってヘマトクリットの減少がある場合には、溶血を除外するために乳酸脱水素酵素および血漿遊離ヘモグロビンをご確認ください。 ケース溶血内のすべての接続が締まっていると明らかにホテルSheeringのない領域が存在しないことを確認、発生しません。 パワーラブシステムの二次圧スロットにミラーカテーテルを取り付けます。 製造業者の指示に従って圧力変換器を較正する。 4。ランゲンドルフ装置に取り付けるための心の準備注記：正しく逮捕心臓は、孤立した心臓系を含む任意の大規模な動物実験のために使用されるべきである。心臓麻痺逮捕の欠如は、それが測定可能な作品を制作しないような心を損傷する可能性があります。セルシオ、または低カリウムユニバーウィスコンシン州のsityは（UW）ソリューションのように、推奨されているだけでなく、これらのソリューションは、臨床的に使用されるものと同様であるが、溶液の低カリウム、回路上ながら高カリウム血症を防ぐのに役立ちます。心筋保護液の量は、ブタの心臓に十分な1リットルで、心臓の大きさに依存します。 すぐに、脳室内の任意のストレージソリューションを注ぎ、乾燥ブロットおよび重さ、貯蔵容器から心臓を取り出します。 、心臓はランゲンドルフ準備が整うまで冷たい心筋の温度を維持するのに役立つ保存容器にハートを返し、その大動脈が上を向いているので、それを配向させる。 大動脈に3/8 "カニューレを挿入し、ジップタイで固定します。 5。ランゲンドルフ心臓の取り付け遅い細流に遠心ポンプを減少させる。 それは血液で充填され、完全に脱気されるまでの大動脈に血液をトリクル。 慎重に大動脈Cを添付ランゲンドルフ上の大動脈チューブにannula。添付ファイルの時間をメモしておきます。 ネイティブ大動脈に止血弁[DS1]から校正された圧力変換器を挿入します。 圧力測定を開始し、所望の灌流圧が達成されるまで、遠心ポンプ速度を調整する。注：圧力は、冠状動脈抵抗の変化を変更することがあります。そのため、特に初期の再灌流の間に、密接に大動脈圧を監視します。 加温部の温度を増加させる心筋内の温度は37℃で測定した注：加温装置および心筋内温度の変化のための調整の間に遅延があるでしょう。そのため、温度変化が徐々になされるべきである。 pHは、電解質、および他の生化学的測定値を測定するために、静脈貯血槽からベースライン（T = 0）のサンプルを入手します。 セプタムに温度プローブを挿入し、心筋の温度を監視します。加温装置の温度を低下させる心筋の温度が39℃以上に上昇した場合実験のために所望に応じて生理学的パラメータを調節すること、血液サンプルを15分ごとにとる。 作業モードの開始前に>イオン性カルシウムであることを確認して、血液溶液に0.8ミリモル/リットルを5分毎に約1モルのカルシウムを追加します。 6。作業モードに心を置く左心房/肺静脈に適切なサイズのカニューレを挿入します。これは、必要に応じて、巾着縫合またはzipネクタイのどちらかで行うことができます。 必要に応じて、このような縫合糸またはステープルで他の肺静脈起源として、漏れる可能性が左心房内の任意の穴を閉じます。 列の高さが必要な予圧を与えるようにプリロード室の高さを調整します。注：血液/クリスタ混合物の密度を想定すると、水の密度は、1 mmHgの=のトップに大動脈弁からの距離の1.36センチメートルに等しいプリロード·リザーバー（ 例えば 、15 mmHgの= 20.4センチメートル）での血中濃度。 プリロード室に行くチューブをアンクランプし、徐々にプリロード室とプリロードチューブは血液で完全に埋めることができ、プリロードローラーポンプを起動します。 プリロードチューブが完全に脱気された後、ゆっくりと血液と左心房とカニューレを埋める。 任意の空気がシステムに入ることを可能にすることなく、左心房カニューレにプリロードチューブを接続します。 7。心室圧力 – 体積（PV）レコーディングの取得データ収集システムのための圧力とのRhoキュベットキャリブレーションのためのメーカーの指示に従ってください。 左心室（LV）頂点に3-0ポリプロピレン縫合糸を使用した巾着縫合を置く。 16 Gの針を使用して、巾着の中に穿刺切開を行います。 頂端切開へのPVコンダクタンスカテーテルを挿入します。注：理想カテーテル留置は、DEPますすべての感知LV内の電極およびLV外側の2つの励起電極を有するに終わる。 （説明を参照）適切なサイズの動物や、カテーテルが選択されていることを確認してください。 を押して記録データを開始し、セグメントがアクティブになっているどのように多くの量を決定するには、右上にある「スタート」ボタンを押します。 すべてのセグメントがアクティブでない場合はすべてのセグメントがアクティブになるまで、カテーテルの位置を調整します。 NOTE：カテーテルのわずかなねじれがループ形態を最適化することが必要であり得る励振電極及び製造業者の指示に従って検出電極の位置を調整し、全てのセグメント内の信号を得ることができない場合。 必要な構成が得られると、ボリュームとアルファキャリブレーションのため、製造元の指示に従ってください。 適切に較正されたカテーテルを用いて、ベースライン圧力 – 容積データの少なくとも30秒を得る。注：これらの圧力-容積ループは依ボリュームを提供します心機能の凹みの測定（ 例えば 、心拍出量、一回拍出量）。 十分なループが得られると閉塞圧容量のデータを得るように、データの記録を停止することなく次のステップに進みます。 管クランプを使用して、ゆっくりとプリロードチューブを閉塞。注：圧力 – 容積ループが小さくなり、左にシフトダウンを開始する必要があります。これは、「歩く」と呼ばれています。 歩いて10〜15秒を取得し、左心房の再入力をプリロードを可能にするためのチューブクランプを解除する。 注：これらの圧力-容積ループ（ 例えば 、動員一回仕事、収縮末期圧容積関係をプリロード）心機能のボリュームの独立した測定値を提供します。 画面の右上にある「停止」ボタンを押すことで、データの記録を停止する。 繰り返す前に、少なくとも5分待ってください閉塞。 繰り返して反復測定を得るために、7.7と7.8を繰り返します。