İndirimli Itraconazole Konsantrasyon ve Süreleri Tedavisi Başarılı mısınız<em> Batrachochytrium dendrobatidis</em> Amfibi Enfeksiyon
Summary
Amfibiler Batrachochytrium dendrobatidis enfeksiyon, azaltılmış konsantrasyonu (% 0.0025) ve genel olarak kullanılan daha itrakonazol daha kısa süre (altı gün boyunca beş dakika banyolar) kullanılarak ortadan kaldırılabilir. Daha az mortalite ve daha az olumsuz yan etkileri bu modifiye tedavi protokolü kullanılarak gözlenmiştir.
Abstract
Amfibiler herhangi bir omurgalı sınıfının büyük düşüş yaşandığı ve bu düşüşler önde gelen nedeni hastalık chytridiomycosis neden olan bir mantar patojen, Batrachochytrium dendrobatidis (BD), olduğunu. Esir güvence kolonileri tehdit amfibi türlerinin için dünya çapında önemli olan ve nesli kritik tehlike olanlar için tek can simidi olabilir. Hastalıksız koloni bakımı esir yöneticileri bir önceliktir, tüm türler için ve yaşam evreleri arasında henüz güvenli ve etkili tedaviler tespit edilmemiştir. Yaygın olarak kullanılan bir dozaj, bazı bireyler ve türler için zararlı olabilir, ancak en yaygın olarak kullanılan kemoterapötik tedavi, itrakonazol olduğu. Biz itrakonazol daha düşük ve daha güvenli ama etkili doz Bd enfeksiyonları tedavi bulunamadı olmadığını değerlendirmek için klinik tedavi deneme gerçekleştirildi. Bulduğumuz bu 0.01-0.0025 'den% tedavi konsantrasyonu giderek düşürülür ve 11 ila tedavi süresini azaltarak5 dk hamam -6 gün, kurbağalar daha az yan etkileri ve daha az tedavi ile ilişkili mortalite ile Bd enfeksiyon tedavi edilebilir.
Introduction
Amfibiler şu anda tüm omurgalı takson 1 biyoçeşitliliğin büyük düşüş yaşıyoruz. . Chytridiomycosis, chytrid fungal patojen Batrachochytrium dendrobatidis (BD) neden olduğu bir deri hastalığıdır, Bd biyoçeşitlilik kaybına neden rekor kötü patojen olan bu dramatik düşüşler 2 önemli nedenlerinden biridir: amfibiyenlere 600 tür üzerinde bozar ve var 200 kadar türü kritik tehlike altında veya 2,3 soyu tükenmiş olan 300'den fazla türün düşüşler neden oldu. Amfibi chytrid mantar özgü ev sahibi değil ve ciddi hastalığa neden ilerleme Bd enfeksiyon için izin konağın hangi nitelikleri belli değildir. Chytridiomycosis elektrolit kaybı ve kalp yetmezliği ile sonuçlanan 4, deride iyon kanallarını bozarak ölüme neden olur. Aynı zamanda, (herhangi bir Bd zoosporlar ihtiva) Bd yüzer tetarlar bir bağışıklık tepkisi 5 Leadin neden olurg araştırmacılar Bd ürün 6 toksik üretir inanıyorum.
Birçok türün hızla azalmaktadır Çünkü, esir güvence koloniler ve ıslah programlarında önemli koruma önlemleri ve bazı türler için tek can simidi olabilir. Kurulması ve hastalıksız koloni bakımı amfibi yönetimi tesisleri için bir sorundur. Bd enfeksiyonların tedavisi için mevcut kemoterapötik yöntemler, etkili olmasına rağmen, tedavi edilen hayvanlar için zararlı olabilir ve tek bir tedavi yöntemi türleri ve amfibi 7 yaş sınıflar arasında başarılı olmuştur.
Bd enfeksiyonu için tedaviler birkaç klinik denemeleri 7 gerçekleştirilmiştir. Tedavinin üç en sık kullanılan yöntemler, ısı terapisi, kloramfenikol ve itrakonazol vardır. Isı terapisi az yan etkileri, çoklu hayat aşamalarında kullanılabilir olması için görünen bir nonchemotherapeutic tedavi seçeneği olduğunu ve homo olduğunumüttefiki etkili. Bir tedavi denemede, Chatfield ve Richards-Zawacki 8 ile muamele edilen hayvanların% 96, 10 gün boyunca 30 ° C 'de muhafaza edildikten sonra enfeksiyonların temizlenir olduğunu buldu. Bu deneme% 100 başarılı olmasa da, başkalarının, kendi türleri için ısı terapisi değerlendirmek için bir temel sağlar. Isı tedavisi, birçok türün için etkili olmalarına rağmen, uzun bir süre boyunca yüksek sıcaklıklarda kalamaz birçok dağ türler için pratik değildir. Kloramfenikol, bir bakteri öldürücü, bir çok türde Bd tedavisinde başarılı bir şekilde kullanılmıştır, ve in vitro olarak mantar gelişimini inhibe edilmiştir. Bir antibakteriyel olarak, kloramfenikol, özellikle mantar zarar vermez, ancak ökaryotik hücrelerde apoptosisi 9 neden olduğu bilinmektedir. Bu eylem mekanizması tam olarak bilinmemektedir, ancak kloramfenikol tedavisi, hücre içi sporangia öldürme, deri apoptoza neden olduğu iddia edilmiştir. Herhangi bir klinik deneme, bu nedenle yapılmıştır ve olmasına rağmendoz ve tedavi süresi, değerlendirilmemiştir güncel tedavi protokolleri genellikle karasal amfibiler için bu tedavi pratik yapma, 2-4 hafta 10,11 için suya batmaya gerektirir. İnsan maruz aplastik anemi 12 nadir bir formu ile ilişkili olduğu için kloramfenikol de veteriner kullanımı için bazı ülkelerde sınırlı olmuştur.
İtrakonazol, bir azol antifungal, en yaygın olarak tutsak amfibiler Bd enfeksiyonunun tedavisi için kullanılmaktadır. En yaygın olarak kullanılan protokol beş dakika 11 gün boyunca günde bir% 0.01 itrakonazol çözeltisi içinde banyo hayvan. Bu protokol, amfibiler için etkili iken, amfibiler 11,13 klinik çalışmalarda dayanmamaktadır, memeli uygulama için kullanılan standart elde edilmiş ve. Bu protokol, özellikle genus Rana ve tetarlar ve son Metamorphs 11, bazı türlerde olumsuz yan etkilere neden olabilir.Tadpole tedavi itrakonazol çok daha düşük bir konsantrasyonda (% 0.0005) kullanılarak başarılı olmuştur, ama depigmentasyon 14 ile ilişkilendirilmiştir. Bu aynı konsantrasyon son Metamorphs üzerinde trialed ve enfeksiyonu 15 tedavi de başarısız olduğu bulunmuştur. Itrakonazol tedavisi ile olumsuz yan etkilerin riski olduğundan, bazı hekimler 11 gün boyunca bir yarım olağan konsantrasyon (% 0.005) kullanılan ve bu Bd ENFEKSĠYONLARI 16 kür başarılı bulduk.
Bu çalışma Bd enfeksiyonunu tedavi etmek için 15 itraconazol'den kullanarak bir klinik tedavi çalışmasının bir özetidir. Protokol itrakonazol ile Bd enfekte hayvanların tedavisinde güvenli ve etkili hem de en düşük doz ve tedavi süresini bulmak için bir girişimde açıklanır. Bu çalışmada kullanılan hayvanların körfez sahili toads son Metamorphs, Incilius nebulifer idi.
Protocol
Representative Results
Discussion
Bu protokolü kullanarak biz güvenle ve etkili amfibialarda Bd için itrakonazol tedavisi tedavi dozunu ve süresini azaltmak için başardık. Düşük tedavi dozu ve süresi (altı gün boyunca 0.0025%) subklinik enfekte I. başarılı bir tedavi oldu nebulifer. Daha düşük bir doz ve tedavi süresi hem de etkinliği Amfibilerin bütün türlerin ve yaş sınıfları için kullanılacak hiçbir güvenli ve etkili tedaviler şu anda olduğu gibi, Bd enfeksiyon tedavileri için kli…
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ben yardım için deneysel tasarım kavramsallaştırma ve malzeme ile yardımcı bir tedavi rejimi ve otopsi kurulması yardım A. Pessier analizleri, MWH Chatfield, MJ Robak, K. kılıfları ve D. Lenger yardım için CL Richards-Zawacki teşekkür etmek istiyorum laboratuar ve çekimler sırasında kendi alanı kullanımı için destek ve Taronga Hayvanat Bahçesi'nde M. McFadden ve P. Harlow. Proje kısmen LA Brannelly verilen Louisiana Çevre Eğitim Komisyonu hibe yoluyla ve Yaşam Teknolojileri tarafından Yaban Hayatı ve Balıkçılık Louisiana Bakanlığı tarafından finanse edildi.
Materials
| 0.1% Aqueous Itraconazole, Sporonox | Janssen Pharmaceutica Inc. | |
| NaCl | Fisher Scientific | S640-500 |
| KCl | Fisher Scientific | BP366-1 |
| CaCl2 | Fisher Scientific | BP510-100 |
| NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328-500 |
| Sterile cotton swabs | Medical and Wire Equipment | MW113 |
| 1.5 ml micro tubes | Sarstedt | 73.703.217 |
| Qiagen DNEasy Blood and Tissue Kit | Qiagen | 69581 |
| 7500 Real-time PCR | Applied Biosystems | 4351104 |
| VIC IPC | Applied Biosystems | 4308323 |
| BSA | Applied Biosystems | AM2618 |
| Agar | Invitrogen | 30391023 |
| Tryptone | Invitrogen | Q10029 |
| Penicillin-streptomycin | Invitrogen | 15070-063 |
| Petri Dish | Sigma Aldrich | CLS430589 |
References
- Stuart, S. N., et al. Status and trends of amphibian declines and extinctions worldwide. Science. 306 (5702), 1783-1786 (2004).
- Skerratt, L. F., et al. Spread of chytridiomycosis has caused the rapid global decline and extinction of frogs. EcoHealth. 4, 125-134 (2007).
- Wake, D. B., Vredenburg, V. T. Colloquium paper: are we in the midst of the sixth mass extinction? A view from the world of amphibians. PNAS. 105, 11466-11473 (2008).
- Voyles, J., et al. Electrolyte depletion and osmotic imbalance in amphibians with chytridiomycosis. Dis. Aquat. Org. 77 (2), 113-118 (2007).
- Ramsey, J. P. Amphibian immune defenses against Batrachochytrium dendrobatidis: A war between host and pathogen. , (2011).
- McMahon, T. A., et al. Chytrid fungus Batrachochytrium dendrobatidis has nonamphibian hosts and releases chemicals that cause pathology in the absence of infection. PNAS. 110 (1), 210-215 (2013).
- Berger, L., Speare, R., Pessier, A., Voyles, J., Skerratt, L. F. Treatment of chytridiomycosis requires urgent clinical trials. Dis. Aquat. Org. 92, 165-174 (2010).
- Chatfield, M. W. H., Richards-Zawacki, C. L. Elevated temperature as a treatment for Batrachochytrium dendrobatidis infection in captive frogs. Dis. Aquat. Org. 94 (3), 235-238 (2011).
- Karbowski, M., et al. Free radical-induced megamitochondria formation and apoptosis. Free Rad. Biol. Med. 26 (98), 396-409 (1999).
- Bishop, P. J., et al. Elimination of the amphibian chytrid fungus Batrachochytrium dendrobatidis by Archey’s frog Leiopelma archeyi. Dis. Aquat. Org. 84 (1), 9-15 (2009).
- Pessier, A. P., Mendelson, J. . A Manual For Control of Infectious Diseases in Amphibian Survival Assurance Colonies and Reintroduction Programs. , (2009).
- Page, S. W. Chloramphenicol 1. Hazards of use and the current regulatory environment. Aus. Vet. J. 68 (1), 1-2 (1991).
- Yoon, H. -. J., Seo, M. H., Kim, J. -. K. . Pharmaceutical formulations for itraconazole. , (2005).
- Garner, T. W. J., Garcia, G., Carroll, B., Fisher, M. C. Using itraconazole to clean Batrachochytrium dendrobatidis infection, and subsequent depigmentation of Alytes muletensis tadpoles. Dis. Aquat. Org. 83, 257-260 (2009).
- Brannelly, L. A., Richards-Zawacki, C. L., Pessier, A. P. Clinical trials with itraconazole as a treatment for chytrid fungal infections in amphibians. Dis. Aquat. Org. 101 (2), 95-104 (2012).
- Jones, M. E. B., Paddock, D., Bender, L., Allen, J. L., Schrenzel, M. S., Pessier, A. P. Treatment of chytridiomycosis with reduced-dose itraconazole. Dis. Aquat. Org. 99 (3), 243-249 (2012).
- Boyle, D. G., Boyle, D. B., Olsen, V., Morgan, J. A. T., Hyatt, A. D. Rapid quantitative detection of chytridiomycosis (Batrachochytrium dendrobatidis) in amphibian samples using real-time Taqman PCR assay. Dis. Aquat. Org. 60 (2), 141-148 (2004).
- Martel, A., et al. Developing a safe antifungal treatment protocol to eliminate Batrachochytrium dendrobatidis from amphibians. Med. Mycol. 49 (2), 143-149 (2011).
- Bowerman, J., Rombough, C., Weinstock, S. R., Padgett-Flohr, G. E. Terbinafine hydrochloride in ethanol effectively clears Batrachochytrium dendrobatidis in amphibians. J. Herpetol. Med. Surg. 20 (1), 24-29 (2010).
- Young, S., Speare, R., Berger, L., Skerratt, L. F. Chloramphenicol with fluid and electrolyte therapy cures terminally ill green tree frogs (Litoria caerulea) with chytridiomycosis. J. Zoo Wildlife Med. 43 (2), 330-337 (2012).
